《职业卫生实验室质量控制样品研制规范 第5部分 生物样本类（征求意见稿）》编制说明

地方标准编制说明一、目的意义随着机构改革的推进和新版《中华人民共和国职业病防治人员考核、盲样考核、实验室比对等形式，对全省职业卫生技术服务机构实验室进行了现状调查，通过对结果数据进行统计分析，发现我省职业卫生技术服务机构实验室存在部分类别项目检测能力有待提升，部分实验室未严格按照《职业卫生技术服务机构检测工作规范》（下称“规范”）规定要求采取必要质量控制措施等问题。规范要求每批样品测定前及测定过程中均需要通过质量控制样品（QCM）的测定来判断是否符合质控要求，单个项目每批次样品测定需要QCM两个以上。规范明确QCM可通过外购或自制获得，省内暂无相关产品供应单位，国内主要供应商为国家疾控职业卫生所、国家卫健委职研中心、广东省职防院等三家单位，单价在130元左右，按照实验室年平均使用量800份估算，外购QCM需要10万元左右，成本较高。机构实验室又普遍存在自制能力不足情况，导致部分实验室在检测过程中QCM未能按规范足量使用，制约了实验室检测能力的提升，亟需制定相关标准对省内相关实验室自制QCM进行规范和指引，补足其QCM自制能力，促进QCM的使用，进而提升我省相关机构实验室检测质量、能力；新标准的执行也可促进我省培育出一批具备规范制备QCM能力的实验室，为尽快推动我省自有高水平QCM供应商的产生夯实技—2—术基础。标准附录部分通过示例详细描述了此类QCM材料准备、加料封装、均匀性评估、定值、稳定性评估、具体数据处理、信息文件书写等过程，一般此类实验室均具备研制基础条件，可操作性较强。申请单位江苏省疾病预防控制中心（江苏省公共卫生研究院）是江苏省卫生地方标准挂靠单位，国内率先成立江苏省地方卫生标准委员会。中心“十三五”期间承担国家评估能力和经验。单位每年用于标准制定的经费在100万元左右。第一起草人承担了近4年我省职业卫生技术服务机构实验室比对工作样品制备工作。经济效益：本标准的制订、实施可有力促进我省职业卫生技术服务机构实验室逐步具备QCM自制能力，按照单个职业卫生技术服务机构实验室每周需使用20份，年使用量800份估算，可为省内实验室节约外购QCM费用10万元左右，全省现有该类实验室100余家，预计可为省内相关企事业单位节约外购QCM费用1000万元。社会效益：QCM制备标准的制订实施可对省内相关实验室自制QCM进行规范和指引，补足其QCM自制能力，促进QCM的使用，进而提升我省相关机构实验室检测质量、能力；保证我省工作场所职业卫生监测质量，有力保障我省1500万接触职业病危害因素劳动者健康。新标准的执行也可促进我省培育出一批具备规范制备QCM能力的实验室，为尽快推动我省自有高水平QCM供应商的产生夯实—3—技术基础。二、任务来源《省市场监管局关于下达2023年度江苏省地方标准项目控制中心等单位申报的地方标准项目《职业卫生实验室质量控制样品研制规范》已通过江苏省市场监管局批准获得立项。三、编制过程按时间节点或工作进度简述编制过程。按时间节点或工作进度简述编制过程。2023年8月标准立项后，为广泛吸收各利益相关方参与标准制定工作，凝练形成广泛共识，充分保障标准质量，推动标准后续应用实施，牵头单位就标准参与起草单位及起草人进行了公开征集，并对部分申请单位进行了现场评估，根据申请、评估情况，遴选南京市疾病预防控制中心等12家单位参与起草。2024年3月召开研制《职业卫生实验室质量控制样品研制规范》系列地方标准工作会议，探讨研制方法，确定各子标准起草单位和起草人。标准第5部分：生物样本类主要起草单位有：江苏省疾病预防控制中心、无锡市疾病预防控制中心、苏州工业园区疾病防治中心、苏州市疾病预防控制中心、东南大学。2024年3-4月仪器、材料、人员准备，制备条件摸索。2024年5月-10月尿中镉质量控制样品（QCM）制备，样本定值、均匀性、稳定性、存储条件、运输稳定性等评估，—4—完成《职业卫生实验室质量控制样品研制规范》的第5部分标准文本编写、示例补充、编制说明编写、征求意见汇总等工作。四、主要内容本文件适用于职业卫生实验室研制质量控制样品（QCM）,对研制QCM的总体技术要求、研究步骤、制备过程、贮存/使用等内容进行了规范，基本用户是需要研制特定的QCM的实验室人员。本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草，分为以下5个部分：——第1部分：固体吸附剂管类；——第2部分：滤料类；——第3部分：吸收液类；——第4部分：粉尘类（游离二氧化硅测定——第5部分：生物样本类。五、技术指标确定的依据起草组通过实地调研北京、广东等国内质控样研制单位、查阅GB/T15000标准样品工作导则、CNAS-GL003-2018能力验证样品均匀性和稳定性评价指南、CNAS-GL005-2018实验室内部研制质量控制样品的指南等相关国家标准、指南，各子标准逐一开展试验论证，专家论证等确立主要技术指标。2024年3月，无锡市疾病预防控制中心成立了质控样品研制小组，进行了质控品制备材料采购收集工作，对研制人员进行了质控品制备物资准备验收、质控品制备、质控品定值、研制规范起草等相关环节的分工，收集比对单位的信息。2024年4月，进行分装小瓶的本底验收和冷冻干燥实验条件的摸索。1.考察了3种不同样品瓶本底，冻干过程中沸腾起泡效应，最终选择10mL西林瓶来储存质控品，验收结果见表1。验收方法:随机抽取10个小瓶，其中加入纯水5mL,加盖静置浸泡24小时，测定前于混匀仪上滚动混匀20min，按照目标化学物质规定/推荐测定方法程序进行验收，测定其中镉含量。冻干过程中观察沸腾起泡现象。表1分样小瓶验收结果不同类型的分装小瓶镉本底值ng沸腾起泡效应10毫升聚乙烯塑料瓶0.010强10毫升西林瓶<0.005弱10毫升玻璃瓶0.045弱2.摸索了合适的尿镉质控品的冷冻干燥条件，见表2。表2尿镉QCM真空干燥条件预冻：-40℃无真空主干燥：-40℃<10mbar-35℃6h<10mbar-25℃6h<10mbar-20℃6h<10mbar-10℃<10mbar-5℃<10mbar0℃<10mbar终末干燥：5℃<10mbar<10mbar<10mbar20℃<10mbar样号测定次数样号测定次数30℃2h<10mbar2024年5月，制备200瓶尿中镉质量控制样本，利用石墨炉原子吸收光谱仪和电感耦合等离子体质谱仪考察了尿镉质控品的均匀性，进行了初步定值，并对两种测定方法进行了比较。1.均匀性评估：从该批次尿中镉QCM中随机抽取10瓶用于均匀性检验。取尿镉QCM恢复至室温，加入5mL纯水，待溶解后充分混匀，静置20min。按照GBZ/T307.1-2018尿中镉的测定第1部分：石墨炉原子吸收光谱法以及GBZ/T307.2-2018尿中镉的测定第2部分：电感耦合等离子体质谱法进行测定，每个样品重复测定3次，测定结果见表3。样品的重复测定应按随机次序进行（可参考如下示例以降低测量飘移对均匀性评估的影响。采用单因素方差分析法对测定结果进行统计处理，样品间均值无显著性差异则表明样品是均匀的，单因素方差分析结果见表2。示例：10个样品，重复测量3次，适合的测量方案如下：第一次测量顺序：1、3、5、7、9、2、4、6、8、10第二次测量顺序：10、9、8、7、6、5、4、3、2、1第三次测量顺序：2、4、6、8、10、1、3、5、7、91.1按照GBZ/T307.1-2018尿中镉的测定第1部分：石墨炉原子吸收光谱法进行测定，结果详见表3、表4表3尿中镉均匀性测定结果(μg/L)石墨炉法123110.099.919.84210.289.9510.30样号样号测定次数310.2510.1010.3049.689.869.96510.369.549.96610.2210.0310.2879.769.8410.30810.3810.199.8699.849.6710.329.869.9910.41总平均值10.04标准偏差0.24表4单因素方差分析结果方差来源平方和均方F单元间重复测定90.4651.2510.0520.0630.825F临界值F0.05(9,20)=2.39。计算的F值为0.825，该值＜F临界值，表明在0.05显著性水平时，该批次尿中镉QCM是均匀定值：将均匀性评估研究中获得的10瓶尿中镉QCM的总平均值作为指示值，3倍标准偏差建立指示值的控制限，本批次尿中镉QCM的指示值及控制限为：10.04±0.72(μg/L）。1.2按照GBZ/T307.1-2018尿中镉的测定第2部分：电感耦合等离子体质谱法进行测定，结果详见表5、表6表5尿中镉均匀性测定结果(μg/L)ICP-MS法123123456789总平均值10.15标准偏差0.063表6单因素方差分析结果方差来源平方和均方F单元间重复测定90.0570.0560.0060.0032.26F临界值F0.05(9,20)=2.39。计算的F值为2.26，该值＜F临界值，表明在0.05显著性水平时，该批次尿中镉定值：将均匀性评估研究中获得的10瓶尿中镉QCM的总平均值作为指示值，3倍标准偏差建立指示值的控制限，本批次尿中镉QCM的指示值及控制限为：10.15±0.18(μg/L）。1.3对石墨炉原子吸收光谱法和电感耦合等离子体质谱法检测结果进行方差分析。F临界值F0.05(29,30)=1.85。计算的F值为0.87，该值＜F临界值，表明在0.05显著性水平时，制得的尿中镉QCM通过两种方法的检测结果具有可比性。2.进行稳定性评估2.1保存稳定性评估:-18℃条件下按照0、1个月、3个月、6个月、12个月存放时间（存放条件及时间点的选择可参考附录B各时间点取出6个样本恢复至室温，加入5mL纯水，待溶解后充分混匀，静置20min。按照GBZ/T307.1-2018尿中镉的测定第1部分：石墨—9—炉原子吸收光谱法以及GBZ/T307.2-2018尿中镉的测定或者第2部分：电感耦合等离子体质谱法进行测定，每个样品重复测定3次进行测定，测定结果见表3。各时间点检测结果与均匀性检验的总体均值运用t检验法进行统计分析，如无显著性差异，此时间点前该批次尿中镉QCM的稳定性符合要求。结果见表7表7尿中镉稳定性测定结果(μg/L)样号存放时间（月）0110.17210.20310.0410.19410.1359.50610.31平均值标准偏差t10.080.290.31按下式计算t值：式中：─n次测量的平均值；u─参考值(指示值)；n─测量次数；S─n次测量结果的标准偏差。注：为了保证平均值和标准偏差的准确度，n≥6。表7结果显示，室温条件下存放1个月、3个月、6个月、12个月后，各时间点测定6个样本计算所得t值均小于临界值t(0.05,5)=2.57，各时间点平均值与参考值之间无显著性差异，表明室温条件下该批次尿中镉QCM至少可稳定存放12个月。2.2复溶样本稳定性评估:取6份尿中镉QCM恢复至室温，加入5mL纯水复溶，待溶解后充分混匀，静置20min，于4℃冰箱保存，分别于第1天、307.1-2018尿中镉的测定第1部分：石墨炉原子吸收光谱法或GBZ/T307.2-2018尿中镉的测定第2部分：电感耦合等离子体质谱法进行测定，每个样品重复测定3次，测定结果见表8。表8复溶样本尿中镉稳定性测定结果(μg/L)样号存放时间（天）01712310.04456平均值标准偏差t按下式计算t值：式中：─n次测量的平均值；─参考值(指示值)；n─测量次数；S─n次测量结果的标准偏差。注：为了保证平均值和标准偏差的准确度，n≥6。表8结果显示，于4℃冰箱件下存放1天、7天、14天、30天后，各时间点测定6个样本计算所得t值均小于临界值t(0.05,5)=2.57，各时间点平均值与参考值之间无显著性差异，表明于4℃冰箱件下存放的复溶样本尿中镉QCM至少可稳定存放1个月。2.3运输稳定性评估：3.为该批次尿中镉的QCM逐一贴上带有编号、“尿中镉”等信息的标签，再将制备日期、贮存条件、有效期、预期的用途、指示值、使用的安全注意事项等信息以文件形式汇总，作为该批次QCM的信息文件。（4）将制备的尿镉质控品8瓶及SeronormTMTraceElementsurineL-2(LOT1403081)1瓶分发给苏州市疾控中心、苏州工业园区疾控中心、东南大学三家单位进行检测结果验证，样本平行测定3次。(寄送日期：2024.5.28)四家单位采用的检测仪器见表9表9四家单位使用仪器情况表////////////本方法经三家单位验证，结果详见表10。表10验证结果实验室测定方法试样浓度范SeronormTMTraceElementsurineL-2(LOT1403081)标准值3.9~测定结果RSD%范围无锡市疾病预防控制中心苏州工业园区疾病防治中心苏州市疾病预防控制中心东南大学公共卫生学院石墨炉原子吸收法ICP-MS法石墨炉原子吸收法石墨炉原子吸收法ICP-MS法9.54～10.3810.03～10.289.41～10.865.055.044.861.04～4.150.02～1.650.46～7.07六、重大分歧意见的处理过程和依据无。七、与相关法律法规和国家标准的关系本标准按照《中华人民共和国职业病防治法》、《职业卫生技术服务机构检测工作规范》、《职业卫生技术服务机构管理办法》等法律、法规、规范相关要求，对职业卫生实验室研制QCM的总体技术要求、研究步骤、制备过程、贮存/使用等内容进行了规定，是GB/T15000标准样品工作导则、CNAS-GL003-2018能力验证样品均匀性和稳定性评价指南、CNAS-GL005-2018实验室内部研制质量控制样品的指南等标准在职业卫生实验室领域