检验科B-利钠肽（BNP）测定标准操作规程标准操作规程

玉环县人民医院检验科文件编号：JYK-3-XZ-001版本/修订号：C/0主题内容2012新增作业指导书生效日期：20120301第2页共3页编写制定日期审核审核日期：核准执行日期李永臣2012-03-01李永臣2012-03-01章林华2012-03-01B-利钠肽（BNP）测定标准操作规程1、检验申请临床医生需认真填写检验申请单。2、标本采集与处理2.1受检者准备：无特殊要求。2.2容器准备：洁净干燥塑料试管，勿用玻璃试管。2.3标本采集：常规静脉采血2ml。2.4抗凝剂选择：必须使用EDTA抗凝。2.5标本的标记：送检单和标本试管上在整个过程中应有统一且唯一的标识符。若为条形码，号码上必须同时包含患者姓名、检验目的、标本类型、标本采集时间等信息。2.6标本保存条件2.6.1全血或血浆标本在2~8℃可稳定24h；在-20℃以下保存3个月。冰冻标本仅最多可冻融三次。2.6.2全血或血浆标本在室温下4h内必须测定完毕，否则须分离血浆加盖在-20℃以下保存。冰冻标本测定前须轻轻颠倒混匀直至溶解，恢复至室温再离心。2.6.3已完成测定的标本至少保存7d。2.7.1当标本从原始容器中转移到新的容器时，新的容器要有与原容器一致的标识。2.7.2已完成测试的标本保持完整的识别号，置于2~8℃冰箱内保存7d。2.7.3如发生标本的遗失，原始标本管的破裂，应作完整的说明记录。2.8标本的运送/外送2.8.1标本的运送必须与检验申请单同时进行。已分离的血清或血浆标本加盖后按标本保存条件运送,交接双方核对后应有交接记录。3、标本拒收的标准3.1标本量不够以及不符合标本采集与处理（EDTA抗凝的塑料试管）的标本。3.2对于测定和吸样有干扰的标本：如近期使用鼠源性单克隆抗体和患者体内有大量的嗜异性抗体。3.3无法确认与申请单对应关系的标本。4、方法原理Architecti1000SRSTAT脑钠肽是采用化学发光微粒子免疫分析（ChemiluminesentMicroparticleImmunoAssay,CMIA）技术，两步法对待测样品中的脑钠肽进行定量检测。5、试剂及其他用品准备5.1试剂盒名称:BNP5.2试剂盒来源/产品号：美国雅培公司5.3试剂盒保存：在2~8℃冰箱保存下可稳定至有效期内，不可冰冻。在仪器试剂仓内可稳定336h。5.4试剂盒准备：液体试剂，开盖后即可使用。5.5试剂盒主要成分：R1a：磁性微粒子结合的单克隆抗BNP抗体R1b：0.1NNaOHR1c：包被AP酶的单克隆鼠抗BNP抗体5.6其他用品准备：RV杯、样品杯、1号液MUP底物、3号液MatrixCell洗涤液、4号液Line稀释液。6、校准品、质控品采用美国雅培公司提供的定标液和朗道质控品。7、适用仪器Architecti1000SR美国雅培公司。8、标本检测步骤装载试剂→进行校准→进行质控→输入患者标本检测项目→加载样品→患者标本测定→结果复核→报告9、分析参数反应类型：双抗体夹心法标本量144µL报告单位：pg/mL10、结果计算分析仪内部能自动对分析结果进行计算11、可报告范围和异常值处理(超出检测范围)根据临床需求确定是否稀释重测。当结果高于检测值，仪器推荐的稀释倍数为1∶5。12、操作性能12.1精密度:根椐NCCLS修改的EP5-A的要求，对三份不同BNP浓度的人血清用分别检测20d,每天2次（每次重复测定）,n=80:当浓度分别为95、440、1503时,总CV分别为9.4、7.5、8.1(%)；批内CV分别为6.3、4.5、4.3(%)。12.2等价性：通过与一个已经接受的临床方法的相关性研究进行等价性评估(NCCLS的EP59-A)。从AXSYM检测上得到人BNP的结果同参考方法的结果进行比较。分析中同时包括正常和异常浓度的人BNP样本，y=1.03x+23(r=0.956)。12.3特异性：标本中溶血、黄疸及高脂血基本不影响检测结果，一般也无明显干扰。12.4灵敏度：分析灵敏度为15pg/mL。12.5可报告范围:15~5000pg/mL。12.6方法的有限性及干扰因素：接受过鼠源性单抗体的患者由于体内产生人抗鼠抗体和患者体内有大量的嗜异性抗体，可以明显干扰免疫测定。13、室内质控规则与失控限13.1每星期或更换新瓶或新批号试剂时做室内质控。13.2根据每批号质控品的BNP的均值及失控线，作Levey-Jennings控制图。质控结果如超过失控线，查找原因纠正。14、当校准或质控结果达不到预设标准时的纠正措施14.1检查试剂：核对批号、有效期，有无受污染及变质的可能。14.2检查校准品：核对批号、有效期，校准品加样及位置是否正确。14.3检查质控品：核对批号、有效期，质控品加样及位置是否正确。14.4检查仪器（管路、光路等）是否正常，以进行适当的维护后再校准。14.5检查其他因素。15、当检验系统（仪器）不能正常工作时应采取的补救措施15.1立即报告室主任,及时联系维修工程师。15.2由另一台同类仪器替代使用。首先应做定标、质控，再进行标本的检测。15.3如果没有替代仪器，应根据仪器恢复（修复）工作的时间决定，通知发检验报告单窗口推迟取报告时间。待测标本分离血浆加盖置2~8℃下只保存24h，否则置于-20℃以下保存，等仪器维修复后再检测。16、参考值/参考范围及医学决定水平0-65岁<119pg/ml65-75岁<160pg/ml75-100岁<254pg/ml17、临床意义BNP是诊断左心室功能不全的良好指标，可用于无症状心衰（NYHAI级）的早期诊断；用于监控心衰、急性冠脉综合症和预后评价；用于评价左心室超负荷（如动脉高压和肥大性梗阻性心肌病）；可作为左心室射血分数的替代指标。18、结果审核以及与相关项目的联系测定结果必须经过认真审核来确认此检测结果是可靠的，审核通过应有审核者签名。在结果审核发出之前，核查患者的一般临床资料：如性别、年龄和诊断的疾病是否相符合，与其他心脏标志、心脏