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文档简介

生物样品的处理方法样品制备是体内药物分析极其重要的一个环节，往往也是分析中最难、最烦琐的步骤。药物在生物样品中常以多种形式存在。生物样品的介质组成比较复杂，有大量的内源性物质。一、样品制备方法选择的一般原则1生物样品的类型2药物的理化性质和浓度范围3药物测定的目的4样品制备与分析技术的关系二、样品的制备方法1去蛋白法（1）加入沉淀剂和变性试剂：加入中性盐、加入酸、加入金属离子。（2）加入可与水混溶的有机溶剂：如甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃等。（3）酶消化法：最常用的酶是蛋白水解酶中的枯草菌溶素。二、样品的制备方法2缀合物水解法（1）酸水解：通常加入适量的盐酸溶液；（2）酶水解：常用葡萄糖醛酸苷酶或硫酸酯酶或葡萄糖醛酸苷硫酸酯酶的混合酶。

药物经人体代谢后，多与内源性物质结合形成缀合物经尿液排出。所以在提取之前需要将缀合物中的药物释放，常用酸水解、酶水解及溶剂水解的方法。二、样品的制备方法3萃取分离法(1)液-液萃取法：液-液萃取法在体内药物分析中应用相当广泛，萃取一次即可除去大部分杂质，从大量的样品中提取药物经浓集后作为分析用样品，萃取时应注意溶剂的pH调节和提取溶剂的选择。二、样品的制备方法3萃取分离法(1)液-液萃取法1）溶剂的pH调节：对于碱性药物的最佳pH要高于pKa值1～2个pH单位；对于酸性药物则要低于pKa值1～2个单位。2）提取溶剂的选择：一般选择原则是在满足提取需要的前提下，尽可能选用极性小的溶剂。二、样品的制备方法3萃取分离法(2)液-固萃取法：将具有吸附分配或离子交换性质的、表面积大的载体作为填充剂，装于小分离管中，使生物样品的干扰物或药物保留在载体上而进行分离的方法。1）亲水性载体：硅藻土；2）疏水性或离子交换树脂载体：活性炭、聚苯乙烯、十八烷基键合硅胶等。二、样品的制备方法4化学衍生化法在色谱过程中，用特殊的化学试剂借助化学反应给样品化合物接上某个特殊基团，使其转变为相应衍生物之后进行检测的方法。分离前将药物进行化学衍生化的主要作用是使药物变成具有能被分

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