耳聋基因检测

遗传性耳聋基因检测耳聋概况1目录常见的致聋基因及位点

2耳聋基因诊断的方法

4耳聋筛查的意义32780万80万3.5万6%根据第二次全国残疾人抽样调查报告，我国听力语言残疾者多达2780万，居各类残疾之首。我国每年新增3.5万先天性聋儿，其中90%的聋儿出生于听力正常、没有耳聋家族史的家庭。在听力语言残疾人群中，0～6岁听力障碍儿童有80万，每年新增迟发性、药物性耳聋患儿3~5万。我国正常人群中耳聋基因的携带率高达6%，大部分非综合症性耳聋由GJB2、GJB3、SLC26A4、12SrRNA等基因的突变引起。耳聋概况14耳聋非综合征型耳聋（70%）遗传因素(约60%)常染色体隐性（80%）环境因素（约40%）综合征型耳聋（30%）Alport综合征Pendred综合征Waardenburg综合征BOR综合征Usher综合征细菌感染病毒感染耳毒性药物声损伤……常染色体显性（15%）X连锁遗传（1%~3%）线粒体遗传（＜1%）耳聋致病因素耳聋概况12003年起，首次全国性大规模聋病分子流行病学调查研究国内现状按统一的调查方式收集了10880例耳聋患者DNA样本，覆盖了28个省市地区20余个民族，对其进行常见耳聋遗传病因的流行病学调查。全国性聋病分子流行病调查结果GJB2、SLC26A4和mtDNA12SrRNA突变是导致中国大部分非综合征性遗传性耳聋的三个最常见的致病基因；GJB2、SLC26A4和mtDNA12SrRNA突变在非综合征耳聋人群中所占比例分别约为21%、14.5%和4.4%；GJB2与SLC26A4相关耳聋主要表现为常染色体隐性遗传非综合征性耳聋，mtDNA12SrRNA突变携带者表现为对氨基糖甙类药物敏感，遵循母系遗传方式。耳聋概况1常见的致聋基因及位点

2GJB212rRNAGJB3常见致聋基因SLC26A4遗传性耳聋特点遗传性耳聋突变位点具有明显的种族差异中国人群大部分遗传性耳聋由4个基因的突变所引起：

GJB2基因：先天性非综合性耳聋；GJB3基因：后天高频感音神经性耳聋；SLC26A4基因：先天或迟发性耳聋，大前庭水管综合征；12SrRNA基因：氨基糖苷类药物性耳聋。常见的致聋基因及位点

2GJB2基因特点第一个发现的非综合征性耳聋基因遵循常染色体隐性遗传模式在不同人群均具有显著的高发病率临床表现：绝大多数为先天性重度、极重度耳聋常染色体隐性遗传GJB2基因编码缝隙连接蛋白Cx-26，负责细胞间信号介导和离子传递，突变的GJB2基因可能导致连接蛋白异常，进而影响细胞间隙的连接功能，引起内耳钾离子回收障碍而致耳聋，Cx-26对维护耳蜗的正常功能非常重要。常见的致聋基因及位点

2常染色体显性遗传GJB3基因特点

GJB3基因是我国本土克隆的第一个遗传疾病基因临床症状主要与GJB3突变基因的外显度有关，表现为正常听力、轻度耳聋、中度耳聋、重度耳聋及极重度耳聋等遵循常染色体显性遗传模式

后天高频耳聋的常见突变基因

缺乏系统的流行病学统计数据常见的致聋基因及位点

2SLC26A4基因特点常染色体隐性遗传SLC26A4基因又称PDS基因，编码的Pendrin蛋白主要由疏水性氨基酸组成，参与碘/氯离子的转运。Pendrin蛋白发生异常即可影响细胞内外阴离子的转运，从而影响声音传递而导致听力损失。遵循常染色体隐性遗传模式，多表现为散发SLC26A4基因突变与大前庭水管综合征和Pendred综合征有密切关系临床表现：多在学龄前发病，呈进行性或波动性听力下降，多为重度以上感音神经性聋常见的致聋基因及位点

212SrRNA基因特点线粒体母系遗传线粒体突变遵循母系遗传模式临床表现为药物性耳聋对正常听力携带者进行正确用药指导可以预防耳聋

12SrRNA突变位点位于高度保守的小核糖体亚基氨酰—tRNA结合区域，是氨基糖苷类抗生素重要的识别区域。氨基糖苷类抗生素攻击12SrRNA突变携带者的耳蜗细胞中的线粒体，从而对这些细胞形成组织特异性的损伤，最终导致耳聋的发生。常见的致聋基因及位点

2GJB3临床表现与GJB3突变基因的外显度有关，为正常听力到极重度耳聋等不同症状后天需佩戴高频助听器进行听力补偿GJB2纯合突变或复合杂合突变表现为先天性重度或极重度双侧对称性感音神经性聋预示良好的人工耳蜗植入的治疗效果12SrRNA

氨基糖苷类药物引起的感音神经性耳聋避免使用耳毒性药物，并对其母系成员具有预防作用SLC26A4先天或后天中度以上感音神经性耳聋，临床主要表现为大前庭水管综合征指导并明确患儿的日常行为及注意事项遗传性耳聋的防治耳聋筛查的意义3家庭耳聋筛查社会医院节省财政开支提高出生缺陷防治水平推进计生、卫生服务水平开展耳聋基因的流行病学调查提高迟发性和药物性耳聋个体的诊断效率，减少医院漏检率婚育指导，实现优生优育早发现、早诊断、早干预，避免“因聋致哑”耳聋基因检测的意义耳聋筛查的意义3孕前筛查产前筛查新生儿筛查听障诊治耳聋基因检测的应用耳聋筛查的意义3卫生部2009年2月发布《新生儿疾病筛查管理办法》（卫生部令第64号），明确新生儿听力筛查为全国新生儿三大疾病筛查之一。随着新生儿听力筛查工作的广泛开展和临床经验的积累，逐渐发现在新生儿听力筛查中存在局限或缺陷，使得在普遍的新生儿听力筛查中联合耳聋基因筛查成为可能。卫生部2010年12月颁布《新生儿听力筛查技术规范（2010版）》修订版，旨在全国范围内全面系统的开展新生儿听力筛查。新生儿听力筛查政策耳聋筛查的意义3新生儿筛查方案耳聋筛查的意义3物理听力筛查耳聋基因筛查

通过未通过通过52834例(90.47%)3056例(5.24%)未通过2248例(3.85%)259例(0.44%)天津新生儿联合筛查数据结论：天津58397例新生儿筛查的结果表明，仅通过新生儿物理听力筛查，新生儿迟发性耳聋的漏检率高达5.24%。数据来源：韩冰,中国人民解放军医学院,2013耳聋筛查的意义3天津新生儿耳聋基因筛查未通过数据数据来源：韩冰,中国人民解放军医学院,2013（例数）（基因）8.89%91.11%4.02%95.98%6.59%93.41%5.50%94.50%结论：天津58397例新生儿筛查的结果表明，仅通过物理听力筛查，不同基因型的漏检率均超过90%以上。耳聋筛查的意义3北京耳聋出生缺陷防控效果3000例孕妇基因筛查（耳聋基因突变携带者160例，5.3%）夫妇同为GJB2携带者3对夫妇同为SLC26A4携带者3对后代耳聋风险25%86例孕妇配偶进行耳聋基因检测MtDNA12SrRNA携带者6例（0.2%）GJB2携带者105例（3.5%）SLC26A4携带者49例（1.6%）4对夫妇进行产前诊断1例胎儿确诊为遗传性耳聋，家庭选择引产包括胎儿在内的所有母系成员均为携带者，须终生绝对禁止使用氨基糖苷类抗生素，可有效避免耳聋的发生12个家庭具有生育遗传性耳聋后代的风险数据来源：韩明昱等,中华耳科学杂志,2011耳聋筛查的意义3耳聋基因筛查是降低耳聋出生缺陷的最有效的手段

新生儿筛查耳聋基因，耳聋早发现早诊断早干预

产前筛查耳聋基因，有效评估生育聋儿风险

高危人群筛查耳聋基因，显著降低后代耳聋风险耳聋筛查的意义3耳聋基因诊断的方法

4芯片法荧光探针法ARMS-PCR法测序法飞行时间质谱法熔解曲线法耳聋基因检测常用方法比较方法主要设备检测时间所需步骤特点DNA测序法PCR仪，测序仪＞10H核酸提取、PCR，电泳、纯化、测序金标准，操作繁琐，需要专门培训，结果判读复杂限制性内切酶法PCR仪，电泳仪约4H核酸提取、PCR、酶切、电泳检出率低，特异性差，操作复杂，需要跑电泳，易污染ARMS-PCR法基因芯片法PCR仪，杂交仪，扫描仪约5H核酸提取、PCR，杂交、洗涤、扫描通量高，较复杂，熔解曲线法荧光PCR仪约4H核酸提取、PCR根据峰图判断结果，非特异性扩增易产生假阳性飞行时间质谱法PCR仪，质谱仪＞10H核酸提取、PCR、纯化、打质谱操作复杂繁琐，对使用者要求较高荧光PCR法荧光PCR仪约3H核酸提取、PCR操作简单，实时监控，据扩增曲线判读，通量低测序技术金标准！耳聋基因诊断的方法

4PCR-RFLP分型技术

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4TaqMan探针分型技术

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4

MultiplexSNaPshot分型技术

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4电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）分型技术

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4HRM技术耳聋基因诊断的方法

4等位基因特异PCR技术耳聋基因诊断的方法

4公司产品名称检测位点检测方法优缺点博奥九项遗传性耳聋相关基因检测试剂盒GJB2:35delG、176-191del16、235delC、299-300delAT；GJB3：538C>T；

SLC26A4：IVS7-2A>G、2168A>G；

12SrRNA：1494C>T、1555A>G；微阵列芯片法检测位点少（9个）专用仪器价格高耗时长十五项遗传性耳聋相关基因检测试剂盒GJB2:35delG、176-191del16、235delC、299-300delAT；GJB3：538C>T；

SLC26A4：IVS7-2A>G、1174A>T、1226G>A、1229C>T、1975G>C、2027T>A、2168A>G、IVS15+5G>A；

12SrRNA：1494C>T、1555A>G；微阵列芯片法检测位点（15个）专用仪器价格高耗时长凯普耳聋易感基因检测试剂盒GJB2:35delG、176-191del16、235delC、299-300delAT；GJB3：538C>T；

SLC26A4：IVS7-2A>G、2168A>G；

12SrRNA：1494C>T、1555A>G；PCR-导流杂交法检测位点少（9个）市场上的耳聋产品耳聋基因诊断的方法

4公司产品名称检测位点检测方法优缺点中生北控四项耳聋基因检测试剂盒GJB2:235delC；

SLC26A4：IVS7-2A>G；

12SrRNA：1494C>T、1555A>G；ARMS-PCR法检测位点少（4个）济南英盛先天性耳聋基因检测试剂盒GJB2:512insAACG、176-191del16bp、235delC、299-300delAT；荧光PCR法检测位点（10个）通量低药物性耳聋基因检测试剂盒12SrRNA：1494C>T、1555A>G；耳聋基因GJB2235delC检测试剂盒GJB2:235delC；PDS基因突变检测试剂盒SLC26A4：IVS7-2A>G、1174A>T、、1229C>T、2168A>G；厦门致善遗传性耳聋基因检测试剂盒GJB2:35delG、167delT、176-191del16、235delC、299-300delAT；GJB3：538C>T、547G>A；

SLC26A4：IVS7-2A>G、1174A>T、1226G>A、1229C>T、1975G>C、2027T>A、2168A>G、IVS15+5G>A、2162C>T、749T>C、754T>C；

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