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备案号:34845-2012DB36DB36/T677—2012水稻抗稻瘟病人工接种评价技术规范Ruleofriceresistanceevaluationbyartificialinoculationtoriceblast[Magnaportheoryzae(Hebert)Barr.]2012-06–14发布2012-09-01实施江西省质量技术监督局发布I1本标准规定了水稻抗稻瘟病(Magnaportheoryzae(Hebert)Barr.)人工接种指用于人工接种鉴定用的能够侵染水稻并引起病害的稻瘟病菌分生孢子悬浮液,适用范围为ZA、鉴别寄主differential=(2抗性频率同一品种鉴定为抗病的菌株数/测定的总菌,即用2%水琼脂培养基分离病稻穗单孢菌株,分离物经形态学鉴定确认为稻瘟病菌后,用PDA培养基(去皮马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂18g,pH6.5,水1000ml)进行分离物纯接种应选择20个左右有代表性的菌株。要求所选菌株包括ZA、ZB和ZC类群,且毒性频率在70%琼脂18g)扩大培养7d~9d,然后在黑光灯下光照培养3d~4d。用无菌水洗下孢子,将接种孢子液浓度块3块,呈三角形置放,在平板空隙分别置放1×1cm2无菌滤纸片(7片置于4叶瘟抗性鉴定技术和水稻品种叶瘟抗性评价4.1叶瘟抗性鉴定技术4.1.1稻苗的培养3在孢子悬浮液中加入0.1%吐温20。接种后将秧苗置于培养室中暗培养,在25℃下保湿24h,之后在25℃~28℃下保湿至秧苗发病。每个菌株的致病性测定均设2个重复。病级来表示。0、1、3级为抗病,5、75穗瘟抗性鉴定技术和水稻品种抗性评4从田间选取破口1~2cm的稻穗,剪取长约8cm长的穗段(穗颈节上部段的穗颈节上、节下3cm及节下6cm处各滴入1滴稻瘟病菌孢子悬浮液4μl,将培养皿放入26℃的光照培培养8d后,检查各培养皿穗颈的发病情况,分级标准按5.4,某一品种的发病级别以该品5A.1学名和形态描述无性态为灰梨孢Phyriculariagrisea(Cooke)Sacc.异名:PyriculariaoryaeCav.称稻梨孢,属半知菌亚门真菌。有性态为稻大口球菌Magnaportheoryzae(Hebert)Barr.属分生孢子梗不分枝,3~5根丛生,从寄主表皮或气孔伸出,大小80.0~160.0×4.0~6.0μm,具2~8个隔膜,基部稍膨大,淡褐色,向上
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