高考生物一轮复习讲义选修3第2讲细胞工程

第2讲细胞工程考纲要求全国卷五年考情1.植物的组织培养(Ⅱ)2013·卷ⅡT402.动物细胞培养与体细胞克隆(Ⅱ)2017·卷ⅢT38，2016·卷ⅡT403.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)2014·卷ⅠT40考点一|植物组织培养与植物体细胞杂交(对应学生用书第247页)[识记—基础梳理]1．细胞工程(1)操作水平：细胞水平或细胞器水平。(2)目的：按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品。(3)分类：植物细胞工程和动物细胞工程。2．植物组织培养技术(1)概念理解①培养对象：离体的植物组织、器官、细胞或原生质体。②培养条件：无菌、人工配制的培养基、相关激素等人工控制条件。③培养结果：产生部分或完整植株。(2)操作流程eq\a\vs4\al(外植体)eq\o(→,\s\up8(（脱分化）))愈伤组织eq\o(→,\s\up8(（再分化）))根、芽或胚状体→试管苗(3)理论基础——细胞的全能性①概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞都具有发育成完整生物体的潜能。②物质基础：细胞中具有本物种全部遗传信息。3．植物体细胞杂交技术(1)概念：将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。(2)操作流程(3)流程分析①过程a为去除细胞壁获得具有活力的原生质体，用到的酶是纤维素酶和果胶酶。②过程b是原生质体的融合，其原理是细胞膜的流动性。③诱导b融合的两种方法：物理法包括离心、振动、电激等；化学法一般用聚乙二醇作为诱导剂。④过程c是原生质体融合后再生出细胞壁。⑤过程d是植物组织培养技术，其原理是细胞的全能性。(4)意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍、获得杂种植株。4．植物细胞工程的实际应用(1)eq\a\vs4\al(植物繁殖,的新途径)eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(微型繁殖,作物脱毒（常利用茎尖等分生组织）,人工种子（胚状体等外包裹人工薄膜得到的种子）))(2)作物新品种的培育eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(单倍体育种,突变体的利用))(3)细胞产物的工厂化生产(如人参皂甙干粉的生产)。[理解—深化探究]1．细胞全能性(1)原理：细胞内含有本物种全部的遗传信息。(2)体内细胞全能性不表达的原因：基因在特定的时间和空间条件下选择性表达。(3)细胞全能性表达的条件：具完整细胞结构，离体，无菌，一定的营养、激素和其他适宜的外界条件。(4)细胞全能性大小与细胞分化程度成反比。2．植物组织培养与植物体细胞杂交比较名称植物组织培养植物体细胞杂交原理细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性和细胞的全能性过程离体的植物器官、组织或细胞↓脱分化愈伤组织↓再分化根、芽或胚状体↓发育植物体选材选取根尖、茎尖、形成层部位最容易诱导脱分化不同的植物细胞技术操作脱分化、再分化等除脱分化、再分化外，还要用酶解法去除细胞壁，用一定的方法诱导细胞融合关系植物组织培养是植物体细胞杂交的基础，植物体细胞杂交所用的技术更复杂3.脱分化和再分化的比较比较内容脱分化再分化过程外植体→愈伤组织愈伤组织→幼苗形成体特点排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞有根、芽需要条件(1)离体(2)适宜的营养(3)生长素/细胞分裂素的比例适中(4)不需光(1)离体(2)适宜的营养(3)生长素/细胞分裂素的比例高或低诱导生根或生芽(4)光照[运用—考向对练]1．(2018·湖北武汉调研)应用植物组织培养技术，不仅可实现种苗的快速繁殖、培育无病毒植株，也可加快作物及苗木育种。下面是培育柑橘耐盐植株的实验流程：茎段→eq\a\vs4\al(愈伤,组织)eq\o(→,\s\up8(处理1：先用γ射线照射),\s\do10(处理2：后在培养基中加入物质X))eq\a\vs4\al(挑选生长的,愈伤组织)→耐盐植株回答下列问题：(1)愈伤组织是由离体的茎段经________过程形成的，此时愈伤组织细胞________(填“具有”或“不具有”)细胞的全能性。(2)对愈伤组织进行了两次处理，处理1中γ射线照射的目的是________________，用γ射线不直接处理茎段而是处理愈伤组织，原因是________________；处理2中添加的物质X为________。(3)植物组织培养技术也被广泛应用于其他作物的育种中。在培育白菜—甘蓝、三倍体无子西瓜、农杆菌转化法获得的抗虫棉中，必须用到植物组织培养技术的是________________。[解析](1)离体的茎段经过脱分化过程可形成愈伤组织，此时愈伤组织具有未分化的特点，细胞依然具有较高的全能性。(2)图中对愈伤组织进行了两次处理，第一次处理是用γ射线照射诱发愈伤组织细胞发生基因突变。愈伤组织细胞分裂能力强，易受到培养条件和外界压力的影响而发生基因突变。第二次处理是抗盐接种实验，即在培养基中加入氯化钠，适应一定浓度盐的愈伤组织才可以生长，不适应的愈伤组织死亡。(3)作物育种研究中常用农杆菌转化法将含抗虫基因的Ti质粒导入到植物体细胞中，再利用植物组织培养技术获得抗虫的农作物。运用细胞工程培育白菜—甘蓝杂种植株，需要采用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株。[答案](1)脱分化具有(2)诱发基因突变愈伤组织细胞分裂能力强，易诱发基因突变NaCl(或盐)(3)白菜—甘蓝、抗虫棉2．(2018·陕西西安长安一中第一次检测)下图是植物体细胞杂交过程示意图，请据图回答：(1)植物体细胞杂交的第①步是去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体。目前此步骤最常用的方法是酶解法，也就是在温和的条件下用________________等分解植物的细胞壁。(2)②过程的发生，必须进行人工诱导。人工诱导原生质体融合常用的化学方法是用________试剂作为诱导剂诱导融合。动物细胞融合还常用到________作为诱导剂。(3)与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为________。(4)④过程称为________，⑤过程称为________。若利用此技术生产治疗癌症的药物——紫杉醇，培养将进行到________(填字母编号)即可。(5)植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值，其突出的优点是可以______________________________________________________________。[解析](1)植物体细胞杂交的第①步是用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体。(2)人工诱导原生质体融合常用的化学方法是用聚乙二醇试剂作为诱导剂诱导融合。动物细胞融合还常用到灭活的病毒作为诱导剂。(3)过程③是杂种细胞生出细胞壁，高尔基体与植物细胞壁形成有关。(4)④⑤过程分别为脱分化和再分化，治疗癌症的药物——紫杉醇是从紫杉细胞中提取的，只需将植物组织培养进行到愈伤组织阶段即可。(5)植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值，其突出的优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍，大大扩展可用于杂交的亲本组合范围。[答案](1)纤维素酶、果胶酶(2)聚乙二醇灭活的病毒(3)高尔基体(4)脱分化再分化e(5)克服远缘杂交不亲和的障碍[误区警示]对植物体细胞杂交和有性杂交辨析不清1．植物体细胞杂交：若两个不同品种的植物细胞A、B进行融合，A含有2X条染色体，2个染色体组，基因型为Aabb，B含有2Y条染色体，2个染色体组，其基因型为ccDd，则新植株应为四倍体，其体细胞中染色体数为2X＋2Y，基因型为AabbccDd，从中不难看出，体细胞杂交即两个细胞融合成一个细胞，不管是染色体数、基因型还是染色体组都采用直接相加的方法。2．植物有性杂交：有性杂交的子代细胞中染色体数、基因型分别为“X＋Y”、“AbcD”或“abcD”或“Abcd”或“abcd”，即先减半再相加。考点二|动物细胞与组织培养和核移植技术(对应学生用书第249页)[识记—基础梳理]1．动物细胞与组织培养(1)过程(2)动物细胞培养与动物组织培养的主要区别：动物细胞培养过程需用胰蛋白酶等处理组织块，以使细胞离散，而动物组织培养过程中不需要使用胰蛋白酶等。(3)培养条件①环境条件：无菌、温度适宜和营养充足、pH适宜等。②培养基种类a．天然培养基：主要取自动物血清、动物组织提取液和鸡胚汁等，其特点是营养价值高、成分复杂。b．合成培养基：人工配制的，其成分明确，便于控制实验条件，使用时需加入动物血清。(4)培养类型①原代培养：从供体获取组织或细胞后的初次培养。②传代培养：将原代培养的细胞分离稀释后转入新的培养瓶中继续培养，培养代数一般在10～50代左右。2．动物细胞核移植技术和体细胞克隆(1)动物体细胞核移植技术的过程eq\o(→,\s\up8(细胞),\s\do10(融合))重组细胞eq\o(→,\s\up8(发育))胚胎eq\o(→,\s\up8(（胚胎移植）))代孕母体→生出与细胞核供体遗传性状基本相同的个体(2)原理：动物体细胞核具有全能性。(3)应用①生产医用蛋白。②作为异种移植的供体。③了解胚胎发育及人体衰老的过程④追踪和研究疾病的发展过程以便更有效地治疗疾病。3．体细胞克隆(1)克隆不仅仅是指无性繁殖，还包括遗传上完全相同的分子、细胞或来自同一祖先的生物个体的无性繁殖群体。(2)体细胞克隆是指用体细胞核移植技术进行的克隆。(3)克隆技术意义：在克服动物种间杂交繁殖障碍、创造新物种方面具有重要的科学意义和潜在的经济价值。(4)应用①加速家畜遗传改良进程，促进优良育群的繁育。②保护濒危物种。[理解—深化探究]1．动物细胞核移植的疑难解析(1)卵母细胞选择时期及原因：MⅡ中期的卵母细胞，此时具备受精能力，细胞质中合成与分裂、分化有关的物质能刺激融合后重组细胞进行分裂分化，形成重组胚胎。(2)选卵细胞作为受体细胞的原因①卵细胞大，易于操作。②卵黄多，营养丰富，为发育提供充足的营养。③能激发重组细胞分裂分化。(3)供体细胞：取供体动物的体细胞培养，一般选用传代10代以内的细胞，因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传基础。(4)动物体细胞不能经培养直接发育成完整个体的原因：动物体细胞的全能性受到限制。(5)该过程用到的技术手段：动物细胞培养、动物细胞融合、早期胚胎培养和胚胎移植。2．动物细胞培养与动物体细胞核移植的比较动物细胞培养动物体细胞核移植原理细胞增殖动物细胞核的全能性过程结果获得细胞群获得克隆动物应用①生产生物制品②用于基因工程③检测有毒物质①加速家畜遗传改良进程，促进良种繁殖②保护濒危物种③生产医用蛋白④提供克隆器官、组织等3.治疗性克隆和生殖性克隆的比较治疗性克隆生殖性克隆区别目的从胚胎中取出干细胞用于医学研究和治疗用于生育，获得人的复制品水平细胞水平个体水平联系都属无性生殖；产生新个体或新组织，遗传信息相同[运用—考向对练](2015·安徽高考)科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如下图。(1)由过程①获得的A为____________________。(2)在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是________________________。受体应选用________期卵母细胞。(3)进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生____________，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。(4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为________________________________________________________________________________________________________________。[解析](1)分析图示可知，过程①构建的A为含目的基因的表达载体。(2)核移植以前，必须去掉受体卵母细胞的核，目的是保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞。受体应该选用处于减数第二次分裂中期的卵母细胞。(3)在进行胚胎移植时，受体即代孕母羊对移入子宫的外来胚胎基本上不会发生免疫排斥反应。(4)转基因体细胞克隆产生的重组细胞具有全能性，培养产生的含目的基因的成纤维细胞可进行传代培养，因此理论上可获得无限个转基因绵羊。[答案](1)含目的基因的表达载体(2)保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞MⅡ(3)免疫排斥反应(4)整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养[误区警示]动物细胞核移植技术中的3个易错点1．动物细胞核移植技术，体现了细胞核的全能性而非动物细胞的全能性。2．克隆属于无性繁殖，产生新个体的性别、绝大多数性状与供核亲本一致。3．核移植技术获得的动物与供核动物性状不完全相同的原因：(1)克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但其线粒体中的DNA来自去核卵(母)细胞。(2)性状受基因与环境共同影响。(3)在个体发育过程中有可能发生基因突变，产生供核动物没有的性状。考点三|动物细胞融合与单克隆抗体(对应学生用书第251页)[识记—基础梳理]1．动物细胞融合(1)概念：在一定条件下将两个或多个细胞融合为一个细胞的过程。(2)原理：细胞膜的流动性。(3)融合方法：聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。(4)意义：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能，也为制造单克隆抗体开辟了新途径，也是研究细胞间遗传信息的转移、染色体上的基因定位等有效途径。2．单克隆抗体(1)制备过程(2)优点：特异性强、灵敏度高，可大量制备。[理解—深化探究]1．动物细胞融合(1)概念：两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。(2)过程：细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合，其中细胞膜的融合是细胞融合的先导，在细胞膜融合中体现出细胞膜具有一定的流动性。如图所示：2．单克隆抗体的制备(如图)(1)原理：一个(或一种)浆细胞(效应B细胞、B淋巴细胞)只产生一种抗体，小鼠骨髓瘤细胞能够无限增殖。因此杂交瘤细胞就具备了既能无限增殖，又能大量产生单一抗体的特征。(2)取相应B淋巴细胞前必须先注射相应抗原，否则不能获得单克隆抗体。(3)制备单克隆抗体过程中的两次筛选项目第一次筛选第二次筛选筛选原因诱导融合后得到多种杂交细胞，另外还有未融合的细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞筛选方法用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)才能生长用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群[运用—考向对练](2018·宁夏平罗中学第一次月考)类风湿性关节炎(RA)是一种自身免疫病，致残性强。研究表明，该病的病理与肿瘤坏死因子­α(TNF­α)密切相关，而一种人鼠嵌合的抗TNA­α单克隆抗体能有效治疗RA。维持培养液如图为该单克隆抗体制备过程示意图。(1)单克隆抗体的制备涉及细胞工程中的__________、________技术。(2)图中的抗原A是________，HAT培养基的作用是__________________。将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞具有的特点是____________。(3)医疗上，把单克隆抗体与化学药物或细胞毒素相结合制成“________”，借助抗体的定向作用将药物带到病变细胞并将其杀死。(4)克隆动物是指用________方法得到的动物。(5)单克隆抗体的特点是________、________、________。[解析](1)单克隆抗体制备涉及动物细胞培养和动物细胞融合技术。(2)图中刺激免疫动物产生抗TNF­α单克隆抗体的抗原是肿瘤坏死因子­α(TNF­α)。HAT培养基的作用是筛选出杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体。(3)医疗上，把单克隆抗体与化学药物或细胞毒素相结合制成“生物导弹”，借助抗体的定向作用将药物带到病变细胞并将其杀死。(4)克隆动物是指用核移植方法得到的动物。(5)单克隆抗体的特点是：特异性强、灵敏度高，并可能大量制备。[答案](1)动物细胞融合(或杂交瘤)动物细胞培养(2)肿瘤坏死因子­α(或TNF­α)筛选出杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生特异性抗体(3)生物导弹(4)(动物体细胞)核移植(5)特异性强灵敏度高并可能大量制备[规律总结]关于单克隆抗体制备的三个方面1．杂交瘤细胞的特点：既能迅速大量繁殖，又能产生专一抗体。2．进行动物细胞的诱导融合，形成的杂种细胞有三种：AA型、BB型、AB型。只有AB型才是我们所需要的杂种细胞，所以需要用选择性培养基进行筛选。3．获取单克隆抗体的场所(1)若在培养基中进行杂交瘤细胞培养，则从培养液中提取。(2)若在小鼠或其他动物腹腔中培养，则从腹水中提取。真题验收|感悟高考淬炼考能(对应学生用书第252页)1．(2017·全国卷Ⅲ)编码蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五个片段组成，编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成，如图1所示。图2回答下列问题：(1)现要通过基因工程的方法获得蛋白乙，若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA)，则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙，原因是____________________________________________________________________________________________。(2)某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中，在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等，还加入了序列甲作为________，加入了________作为合成DNA的原料。(3)现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白，要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用，某同学做了如下实验：将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组，其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一组作为对照，培养并定期检测T淋巴细胞浓度，结果如图2。①由图2可知：当细胞浓度达到a时，添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加，此时若要使T淋巴细胞继续增殖，可采用的方法是________________。细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的CO2浓度，CO2的作用是________________。②仅根据图1、图2可知，上述甲、乙、丙三种蛋白中，若缺少________(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段，则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。[解析](1)若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA)，则基因表达载体中编码乙的DNA序列起始端无ATG，无论以DNA的哪条链为模板，转录出的mRNA都无起始密码子AUG，使所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙。(2)在PCR技术中，除了引物和耐高温的DNA聚合酶外，还需要序列甲(DNA片段)作为模板，dNTP(脱氧核糖核苷三磷酸)作为原料。(3)①当细胞浓度达到a时，添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加，可能是由于发生了接触抑制，可用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞，制成细胞悬液分瓶继续传代培养。动物细胞培养中，CO2的作用是维持培养液的pH。②对照分析图1和图2可知，能刺激T淋巴细胞增殖的甲和乙中都含有C片段，而对T淋巴细胞增殖促进作用很弱的丙中没有C片段，据此可知，若缺少C片段所编码的肽段，则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。[答案](1)编码乙的DNA序列起始端无ATG，转录出的mRNA无起始密码子(2)模板dNTP(3)①进行细胞传代培养维持培养液的pH②C2．(2016·全国卷Ⅱ)下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。【导学号：41780171】回答下列问题：(1)图中A表示正常细胞核，染色体数为2n，则其性染色体的组成可为________。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用________的方法。②代表的过程是________。(2)经过多次传代后，供体细胞中________的稳定性会降低。因此，选材时必须关注传代次数。(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是_______________________________________________________________________________________________________________________。(4)与克隆羊“多莉(利)”培育成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了____________________________________________________________________________________________________________________________。[解析](1)哺乳动物的正常细胞核中性染色体的组成为XX(雌性)或XY(雄性)。卵母细胞在培养至减数第二次分裂的中期时，常采用显微操作法去除细胞核。②过程是将早期胚胎移植到代孕个体的子宫中，即代表的是胚胎移植。(2)一般来说，动物细胞在传代培养到10～50代时，部分细胞的细胞核型可能会发生变化，即遗传物质的稳定性会降低。因此，选材时一般选10代以内的细胞，以保证细胞正常的二倍体核型。(3)获得的克隆动物性状与供体动物基本相同，但不完全相同，从遗传物质的角度分析，性状不完全相同的原因是：克隆动物细胞质中的遗传物质来自去核卵母细胞的细胞质，细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响。(4)高度分化的动物体细胞的全能性受到限制，但其细胞核的全能性在卵母细胞细胞质中的物质的作用下仍能得以表达。故克隆羊“多莉(利)”以及其他克隆动物的培育成功，证明了高度分化的动物体细胞的细胞核仍具有全能性。[答案](1)XX或XY显微操作胚胎移植(2)遗传物质(3)卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响(4)动物已分化体细胞的细胞核具有全能性3．(2014·全国卷Ⅰ)某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，结果如下图所示。若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条)，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题：(1)制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过________次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是________小鼠，理由是________________________________________________________。(2)细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有________，体系中出现多种类型细胞的原因是___________________。(3)杂交瘤细胞中有________个细胞核，染色体数目最多是________条。(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是______________________________________________________________。[解析](1)据图分析可知，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗体效价几乎都达到16000以上，小鼠Y的血清抗体的效价最高，最适合用于制备单克隆抗体。(2)融合体系中除了未融合的细胞和杂交瘤细胞之外，还有骨髓瘤细胞的自身融合细胞和B淋巴细胞的自身融合细胞。细胞的融合是随机的，并且不可能所有细胞都融合，故体系中会出现多种类型的细胞。(3)动物细胞融合后形成的是具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。杂交瘤细胞的细胞核中的染色体数目为40＋60＝100条。(4)正常细胞的分裂次数是有限的，且经过免疫的B淋巴细胞高度分化，不能无限增殖，而是经多次传代培养后逐渐衰老死亡。[答案](1)4YY小鼠的血清抗体效价最高(2)B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到100%(3)1100(4)不能无限增殖4．(2013·全国卷Ⅱ)甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。回答下列问题：(1)为了培育该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用________酶和________酶去除细胞壁，获得具有活力的________，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成________组织，然后经过________形成