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备案号：35077-2012DB22DB22/T1589—2012高粱品种鉴定DNA指纹法（SSR）Identificationofsorghum(Sorghumbicolor(L.)Moench)varietiesusingDNAfingerprintingmethod(SSR)吉林省质量技术监督局发布I1GB/T3543.2农作物种子检2）：5.1.25亲和硅烷（bindingsil3至每种核苷三磷酸终浓度为10mmol40.25g过硫酸铵溶于1mL超纯水中，混匀。5引物在DNA分析仪上使用时，须在正向引物5′端加应按本标准方法，确定其大小和对应参照品种。参照品种的名9.1.1样品材料可为种子、幼苗、植株幼嫩叶片等组织或器官。对d)通风橱下加入700μL的氯仿:异戊醇（24:1），轻轻倒转摇动5min～10min；），轻混匀。-20℃冰箱静置一段时间后，至DNA凝集，室温下钩出DNA；6ng～40ng，其余以超纯水补足至所需体积。如果PCR过程中不采用热盖程序，则反应液上加盖15μL矿），到下部，在上部轻轻插入梳子，使其凝聚至少1h以上。灌胶过程中防止出现气泡。拔出梳子。80W恒功率预电泳30min～40min。7用移液器吹吸加样槽，清除残胶和气泡，插入样品梳子，每一个加c)染色：在新配染色液中，轻轻摇荡20min；使用DNA分析仪的片段分析软件，读出每个位点每个样品的等位变异片段大小数据。通过使用参照品种，消除同型号不同批次间或不同型号DNA分析仪间可能存在的系统误差。比较参照品种的等位将每个核心引物位点的所有谱带按扩增片段从小到大的顺序编号，用二位代码描述（依次为01、02……），对照参照品种的谱带确定待测样品的基因型。纯合位点的等位变异数据记录为X/X，其中X为该位点谱带的代码；杂合位点的等位变异数据记录为X/Y，其中X、Y为该位点上两个不同的谱带。8纯合位点的等位变异数据记录为X/X，其中X为该位点等位变异的大小；杂合位点的等位变异数据215bp，则该品种在该引物位点上的等位变异数据记测品种在这些引物位点的等位变异数据，利用这对待测品种进行检测后利用其检测数据和数据库中品种的数据进行比对时，先用附录A.1中20对基对品种间差异位点数=0、1的情况，将这些相近品种或疑同品种与待测品种按照11.1.2的方法进行9123456789123456789GAAATTACAATGCTACCCCTACTCTACTCCTTCCGTCCAGCAAGCGAGCTGACTTATGTACAAAGTGCTACTAAACCTATGCA引物相关信息1323324257677585

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