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文档简介
DB14山西省质量技术监督局发布I 1 1 1 2 2 2 3 3 4 41食用百合脱毒试管苗繁育技术规程操作、脱毒母株的获取、脱毒试管苗鳞茎的诱导和增殖、脱毒试凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适LMoV(百合斑驳病毒)病毒的,在封闭容器内繁殖的种24生产设施和仪器设备4.1生产设施4.2主要仪器设备超净工作台、压力蒸汽灭菌锅、鼓风干燥箱、光照培养箱、人工气候箱、冰箱解剖镜)、空调、照度计、自动控时器、温湿度计、酶标仪、高速冷冻离心机、电泳仪、电泳槽、PCR仪、微量移液器、电子天平、pH计、磁力搅拌器、电冰箱、移液枪、各种培养容器等。5培养基5.2植物生长调节剂母液的配制植物生长调节剂配制成浓度为0.5mg/mL~1mg/mL的母液。配制时,先用1mL~2mL95%乙醇溶解5.3培养基的制备分别加入不同浓度需用量的各种激素,定容后加入糖和琼脂,放入蒸煮锅内煮开,用0.1mol/L的HCl锅中进行灭菌。灭菌时工作压力稳定在1.1kg/cm2(0.105MPa),温度为121℃,灭菌时间20min。接种前,提前30min开启无菌室室内和超净工作台紫外灯照员方可进入室内操作。室内若有浮尘,可用75%3选择外观无病毒症状的植株,以其饱满、无病虫害、无损伤的健康鳞茎为脱毒培养材料,取中心菌水冲洗4~5次,再用无菌滤纸吸去表面水分,置于无菌培养将灭过菌的鳞茎置于40倍体式显微镜(双筒显微镜)下,用解剖针由mg/L+3%蔗糖培养基中,封口后,在培养瓶壁上标注编号、接种日期等。的检测,按照NY/T1744-200成分为1/2MS基本培养基,附加NAA0.5mg/L~1.0mg/L,蔗糖浓430~40d后分化出小鳞茎。培养条件为培养温度(25±2)℃,光照强度2000Lx~3000Lx,光照时间将诱导产生的试管鳞茎接种于MS+6-BA0.2mg/L~1.0mg/L+NAA0.1mg/L~0.5mg/L+6%~10%蔗糖培养基中,诱导小鳞茎增殖。培养30~40d后,再转接于MS+ZT1.0mg~3.0mg/L+IBA0.5mg~9脱毒试管鳞茎生根9.1试管鳞茎生根将增殖培养获得的脱毒鳞茎接种于1/2MS+NAA0.1mg~0.5mg/L+6%~10%蔗糖培养基中,诱导鳞茎生根。培养条件为温度(22±2)℃,光照强度2000Lx~3000Lx,光照时间14h~16h/d。9.2试管鳞茎出瓶标准9.3病毒检测移栽基质用蛭石、沙、土1:2:3比例混合均匀,或用腐叶土、蛭石1:1比例混合基
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