检验科血清抗O测定标准操作规程

玉环县人民医院检验科文件编号：JYK-3-SH-038版本/修订号：C/0主题内容生化室作业指导书生效日期：20110701第1页共4页编写制定日期审核审核日期：核准执行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林华2011-07-01血清抗链球菌溶血素O（ASO）测定标准操作规程1检验申请单独检验项目申请：血清抗链球菌溶血素O(缩写ASO)；组合项目申请：血生化中项目组合。临床医生根据需要提出检验申请。2标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定24小时，普通冰箱中（2～8℃）稳定7天,-20℃可保存6个月.为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。2.3.2不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素或EDTA。3方法原理660nm样本中ASO+包被SLO的胶乳大分子免疫复合物在660nm监测生成的复合物的浊度变化，与样本中ASO效价成正比。4试剂及其他用品4.1试剂：血清抗链球菌溶血素O试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品。4.2试剂盒保存：保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。4.3试剂盒准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备。4.4试剂盒主要成分：组成R1：缓冲液200mmol/L（PH=8.6）叠氮钠0.09%R2：包被SLO的胶乳2.5mg/dL叠氮钠0.09%5校准品与校准模式5.1校准品：与试剂盒配套的ASO校准液。5.2校准类型和校准点数目：非线性模式，5个校准点。5.3校准周期：校准间隔时间14天。但在：①更换试剂或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后；均须进行一次校准。5.4校准液重建方法：仪器自动稀释成5个不同的浓度标准品。6质控品与室内质控规则6.1质控品采用由利德曼公司提供的免疫多项定值质控血清。6.2质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。6.3质控品测定：在每星期一或换试剂时加做质控一次。6.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。6.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。7适用仪器适用AEROSET和C16000全自动生化分析仪器全自动生化分析仪器。8标本检测步骤装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。9主要分析参数参见说明书。10结果计算计算标准液的吸光度的差值（A2－A1），建立标准液吸光度－浓度工作曲线。计算标本的吸光度差值，并在工作曲线上读取浓度值（mg/dL）。如标本的吸光度值大于标准液的最大值，则需稀释标本后，重新测量。11检验结果的报告及范围11.1结果的报告11.1.1结果经审核确认准确无误后发出报告。11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2报告范围：0-300IU/mL，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。12操作性能12.1精密度：批内CV<3.10%，批间CV<4.83%。12.2线性范围：0～300IU/mL。12.3回收率为90%-110％范围内.12.4方法的有限性及干扰因素：内源性干扰物溶血、脂血、黄疸对测试结果无明显影响.13参考范围及医学决定水平成人：0-180IU/mL，儿童0-250IU/mL14临床意义链球菌溶血素O（SLO）是链球菌的一种胞外产物，它能溶解细胞膜从而导致溶血。抗链球菌溶血素（ASO）是SLO的抗体。ASO测试能为早期的链球菌所导致的感染提供证据，主要应用于急性风湿热、链球菌感染后的血管球性肾炎、患有咽炎的个人以及其它急性感染。通常，与抗原对应的抗体在急性链球菌感染后三周左右达到峰值，并保持在峰值水平3-4个月，然后逐渐降低到正常水平。15结果审核以及分析与相关项目的联系15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3相关项目：审核如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。无威胁生命的“紧急值”及报告规定17有关引用程序与文件17.1Abbott自动生化分析仪仪器标准操作规程。17.2生