JJF(鲁) 165-2023 快速核酸检测仪温度、时间参数校准规范

山东省地方计量技术规范CalibrationSpecificationforTemperatureandTime山东省市场监督管理局发布JJF（鲁）165—2023快速核酸检测仪温度、快速核酸检测仪温度、时间参数校准规范TimeParametersofRapidNucleicAcidDetectorJJF（鲁）165—2023JJF（鲁）165—2023 （II） （2） （2） （2） （2） （2） （2） （2） （3） （3） （3） （3） （3） （4） （4） （6） JJF（鲁）165—2023JJF（鲁）165—2023快速核酸检测仪温度、时间参数校准规范本规范适用于基于实时荧光聚合酶链反应(PCR)技术或者等温扩增技术的快速核酸检测仪的温度、时间参数的校准，其他类似设备JJF（鲁）138-2022实时荧3.1实时荧光聚合酶链反应(PCR)技术realtimefluorescentpolymerasechainreaction个基本反应步骤构成，扩增的过程中荧光染料能3.2等温扩增技术isothermalamplificati在恒定的温度下，反应过程通过添加不同活性3.3温度偏差temperat低温度与设定温度的上下偏差。温度偏差包含温度JJF（鲁）165—202323.4平均升温速率mean快速核酸检测仪在多个循环升温过程中，被测升温阶快速核酸检测仪在多个循环降温过程中，被测降温阶3.6平均温度过冲量meantemperat快速核酸检测仪从基础升温至设定温度过程中，实3.7温度波动度temperatur3.8温度持续时间相对偏差Relativeerroroftemperatureduration快速核酸检测仪通常是指基于实时荧光PCR技术或者等温扩增技术的便携式核酸检快速核酸检测仪主要由样品载台、热循环部件、光表1快速核酸检测仪温度、时间参数的技术要求校准项目技术要求基于实时荧光PCR技术基于等温扩增技术温度偏差温度波动度——±0.5℃平均升温速率≥1.5℃/s参考厂家技术要求平均降温速率≥1.5℃/s——平均温度过冲量≤1℃温度持续时间相对偏差±10%注：上述计量特性指标仅供参考，不判断合格与否。JJF（鲁）165—20233温度：10.0℃~40.0℃;相对湿度：不大于85%。），温度传感器、数据采集分析模块组成，应与表2测量标准技术指标标准原理技术要求基于实时荧光PCR技术测量标准器基于等温扩增技术测量标准器温度参数测量标准测温范围0~120）℃分辨力：不低于0.01℃最大允许误差：±0.10℃采样间隔不大于0.1s测温范围0~120）℃分辨力：不低于0.01℃最大允许误差：±0.10℃采样间隔不大于10s时间参数测量标准采用温度记录器的记录时间作为快速核酸检测仪时间测量标准分辨力：不低于0.1s最大允许误差：±1s/h以下要求:7.1.1快速核酸检测仪的外形结构应完好，标识清晰，应标明设备的名称、型号、制造7.1.2快速核酸检测仪装载附件表面不得有凹陷和毛刺等缺陷。快速核酸检测仪的可用JJF（鲁）165—20234表3快速核酸检测仪校准项目设备类型校准项目基于实时荧光PCR技术基于等温扩增技术温度偏差++温度波动度-+平均升温速率++平均降温速率+-平均温度过冲量++温度持续时间准确性++注：+表示校准项目，-表示非校准项目将快速核酸检测仪测量标准放置于快速核酸检测酸检测仪作为一个整体进行校准，以16通道快速核酸检测仪为例，测量点分布遵循均匀分布的原则，可参照图2所示，每增加8通道可增加2个测5JJF（鲁）165—2023温扩增技术的快速核酸检测仪控温程序设置可参考表4和表5。也可根据用户要求设置控温程序。基于实时荧光PCR技术快速核酸检测仪校准装置设置采样间隔为100表4基于实时荧光PCR技术快速核酸检测仪控温程序步骤设定温度点设定温度持续时间循环次数150℃30s1290℃30s1340℃30s6495℃30s570℃30s1660℃30s1740℃30s1表5基于等温扩增技术快速核酸检测仪控温程序设定温区设定温度点设定温度持续时间上温区95℃中温区67℃下温区58℃JJF（鲁）165—20236基于实时荧光PCR技术快速核酸检测仪温度达到设定温度10s后开始读取测量值，读取10s，均匀读取20组数据；基于等温扩增技术快速核酸检测仪温度达到设定温度2minΔtmax=tmax-ts（1）Δtmin=tmin-ts（2）基于等温扩增技术快速核酸检测仪温度达到设定温度2min后开始读取测量值，读取取全部测量点中变化量的最大值作为温度波动度的校准结Δtf=±max[(tjmax-tjmin)/2]（3）Δtf——温度波动度，℃;），（50±0.5）℃瞬时升温至（90±0.5）℃瞬时的温度JJF（鲁）165—2023计算按照公式（45）计算： VVV τhi——从tai到达tbi的时间，s。m——测量点数量。升温至最接近90℃瞬时的温度曲线计算升温速率（如下图4所示平均升温速率的JJF（鲁）165—2023 Vtai——最接近50℃温度点第i个测量点测量值，℃;t——最接近90℃温度点第i个测量点测量值，℃;biτhi——从tai到达tbi的时间，s。m——测量点数量。89 Vd——平均降温速率， Vd——平均降温速率，℃/s；Vdj——第j个测量点降温速率，℃/s；Vτdi——从tbi到达tai的时间，s。m——测量点数量。 ts——设定温度值，95℃;JJF（鲁）165—2023tjmax——第j个测量点6次测得的最大过冲温度值，℃;m——测量点数量。 ts——设定温度值，95℃;tjmax——第j个测量点测得的最大过冲温度值，℃;m——测量点数量。Δτ——温度持续时间相对误差，%；τc——实测温度持续时间，s；τs——设定温度持续时间，s。校准结果应在校准证书（报告）上反映，校准证书（报）；），JJF（鲁）165—2023h)如果与校准结果的有效性和应用有关时，应对被校样品的抽样程序进j)本次校准所用测量标准的溯源性及有效性说明；n)校准证书和校准报告签发人的签名、职务或等p)未经实验室书面批准，不得部分复制证书或报告的声换重要器件等的一般需要重新校准。由于复者、仪器本身质量等诸多因素所决定的，因JJF（鲁）165—2023将快速核酸检测仪及快速核酸检测仪校准装置各装置置于仪器反应模块中，并确保与反应模块接Δtmax=tmax-ts（A.1）根据上述数学模型以及测量方法，其不确定度来源（1）测量重复性引入的标准不确定度分量u1；（2）快速核酸检测仪校准装置分辨力引入的标准不确定度分量u1；（3）快速核酸检测仪校准装置准确度引入的标准不确定度分量u2；A.4各输入量的标准不确定度分A.4.1重复性测量引入的不确定度分量u1表A.1温度测量结果次数测量点不同测量点温度传感器测量结果(℃)12345678994.9894.9095.0095.0495.1394.9995.0295.0395.0994.9895.2595.3295.2895.2195.1295.2595.1395.2495.2394.9694.8595.0195.1295.1494.9394.9594.9894.9494.99JJF（鲁）165—2023m——测量点的数量；n——每个测量点测量次数；ykj——第j个测量点第k次的测量值，℃; yj——第j个测量点测量值的平均值，℃;sp=0.07℃因此重复测量引入的不确定度分量u1为：u1=0.07℃A.4.2快速核酸检测仪校准装置分辨力引入的不确定度u1'者具有一定的相关性，因此在不确定度计算时不量u1'。A.4.3快速核酸检测仪校准装置准确度引入的标准不确定度分量u2；A.5合成标准不确定度ucA.6扩展不确定度U取k=2，则：U=k×uc=0.18℃JJF（鲁）165—2023证书编号：XXXXXX-XXXX基本信息委托单位名称：委托单位地址：制造厂商：仪器名称：规格型号：出厂编号：校准依据：环境温度：℃环境湿度：%RH校准员：核验员：标准器信息计量标准（器）名称计量标准器溯源单位及证书号有效期至测量范围准确度等级测量点次数A1(℃)A8(℃)B4(℃).......123......最大值最小值上偏差(℃)下偏差(℃)扩展不确定度℃5次平均升温速JJF（鲁）165—20235次平均升温速5次平均升温速5次平均降速率5次平均降速率5次平均降速率JJF（鲁）165—2023测量点A1A8B4.......过冲量(℃)平均温度过冲量(℃)平均升温速率(℃/s）50℃→90℃平均降温速率(℃/s）90℃→50℃三、温度持续时间相对误差设定温度持续时间(s)实测温度持续时间(s)相对误差(%)JJF（鲁）165—2023证书编号：XXXXXX-XXXX基本信息委托单位名称：委托单位地址：制造厂商：仪器名称：规格型号：出厂编号：校准依据：环境温度：℃环境湿度：%RH校准员：核验员：标准器信息计量标准（器）名称计量标准器溯源单位及证书号有效期至测量范围准确度等级测量点次数.......123.......最大值最小值上偏差(℃)