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34TechnicalregulationfornestedPCRdetectionmethodforporcinecircovirustypI本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定萧县畜牧兽医水产服务中心、岳西县畜牧兽医水产服务中心、望江县畜牧兽医技术推广1猪圆环病毒3型套式PCR检测技术规程GB/T6682分析实验室用水规格NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范《病死及病害动物无害化处理技术规范》(农医发〔2013.1猪圆环病毒属于圆环病毒科、圆环病毒属,根据其致病性、抗原性及基因组序列分为1型、2型和3型等基因型,猪圆环病毒3型是2015年发4主要仪器设备4.2台式高速冷冻离心机:可控温至4℃,离心力12000g以上4.3全自动组织快速碾磨仪。4,4涡旋振荡器4.5冰箱:2℃~8℃、-20℃、-70℃三种。4.7水平电泳槽。4.8凝胶成像系统2):5.7无水乙醇:分析纯。5.9DNA分子量标准:DL2000MaCapCap按照NY/T541的规定执行。病死g~10g活猪采集EDTA抗凝全血(5m7.2运输与保存3),8.2抗凝血样品8.3粪便、口鼻拭子样品10.1反应体系配制Mix8811410.2反应条件设定第1轮、第2轮PCR反应条件均为:95℃预变性5min后,35个循环扩增(95℃变性30s、58℃),10.3电泳10.4结果观察);11.2结果判定在试验成立的条件下,如果检测样品PCR产物电泳后未出现412bp大小特异性目的条带,判为阴12.2实验废弃物处理56A.7加入20
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