实验：《现代化妆品科学与技术实验》学习通超星期末考试答案章节答案2024年

实验：《现代化妆品科学与技术实验》学习通超星期末考试章节答案2024年制备平板时，怎样处理已经凝固好的固体培养基？手持法倒平板的时候应该怎样操作？

答案:将三角瓶中已灭菌的培养基置于电炉上或微波炉中加热使其熔化，加热时必须不时摇动三角瓶，以免受热不均而引起爆裂。待培养基完全熔化后，置一旁冷却至55-60℃。揭下瓶塞，右手持三角瓶于火焰旁边，瓶口要保持对着火焰，左手拿将皿盖打开，迅速倒入培养基，以液体刚好盖满平皿底部为宜（25ml左右的培养基制成的9cm平板厚度约4mm），合上皿盖后，置于水平桌面上略加转动，等待其凝固。简述培养基制备的完整步骤（按工作顺序）。

答案:天秤调节、称量、溶化、调pH、分装、加塞和标记，灭菌如果菌种污染了，可以采用怎样的方法纯化它？怎样知道你的纯化成功了？

答案:菌种在分离、保藏和生产过程中，极易遭致杂菌污染，因此必须对染有杂菌的菌种进行提纯，方能用于生产。根据污染的类型和程度，需采用不同的纯化措施。（1）排除细菌或酵母菌污染在菌种培养中，用肉眼仔细观察培养基表面，不难发现被细菌或酵母菌污染的分离物常出现黏稠状的菌落。取被纯化物接种在无冷凝水、硬度较高（琼脂用量2.3%～2.5%）的斜面上，再降低培养温度至15～20℃，利用某些大型真菌在较低的温度下，菌丝生长速度比细菌蔓延速度快的特点，用尖细的接种针切割菌丝的前端，转接到新的试管斜面培养基中培养，连续2～3次就能获得所要的纯菌丝。也可打破试管，挑取内部长有基内菌丝的琼脂块，移入无冷凝水的培养基上，该法适于被好气性细菌污染的母种。（2）排除霉菌污染霉菌和细菌不同，它和食用菌菌丝很相似，也有气生菌丝和基内菌丝。分离的方法主要是抑制杂菌生长，拉大食用菌菌丝生长和杂菌菌丝生长的范围差，从食用菌菌落前端切割，移植入新培养基。杂菌发现越早，分离的成功率越大。严格地说，在斜面培养基上的非接种部位发现的白色菌丝，应认为是杂菌菌落，应马上提纯。若有色孢子已出现，一方面易使分生孢子飘散，另一方面其基内菌丝早已蔓延，可能和食用菌菌丝混生一起。如霉菌刚出现孢子且尚未成熟、变色，则可采用前端菌丝切割法提纯。转管时先将菌丝接种在斜面尖端，当长满斜面后，及时将原接种点连同培养基一起挖掉；如霉菌菌落颜色已深，说明孢子已成熟，稍一振动孢子就会飘满培养基，若再行上法意义不大。如菌丝蔓延范围较大，可将0.2%升汞溶液或1%多菌灵处理过的湿滤纸块覆盖在霉菌的菌落上，可抑制霉菌生长，防止孢子扩散，后用灭菌接种铲将表层铲掉，随之用接种针钩取基内菌丝移入新的培养基，如此2～3次。（3）限制培养取直径7～10毫米、高4～6毫米的玻璃环或不锈钢环，经酒精灯火焰灼烧后趁热放到斜面培养基中央，将环的一半嵌入培养基内，然后将染有细菌的接种块放入环内进行培养。细菌生长会被限制在环内，而食用菌菌丝则可越过环而长到环外的培养基上，转管后即可得到纯化。（4）覆盖培养在污染了细菌的食用菌菌丝斜面上倾注一层厚约2毫米的培养基，培养一段时间，当食用菌菌丝透过培养基形成新的菌落时，即可切割转管。最好进行二次覆盖。（5）基质菌丝纯化培养对棉塞长有霉菌的试管斜面，可将试管打碎，取出培养基，用0.1%升汞浸泡2分钟，用无菌水淋洗，再用无菌滤纸吸干。取一段2厘米的培养基从中部切开，在断面上用无菌刀片切成米粒大小的块，移入新的斜面上进行培养。（6）药物处理菌种提纯时，可向培养基中注入选择性强的抗菌制剂，如加入5～10毫克/升的多菌灵（MBC）、涕必灵（TBZ）或托布津等，可有效地防止菌霉混生；在每毫升培养基中加入30～40毫克链霉素、20～30毫克四环素、金霉素，或50毫克高锰酸钾，可以有效地防止细菌混生；加入灰黄霉素（20单位/毫升），可抑制真菌生长。（7）破碎菌丝从试管中取出已污染的培养基，放在0.1%升汞水中处理2分钟，用无菌水冲洗，无菌纸吸干，再放入有玻璃珠的无菌水内，经组织破碎，稀释后注入平板培养，取其单个菌落纯化培养。为什么微生物在液体振荡条件下比平板培养基生长快？

答案:液体培养基营养成分多，传质效率高。接种环(针)接种前后灼烧的目的是什么?为什么在接种前一定要将其冷却?如何判断接种环火焰灼烧后已冷却可用于接种?

答案:接种前灼烧的目的是为了彻底的杀灭环上得细菌、芽孢等，可能引起污染的一切生物体。接种后再灼烧是防止菌种飘出,污染接种室或者超净台,影响整体接种环境,也是降低污染率的一种措施。接种的时候一定要冷却，因为不冷却的话，你接的目标菌可能就直接杀死了（被热的环烫死），如何判断已经冷却了：一般是用接种环在玻璃平皿上划线，培养基不融化为冷却好，一般为1~3min。平板培养微生物为什么要倒置？

答案:主要原因：皿盖向上培养时，培养基蒸发的水分会凝结在皿盖上，并可能掉落到培养基表面，影响培养结果。而培养皿倒置，水分蒸发会在培养基表面均匀凝结，并且蒸发与凝结会形成平衡，不会影响培养结果。其次是倒置不会在拿起时只拿起皿盖。而正置时拿培养皿，可以只把皿盖拿起来，让培养基暴露在空气中。高压蒸汽灭菌后，取出试管培养基摆制斜面，待凝固后，则可以使用。

答案:错高压蒸汽灭菌时一般要求120℃灭菌20min，这里的计时是从盖上灭菌锅的盖子开始计时20min。

答案:错在配制培养基过程中，调节pH时，如果调过头，就可以用另一种溶解调回来就可以。

答案:错琼脂在培养基制备过程中主要起到凝固的作用，也是制备固体培养基必须要的原料之一。

答案:对一般固体培养基培养微生物的速度大于液体培养基的生长速度，因为，固体培养基不流动，有利于微生物的生长。

答案:错液体培养转接液体培养中，转接菌群可以用接种环挑取一些加入待接种的培养液来完成。（）

答案:错连续划线培养中的划线是随意在培养皿上轻轻划线就可。（）

答案:错固体培养皿在接种时打开皿盖的方向是向左的。（）

答案:错金属接种环需要用前、用后都火焰灼烧灭菌，可多次使用。

答案:对一次性塑料无菌接种环科直接使用，仅能使用一次。

答案:对在接种操作时，一般是左手持接种环，右手持培养平皿或者其他被接种的器皿。

答案:错分区划线只挑取一次微生物（

）

答案:对干热灭菌法是指在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌的技术。一般有（

）和（

）。

答案:火焰灭菌法;干热空气灭菌法待灭菌后的试管培养基冷至（

）左右(以防斜面上冷凝水太多)，将试管口端搁在玻棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的（

）为宜。

答案:60℃;一半利用分装器将配制好的培养基分装入试管内。以其高度的（

）左右为宜。以量筒或烧杯向锥形瓶分装培养基，以其高度的（

）左右为宜。

答案:1/4;1/4--1/3在配制培养基时，在未调pH前，先测量培养基的原始pH，如果偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入（

），边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH，直至pH达本实验所需；反之，用（

）进行调节。

答案:1mol/LNaOH;1mol/LHCl琼脂的特点是（

）℃融化，（）℃凝固，一般加入的量是液体培养基的（）。

答案:95;40;1%-2%培养基的成分包括（

）、（

）、（

）、（

）、（

）、（

）。

答案:水分;碳源;氮源;能源;无机盐;生长因素液体培养基一般使用（

）培养。一般细菌需要的振荡速度为（

）r/min，放线菌需要的振荡速度为（

）r/min。

答案:摇床振荡;200-300;130-180各种微生物培养条件如下：放线菌在（

）℃培养（

）天；霉菌在（

）℃培养（

）天；酵母菌在（

）℃培养（

）天；细菌在（

）℃培养（

）即可。

答案:25-28;5-7;25-28;3-5;28-30;1-2;37;过夜从平板向斜面接种培养中，锯齿形划线培养适应于（

），直线形划线培养适应于（

）。（与视屏资料相同描述）

答案:用于微生物菌种繁殖保存;用于微生物生长形态观察划线插片培养中盖玻片的插入角度是（

），（

）划线方向，每个9cm培养皿中载玻片数量是（

）片。

答案:45°;垂直;5-10平板划线一般使用（）和（）两种划线方法。

答案:连续划线;分区划线/star3/origin/38ed22f9d39f6283c687571585ff7116.png

答案:提供碳源、氮源、生长因子;琼脂(或凝固剂;所培养微生物对各营养成分的需要量;调pH;高压蒸汽灭菌、灼烧接种环、酒精棉球擦手、棉塞塞试管口、在火焰旁接种;扩大接种面积培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞住，以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染，并保证有良好的通气性能。可作为塞子的是（

）

答案:硅胶塞;

双层铝箔纸;8层纱布或棉塞等，外面需要包防潮纸牛肉膏或者酵母粉能为微生物培养提供（

）

答案:碳源;能源;维生素;磷酸盐荧光显微镜保护眼睛不被紫外线损伤的装置是（）

答案:B.紫外线防护板在干热状态下，由于热穿透力较差，微生物的耐热性较强，必须长时间受高温的作用才能达到灭菌的目的。因此，干热空气灭菌法采用的温度一般比湿热灭菌法高。为了保证灭菌效果，选用了180-200ºC灭菌，灭菌时间为（

）。

答案:1-2h下列哪种材料不适于火焰灭菌法。（

）

答案:培养基LB培养基的配制中,琼脂可以在什么时候加入?

答案:营养成分溶解后,调节pH,按照分装的量称取相应琼脂粉，加入琼脂后煮沸后分装超净工作台正确使用的步骤是（）

答案:开紫外灯30min，然后关紫外灯，开照明灯，开风机，拉起挡风板至适当高度3-5min，才可开始使用。接种前无菌操作的准备步