DB32T 3205-2017 饲料中雪腐镰刀菌烯醇(NIV)的测定 免疫亲和柱净化-高效液相色谱法  _第1页
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文档简介

江DB32Determinationofnivalenol(NIV)infeed--Highperformanceliquidchromatographymethodwithimmunoaffinitycolumn江苏省质量技术监督局发布本标准主要起草人:张海彬、吴文达、施志玉、郑亚婷、贾惠、李荣佳、张杰、赵饲料中雪腐镰刀菌烯醇(NIV)的测定免疫亲和柱净化-高效液相色谱法本标准规定了饲料中雪腐镰刀菌烯醇检测的制样、免疫亲和柱净化和高效液相色谱检测本标准的检测限为2µg/kg,定量限为10是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规单个组份,再通过检测器进行检测,通过对比与分析即可定性定量地鉴定样品中的各个未知本检测方法所用试剂,凡未指明规格者,均为4.6雪腐镰刀菌烯醇标准溶液:准确称储备液,避光储存于4℃冰箱中,用于制备标准5.3旋转蒸发仪。26.3毒素提取称取试样10.0g置于150mL具塞锥形瓶中,加入30mL乙腈-水(84:16,V/V)振荡30min,过滤。再加入30mL乙腈-水(84:16,V/V)振荡提取30min,收集滤液至干净的容器中。6.4样品提取液的净化移取上述滤液8mL,过Mycosep@227免疫亲和柱进行净化。收集净化液4mL于圆底烧瓶中,在旋转蒸发仪上60℃蒸发至干。加入400μL乙醇于烧瓶中,超声溶解,将溶液转移至干净的进样瓶中。进孔滤膜后待测。6.4.1色谱条件a)色谱柱:ODS色谱柱(4.6mm×250mm,粒度5μm);b)流动相:甲醇-0.1%乙酸铵水溶液(20:80,VV);6.4.2色谱测定根据样液中雪腐镰刀菌烯醇的含量,选定浓度相近的标准工作液。标准工作液和样液中雪腐镰刀菌烯醇响应值均应在仪器检测线性范围内,色谱图见附录A。对标准工作液和样液等体积参差进样进行测定,确定保留时间,计算出标准工作液与样液的峰面积,根据标准溶液所测得的峰面积和对应的量,以峰面积为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线。根据标准曲线和样液的峰面积,得到样液中雪腐镰刀菌烯醇的含量(计算结果保留到小数点后一位有效数字)。6.4.3空白试验除不加试样外,空白试验应与测定平行进行,并采用上述相同的分析步骤。6.4.4平行试验按以上步骤,对同一试样进行平行试验测定。6.4.5计算所得实验数据按式(1)计算:(1)式中:X——试样中雪腐镰刀菌烯醇的含量,单位为微克每克(μgC——标准工作液中雪腐镰刀菌烯醇的浓度,单位为微克每毫升(μg/mV——样液最终定容体积,单位为毫升(mL);m——最终样液所代表的试样量,单位为克(g);6.5重复

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