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DB21SpeciesidentificationofMactrachinensis辽宁省市场监督管理局发布I请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准起草单位:丹东永明食品有限公司、中国科学院海洋本标准主要起草人:张涛、宋浩、李永明、李朝辉、杨靖华、胡博、杨红生、周毅、张立1中国蛤蜊(种质)GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分:抽GB/T18654.12养殖鱼类种质检验第12部分:染色体组DB21/T1958-2012水产动物DNA鉴定线粒体COI基因序列法软体动物门(Mollusca)、双壳纲(Bivalvia)、5.1外部形态特征25.1.2色泽5.1.3绞合部左右两壳各具一主齿,左主齿呈“人”字形,右主齿呈“八”字形。左壳前后方各1齿,单片,右后闭壳肌痕略大于前闭壳肌痕,在前后闭壳肌上方各有一5.2软体部后闭壳肌大于前闭壳肌,略呈方柱形体,前闭壳5.2.4鳃身体左右各有鳃两片,内外鳃形状不同,外鳃小于内鳃,内外鳃在背缘与内脏囊相连,内鳃的3自然条件下,1龄壳壳长可达20mm~30mm。4龄或5龄时,壳长可达50mm~60mm。中国蛤蜊年龄、123~504~605~60每年只有一个繁殖期,繁殖盛期为5月中旬~8月上旬。其繁殖季节随着地理区域不同而存在差异,水温14℃以上时,可以排精、产卵。排精和产卵时亲贝双壳微张,配子从出水管缓缓排出。精子乳白色呈烟雾状,卵子粉红色呈丝缕状。分批产卵,壳长45mm的雌性个体,1次产卵量在70万粒~200万粒左右。卵沉性,排入水中的卵细胞不能立即4“TAGTAGCGCAATAAATTGTCCTTTAATTGGGGAAATGAATGAAAGGGTTGACGAGGGGGAAGCTATCTTTTTGGTATAGTTTGAAGTTTTCTTTTATGTGAAAAGACTTAGATTTTATAATTAGAAGAGAAGACCCCGGCGAGCTTGTTAAGGGTTACTAAGTTGAGGTAATTATTGATTTTTGTTGGGGCAACGCAAAGGGAAAAGAACTCCTTTGAGTTTTATAGGGATCCACTTAGAGTGAACAAAGCAAAAGCTACCGCGGGGATAACAGCGCAATTTCTTCAGAGAGCTCATATCGAAGAGG“ATCGACATCTTGAACGCATATTGCGGCTCCGGCTCAATGCCGAAGCCCCGCCTGTCCGAGGGTAGGCTAAACATAATCGCCCGTATCTGCCTGTCGAGGCACCGTTTCATTACGGTGAATCCAGCGCAGGGGCGACTTGGCGTTTCGCGCGAGCCTGTCTCGCCCGTTCGCTCGAGCTCTCCGCTCTCCCAGCAGGCCAACTCATTCAGTGGCGCAGGGACTGGGCCCGATCGGATCCAGTCTACCGTAGCTATCTGAAGGTCTCGCTGCGTTCTGCCGCCGTCCCTCTCGCCTCTTCGTGAGGCTCGATCGAGGTTGATGGCCACGACTAGCGCAACCGGCTCGATGTACAGCACTCTCACTGCGGCTTACCAGCCGCGGAGGTCGAGGAGCACCACGTCGCCGGGGAGTAACCCGTTCTCGCTCACTAGTTCGCTAGTAGCAGCTCGGGTTTGCGCGGTCTGTGCTTGGGGCAAGGAGCGGGCACCCAACCTATTCACTAGGTGAGTAGGCGGCGCACATAGTATAAAACAACCTACCTCGGATCAGACGAGACTACCCGCTGAATTTAAGCAT片段长度为627bp,检测特征见图3,片段的单倍型序列位点为:CATAAAGATATTGGCACTCTTTATTTCGTCTTTTCTTATTGGGCTGGGTTGGTAGGAACAGCTTTTAGCTCTATTATTCAGTTAGCTGTTCCTGGTGAGAGTCTTTTAGATGGGCAGCTTTATAATTTAGTTGTGACGGCGCATGCTTTAGTTATAATTTTTTTTTTAGTGATGCCAATAATGATGGGGGGTTTTGGGAATTGGTTAGTTCCTCTAATGTTAAAAGTTCCAGATATGAGGTTTCCTCGTATGAACAATATTAGGTTCTGACTTCTTCCTGTTTCTATTTTACTTCTATTTGCTTCGGCCTATGTTGAAAGAGGGGCAGGAACTGGTTGAACCATTTATCCTCCTCTGTCTAGGCATATAGGACATCCTGGACCGGCTATGGATTATGTTATTTTTTCTCTCCACGTAGGTGGTCTTTCTTCGATC5CTAGCATCTATTAATTTCTTTACAACTTTCCTAAGGATACGACTAAAGGTGATGTCTTTATATCGGGTTCCTTTGTTTGTTTGATGCTGTAACTAGGTTCTTGTTAGTAGTTGCTATACCTGTTTTGGCTGGCGCTCTTACTATGTTGTTAACAGATCGGAATTTCAA观察100个左右的分散良好的中期分裂相,记数确定二倍体数。从中挑选10个分散良好、形态清晰取足肌肉30mg,剪碎至糜状,使用DNA提取试65’-TGAGCGTGCTAAGGTAGC-3’5’-AGCCAACATCGAGGTCGC-3’5’-CACACTGAACATCGACAGCTTG-3’5’-GTTTCTTTTCCTCCGCTTACTG-3’),),8.3.5.1TAE(凝胶缓冲液和电泳缓冲液)7将Marker和PCR产物加入点样孔,上样完毕后,在室温条件下以120V~150V电压进行电泳
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