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文档简介
DB32TechnicalspecificationsforSARS-CoV-2detePart12:Invitrodeterminationofantiviraleffectofd江苏省市场监督管理局发布I——第1部分：生物样本采集、运输和保存；——第3部分：核酸荧光PCR检测程序；——第6部分：血清IgM和IgG抗体胶体金免疫层析检测程序；——第10部分：微量血清中和试验；——第11部分：全基因组高通量测序；——第12部分：药物体外抗病毒效果测定。1DB32/T3762.3新型冠状病毒检测技术规范第3部分：核酸荧光PCR检测程序新型冠状病毒实验室生物安全指南中华人民共和国国家卫生健医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册中华人半最大效应浓度half-maximaleff24环境与设施4.1实验室资质及级别要求应符合《新型冠状病毒实验室生物安全指南》的要求，病毒培养包括病毒的分离、培养、滴定等取得开展相应活动的资质。病毒核酸荧光PCR检测程序可参照DB32/T37624.2操作人员资质及防护要求上岗证。操作人员在健康状态良好的情况下经实验室主任批准后方可开展活动，应根据《新型冠状病毒实验室生物安全指南》要求，按照BSL-3个人防护的5.2耗材手套、防水靴套、带滤芯Tip头、一次性平皿、EP管6.1.1Hanks溶液（每毫升6.1.4消化液（0.25%胰酶和36.2.2待检药物和阳性对照药物（少试验、病毒抗原测定、病毒核酸测定等方法来判断，本文件通过病毒核酸测定来评价药物体8.1.2待检药物稀释：将待检药物用细胞培养液做倍比稀释，使其稀释度分别为原液（选定浓度）、8.1.3分别取200μl不同稀释倍数的待检药物及相同条件稀释的药物溶剂（如DMSO）滴加于细胞培8.2.2待检药物稀释：将待检药物选用最大无毒浓度，用DMEM48.2.6在待检药物组、阳性对照药物组和病毒对照组的细胞孔中加入新型冠状病毒（2μl/孔，0.02），8.2.8病毒灭活与核酸提取：培养结束后，在倒置显微镜下核酸提取试剂的裂解液中，混匀后按照核酸提取试剂盒和核酸提取仪操作说明进行核酸8.2.9核酸检测：参照DB32/T37计算公式为（1-2-△CT）×100其中△CT=待检药物组CT值-病毒对照组CT值）。以病毒被抑制的9清场与消毒9.1操作结束后，及时清理生物安全柜要
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