呼吸道合胞病毒RSV疫苗抗原最优解：融合前构象（Pre-F）

呼吸道合胞病毒RSV疫苗抗原最优解：融合前构象（Pre-F）RSV疫苗前沿速递2024年6月7日，葛兰素史克（GSK）宣布Arexvy适用范围扩展至50-59岁的RSV高危成人。Arexvy包含RSV融合前重组pre-F糖蛋白及AS01E佐剂，是首款FDA批准的RSV疫苗。2024年8月14日，辉瑞（Pfizer）宣布在免疫功能低下的成年患者中，接种两剂Abrysvo疫苗具有良好的安全性和免疫原性。Abrysvo是根据RSV融合前F蛋白制备的不含佐剂的重组亚单位疫苗。2024年9月3日，据药物临床试验登记与信息公示平台显示，深信生物自研的RSV二价mRNA疫苗启动临床Ⅰ期（登记号CTR20243326），用于预防60周岁及以上人群呼吸道合胞病毒所致下呼吸道疾病。Pre-F蛋白是RSV疫苗研发的关键抗原呼吸道合胞病毒（RespiratorySyncytialVirus，RSV）是引起包含新生儿及婴幼儿在内的5岁以下儿童肺炎和老年人肺炎的主要病原体之一，具有高度传染性和致病性。据统计，全球每年约有3300万5岁以下儿童患下呼吸道感染疾病。印度、中国、尼日利亚、巴基斯坦和印度尼西亚5个国家的RSV疾病负担约占全球的50%。早在20世纪60年代科研人员就开始研究RSV疫苗，但由于ERD影响造成其研发一直停滞不前。结构性或构象疫苗的提出及RSVpreF稳定结构的成功，推动了近十年RSV疫苗的突破性进展。RSV属于负链RNA病毒，分为A、B两种亚型，基因组长约15.2kb，包含10个基因，编码11种蛋白质。其中F蛋白和G蛋白对病毒黏附和入侵非常重要，是病毒表面的主要保护性抗原。但由于G蛋白变异多、不稳定，F蛋白成为RSV疫苗更理想的靶点。F蛋白存在融合前（Pre-fusionProtein，Pre-F）和融合后（Post-fusionProtein，Post-F）构象变化。病毒感染过程中，亚稳态的Pre-F蛋白表达在病毒包膜表面，当与宿主细胞膜接触后，发生结构重排，形成高度稳定的Post-F蛋白。RSVF蛋白融合前后的构象变化（源自文献：doi:10.1016/j.cytogfr.2022.10.001）如图所示，Pre-F蛋白有6种抗原表位，Post-F蛋白仅有4种。抗原表位Ⅴ和Ø可诱导更强的中和抗体活性，尤其是位于Post-F顶端的SiteØ诱导活性最高。Chang等人对两种形式的F蛋白进行研究，发现使用Pre-F蛋白免疫产生的中和效价比Post-F蛋白高6.9倍，从而高效预防RSV感染。因此，结构稳定的Pre-F蛋白是产生高效主动免疫的关键。义翘神州已成功开发具有稳定融合前构象的Pre-F蛋白（货号：11049-VNAS）助力RSV疫苗开发，而融合后构象的Post-F蛋白（货号：40999-V08H）有助于筛选特异性抗Pre-F抗体。3款获批上市的RSV疫苗均是基于Pre-F蛋白，而未采用Pre-F蛋白设计的多款疫苗折戟在临床Ⅲ期，尽管有些在Ⅰ期或Ⅱ期取得了较好的结果，如Novavax的RSV纳米颗粒疫苗、GSK的ChAd155.RSV（FNM2-1）和BavarianNordic的MVABN-RSV等。✦义翘神州RSV特色产品义翘神州已开发具有稳定融合前构象的Pre-F蛋白（货号：11049-VNAS）、RSVPre-F小鼠血抗体滴度检测试剂盒（货号：KIT053）、RSV-F(A2)肽库（货号：PP004）等产品以助力RSV疫苗开发。RSVPre-F重组蛋白，Cat:11049-VNAS经抗体验证：具有稳定的融合前构象经SEC-MALS验证：三聚体比例≥90%高批间一致性CHO稳定株表达，单批次g级供应高纯度，三聚体比例≥90%Purity:≥95%bySDS,≥90%bySEC-MALS(MW~170kDa)高批间一致性ELISAassayvalidated:ImmobilizedRSVPre-fusionproteincanbindtoasiteØspecificPre-Fantibody高稳定性RSVPre-F蛋白(Cat:11049-VNAS)经反复冻融5次或置于4℃放置48h后，理化性质不发生改变，稳定性高。检测样品SDS浓度HPLC纯度分子量（MALS）原液99%98%170kDa冻融5次99%98%172kDa4℃放置48h99%98%171kDaELISA结合实验验证，经过5次反复冻融后的Pre-F蛋白与抗体的结合活性没有降低。ImmobilizedPre-Fproteinbindstoapre-Fspecificantibodythattargetsaquaternary-dependentepitopeataconcentrationof0.2μg/mL(100μL/well).Post-F(HisTag)isnotrecognizedbythementionedantibodyatlowconcentrations(routinelytested).免责声明：义翘神州内容团队仅是分享和解读公开的研究论文及其发现，专注于介绍全球生物医药研究新进展。本文仅作信息交流用，文中观点不代表义翘神州立场。随着对疾病机制研究的深入，新的实验结果或结论可能会修改或推翻文中的描述，还请大家理解。本文不属于治疗方案推荐，如需获得治疗方案指导，请前往正规医院就诊。【参考文献】1.Cranketal.Aproofofconceptforstructure-basedvaccinedesigntargetingRSVinhumans.Science,2019.doi:10.1126/science.aav90332.XiruiQiu,etal.DevelopmentofmRNAvaccinesagainstrespiratorysyncytialvirus(RSV).CytokineandGrowthFactorReviews,2022./10.1016/j.cytogfr.2022.10.0013