江苏省徐州市、宿迁市2025届高三第二次诊断性检测生物试卷含解析

江苏省徐州市、宿迁市2025届高三第二次诊断性检测生物试卷注意事项1．考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回．2．答题前，请务必将自己的姓名、准考证号用0．5毫米黑色墨水的签字笔填写在试卷及答题卡的规定位置．3．请认真核对监考员在答题卡上所粘贴的条形码上的姓名、准考证号与本人是否相符．4．作答选择题，必须用2B铅笔将答题卡上对应选项的方框涂满、涂黑；如需改动，请用橡皮擦干净后，再选涂其他答案．作答非选择题，必须用05毫米黑色墨水的签字笔在答题卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律无效．5．如需作图，须用2B铅笔绘、写清楚，线条、符号等须加黑、加粗．一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．人体细胞无氧呼吸会产生乳酸。研究发现，乳酸不仅人体重要的代谢中间产物和能量载体，还可作为癌细胞的营养来源。下列相关叙述正确的是A．人体无氧呼吸产生乳酸的场所是细胞质基质和线粒体B．剧烈运动后血液中乳酸增多，但对血浆pH的变化不大C．无氧呼吸时，乳酸是重要的能量载体，细胞不产生ATPD．癌细胞的能量仅来自乳酸，与正常细胞相比代谢减缓2．将记录仪的两个电极分别放置在神经纤维膜外的a、c两点，c点所在部位的膜已被损伤，其余部位均正常。下图是刺激前后的电位变化，相关叙述错误的是（）A．兴奋的产生与膜对Na+的通透性改变有关B．被损伤部位c点的膜外电位可能为零电位C．兴奋传到b点时记录仪的指针将向左侧偏转D．结果表明兴奋在神经纤维上以电信号形式传导3．图为某哺乳动物(基因型为AaBbDd)体内一个细胞的分裂示意图。据图分析，下列说法正确的是（）A．该细胞分裂产生的子细胞可能是精细胞或卵细胞B．该细胞形成过程中发生了基因重组、染色体数目变异和染色体结构变异C．与该细胞来自同一个亲代细胞的另一个细胞中最多含有8条染色体D．该细胞中含有同源染色体，正处于有丝分裂后期4．在大肠杆菌的培养与分离实验中，下列相关操作正确的是（）A．在LB固体培养基配制过程中，为防止杂菌污染，需要利用无菌水进行配制B．实验中所需的棉花应使用脱脂棉，因为脱脂棉不易吸水，可以防止杂菌污染C．灭菌后，通常将实验用具放入40~50℃烘箱中烘干，以除去灭菌时的水分D．倒平板应在无菌超净台进行，将培养基倒入培养皿后先置于水平桌面上，再晃动5．下图是基因型为AaBb的某生物体内两个不同时期的分裂模式图，其中染色体上标注的是相应位置上的基因。相关叙述正确的是A．图①中两个细胞的中央将出现赤道板B．图①中细胞2的基因型是AaBBC．图②所示的细胞中有4个染色体组D．图②所示的细胞中有4个四分体6．如图为甲、乙两种单基因遗传病的遗传家系图，甲病家族无乙病致病基因，乙病家族无甲病致病基因，其中一种遗传病为伴性遗传。人群中乙病的发病率为23/144。下列叙述正确的是（）A．甲病为伴X染色体显性遗传病，乙病为常染色体显性遗传病B．Ⅱ1与人群中正常男性婚配，没必要进行遗传咨询C．若Ⅲ1为女孩，则其患病的概率为1/3D．Ⅲ2为正常女孩的概率为11/46二、综合题：本大题共4小题7．（9分）尿生成量与机体水盐平衡有关，抗利尿激素（ADH）是调节机体水盐平衡的重要激素。回答以下有关问题。（1）抗利尿激素在___________（器官）合成，能引起抗利尿激素分泌量增加的有效刺激是____________。（2）有研究表明，适量的乙醇会抑制ADH的分泌，某实验小组以雌性家兔为实验对象对该研究结果进行验证，实验步骤如下：①将健康的生理状态相同的雌性家兔均分为A、B两组。②A组注射适量的乙醇溶液，B组注射______________。③一段时间后测定A、B两组雌性家兔的________________。预测实验结果为_______________。（3）实验小组刺激雌性家兔的迷走神经，发现雌性家兔的尿量明显增加，说明参与尿量调节的信息分子除了抗利尿激素外还有__________________，机体调节尿量的方式是_________________。8．（10分）自2019年底被发现始，仅仅三个月的时间，新型冠状病毒（2019-nCoV）迅速蔓延并已肆虐全球，严重威胁到人类的身体健康与生命安全。研制疫苗是预防感染新型冠状病毒肺炎（COVID-19）最为有效的解决方案，是终结疫情最有力的科技武器。经过几十年的努力疫苗研制已经发展了三代。第一代疫苗指的是灭活疫苗和减毒活疫苗，通过体外培养病毒，然后用灭活的病毒刺激人体产生抗体，它是使用最为广泛的传统疫苗；第二代疫苗又称为亚单位疫苗，是通过基因工程原理获得的具有免疫活性的病原特异性结构蛋白，刺激人体产生抗体；第三代疫苗就是核酸疫苗，又称基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是将编码某一抗原蛋白的基因作为疫苗，注射到人体中，通过正常的人体生理活动产生抗原蛋白，诱导机体持续作出免疫应答产生抗体。分析回答下列问题。（1）从细胞的生命历程来说，被感染的宿主细胞的清除过程属于________，该清除过程有利于_____________________________。（2）2019-nCoV初次侵入人体后，参与该过程的免疫细胞有____________________（至少答出4种），它们直接生活的人体内环境主要是________。当2019-nCoV再次侵入时，____________会增殖分化形成浆细胞，产生大量抗体予以消灭。（3）今年2月份，国家卫健委介绍了研制新冠病毒疫苗的五条技术路线。其中腺病毒载体疫苗是将S蛋白（2019-nCoV的刺突蛋白）的基因装入改造后无害的腺病毒，送入人体，在体内产生S蛋白，刺激人体产生抗体。腺病毒载体疫苗应属于第______代疫苗。与第一代疫苗相比，基因疫苗的特点是_____________________。（4）DNA和mRNA能够成为疫苗的理论基础是_________________________。DNA疫苗需要经过________才能引起免疫反应。在基因疫苗中，________的安全性更有优势，它可以被正常细胞降解，不会整合到人体细胞的基因组中造成难以预料的果而备受人们青睐；另外，它的研发仅需6~8周即可进入临床试验，较传统疫苗的5~6月的研发周期明显缩短，对快速应对大规模爆发性传染疾病具有重要的意义。9．（10分）稻田养蟹是一种新的复合型农业生态种养模式，此技术能够将农业生产与渔业产业有机结合起来，充分提高土地利用率，实现农业增效，请分析并回答下列问题：（1）在稻田养蟹生态系统组成中，主要成分是_____________。（2）水稻与田间杂草的竞争，主要体现在_____________等方面。蟹类的存在可以_____________（填“减弱”或“增强”）这种竞争，从而使水稻的产量_____________。（3）稻田的杂草主要为双子叶杂草，人们总是想方设法将其除去，从能量流动的角度分析这样做的主要目的是_____________________。（4）从生态系统结构分析，稻田养蟹增加了稻田生态系统中_________________的复杂性；从生态系统功能分析，稻田养蟹促进了稻田生态系统中_________________。（5）从环境保护的角度出发，请说一说稻田养蟹、鱼优点：_________________。10．（10分）纳豆和腐乳都是豆类发酵品，用纳豆杆菌发酵大豆制作纳豆的流程原理与腐乳的制作相似。纳豆杆菌能分泌纳豆激酶等。回答下列问题（1）纳豆制作的原理是___________________________。（2）纳豆激酶能够水解血栓中水不溶性的纤维蛋白，所以具有溶解血栓的作用。纳豆杆菌的筛选和分离常用到由磷酸盐缓冲液、纤维蛋白和琼脂配制而成的乳白色的纤维蛋白培养基。从培养基营养组成的角度来看，其中的纤维蛋白的作用是__________________________。若培养基上出现_________________________，说明含有纳豆杆菌。（3）提纯纳豆激酶可用于制备药物。为提取纯化纳豆激酶，可进行下列实验：①接种具有高纤溶活性的菌落到液体发酵培养基。37℃，摇床振荡，发酵3天。②收集发酵液，离心，分层，取_____________作为提取纳豆激酶的材料。③透析法分离：将上述离心所得样品装人透析袋，置于25mmo/L磷酸盐缓冲液中透析，以便达到__________________________的目的。④凝胶色谱纯化：将透析液进行柱层析，用____________进行洗脱，试管连续收集。⑤为了确认试管收集液中是否含有纳豆激酶，还要__________________________。11．（15分）昼夜温差是由白天温度的最高值和夜间温度的最低值之差决定的。为研究正、负昼夜温差对果实膨大期番茄光合作用的影响，在人工气候室内设置5个昼夜温差水平，即-78℃（77℃/34℃）、-5℃、73℃/37℃）、6℃（85℃/85）、+5（37℃/73℃）、+78℃（34℃/77℃），结果如下表所示（气孔导度表示气孔张开的程度，各数据的单位不作要求）。请回答下列问题：项目昼夜温差处理（℃）-78-56+5+78净光合速率7．868．383．454．345．77叶片气孔导度6．756．776．866．846．88叶绿素a含量7．737．887．878．868．67叶绿素b含量6．486．546．736．876．88（7）温度主要通过影响________来影响植物代谢活动。叶片气孔导度的大小、叶绿素含量分别通过直接影响________、________来影响番茄的光合速率。（8）实验以零昼夜温差为对照，在日平均温度________（填“相等”或“不等”）的情况下设置昼夜温差。由上表分析，若要进一步确定最有利于有机物积累的昼夜温差，接下来的操作应该是________。（3）与昼夜温差为+5℃条件下的净光合速率相比，昼夜温差为+78℃条件下的净光合速率较低，原因是____________________________________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、B【解析】

人体无氧呼吸发生在细胞质基质，产物是乳酸，由于血浆中含有缓冲物质，可以调节血浆的pH，因此尽管血液中乳酸的含量较多，但对血浆pH的影响不大。【详解】A.人体无氧呼吸产生乳酸的场所是细胞质基质，A错误；B.剧烈运动后血液中乳酸增多，但血浆中的NaHCO3等缓冲物质的调节作用使血浆pH依旧会保持相对稳定，B正确；C.无氧呼吸第一阶段将葡萄糖分解产生丙酮酸、[H]和少量的ATP，C错误；D.癌细胞与正常细胞相比，细胞代谢更加旺盛，D错误。2、C【解析】

神经纤维未受到刺激时，细胞膜内外的电荷分布情况是外正内负，当某一部位受刺激时，其膜电位变为外负内正，兴奋在神经纤维上的传导是双向的。【详解】A、受到刺激时，细胞膜对Na+的通透性增加，A正确；B、由图可知，刺激前电表向右偏转，因此被损伤部位c点的膜外电位可能为零电位，B正确；C、兴奋传到b点时记录仪的指针将恢复到刺激前的状态，即向右侧偏转，C错误；D、根据刺激前后记录仪指针的偏转情况可推测兴奋在神经纤维上以电信号形式传导，D正确。故选C。【点睛】本题考查神经纤维上兴奋传导的相关知识，意在考查学生的识图能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。3、B【解析】

识图分析可知，图中染色体的着丝点分裂，且只有A、a等位基因所在的一对同源染色体，其它染色体均为非同源染色体，故该细胞处于减数第二次分裂的后期。图中细胞内出现了A、a等位基因所在的同源染色体是由于减数第一次分裂的后期A、a所在的同源染色体移向一极导致的，图中B基因所在的染色体的一段移接到了A所在的染色体上，因此发生了染色体结构的变异中的易位。【详解】A、根据以上分析可知，该细胞处于减数第二次分裂的后期，由于细胞质均等分裂，因此该细胞分裂产生的子细胞可能是精细胞或极体，A错误；B、由于该细胞经过了减数第一次分裂，在减数第一次分裂的后期发生了非同源染色体上的非等位基因自由组合，即基因重组，由于细胞中A、a所在的同源染色体移向一极，因此发生了染色体数目变异，由于B基因所在的染色体的一段移接到A所在的非同源染色体上，因此发生了染色体结构变异中的易位，B正确；C、根据以上分析可知，该细胞发生了染色体数目的变异，正常情况下该细胞内此时含有6条染色体，因此与该细胞来自同一个亲代细胞的另一个细胞中最多含有4条染色体，C错误；D、根据以上分析可知该细胞中含有同源染色体是由于减数第一次分裂后期有一对同源染色体移向一极导致的，该细胞处于减数第二次分裂的后期，D错误。故选B。4、D【解析】

大肠杆菌培养过程中应保持无菌，所有操作都应注意无菌操作。【详解】A、LB培养基配置完成后需要灭菌，因此在配置过程中无需用无菌水，A错误；B、脱脂棉易吸水，容易引起杂菌污染，实验中所需棉花不应使用脱脂棉，B错误；C、灭菌后，通常将实验用具放入60-80℃烘干箱中烘干，C错误；D、倒平板应在无菌超净台进行，倒完平板应先置于水平桌面上，再晃动，D正确。故选D。【点睛】本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生识记培养基的成分以及制备方法，识记无菌技术的主要内容，同时要求考生具有一定的实验技能。5、B【解析】

分析题图：图①中细胞1与细胞2无同源染色体和染色单体，细胞内染色体移到细胞两极，两个细胞均处于减数第二次分裂后期；图图②同源染色体成对排在细胞的赤道板，说明细胞处于减数第一次分裂的中期。【详解】A、图①中两个细胞的中央将出现细胞板，细胞中央没有赤道板结构，赤道板是人们假想的平面，A错误；B、据图①可知，细胞1与细胞2处于减数第二次分裂后期，由于细胞1的基因型是Aabb，说明在减数第一次分裂的四分体时期，A、a基因所在的同源染色体的姐妹染色单体发生了交叉互换，因此图①中细胞2的基因型是AaBB，B正确；CD、图②是减数第一次分裂的中期，细胞中含有2个染色体组、2个四分体，C、D错误。故选B。6、D【解析】

分析乙病：3号和4号患病生出正常的女儿和儿子，可知该病是显性遗传病，再根据父亲患病，女儿正常，则该病是常染色体显性遗传病，设用字母A、a表示；分析甲病：已知题干中另一种病为伴性遗传，再根据1号患病，2号正常，可知甲病为伴X隐性遗传病，设用字母B、b表示，据此答题。【详解】A、据分析可知，甲病为伴X隐性遗传病，乙病为常染色体显性遗传病，A错误；B、Ⅱ1患有甲病，与正常男性婚配，其后代有患病概率，因此需要进行遗传咨询，B错误；C、Ⅱ3的基因型是aaXbY，Ⅱ4的基因型是1/3AAXBXB或2/3AaXBXB，则所生后代是女儿其患病的概率是1-2/3×1/2=2/3，C错误；D、人群中乙病的发病率23/144，则正常的概率aa=121/144，a=11/12，则人群中Aa的概率为22/23，为Ⅱ6的基因型是aaXBY，其后代的女儿一定不患甲病，则只需求患乙病的概率，Ⅱ7的基因型是22/23aa，因此患病的概率是22/23×1/2=11/23，是女儿的概率再乘以1/2，因此Ⅲ2为正常女孩的概率为11/46，D正确。故选D。二、综合题：本大题共4小题7、下丘脑细胞外液渗透压升高等量的生理盐水尿量A组尿量比B组多神经递质神经--体液调节【解析】

水盐平衡的调节。1．体内水少或吃的食物过咸时→细胞外液渗透压升高→下丘脑感受器受到刺激→垂体释放抗利尿激素多→肾小管、集合管重吸收增加→尿量减少，同时大脑皮层产生渴觉（饮水）；2．体内水多→细胞外液渗透压降低→下丘脑感受器受到刺激→垂体释放抗利尿激素少→肾小管、集合管重吸收减少→尿量增加。【详解】（1）抗利尿激素是下丘脑神经分泌细胞合成的，通过垂体释放的激素，能促进肾小管、集合管对水分的重吸收，从而使细胞外液渗透压下降，显然细胞外液渗透压升高能引起抗利尿激素分泌量增加。（2）实验目的是验证适量的乙醇会抑制ADH的分泌，据此可知实验中的自变量是有、无乙醇刺激，因变量是抗利尿激素的分泌量的变化，也可检测抗利尿激素的作用效果，即尿量变化，据此实验步骤为：①分组编号：将健康的生理状态相同的雌性家兔均分为A、B两组。②给与不同处理：A组（实验组）注射适量的乙醇溶液，B组（对照组）注射等量的生理盐水。③一段时间后测定A、B两组雌性家兔的尿量变化。由于使用乙醇后，抑制了抗利尿激素分泌，则A组家兔体内抗利尿激素减少，导致尿量增多，故实验结果为A组家兔尿量对多于B组，则能得出适量的乙醇会抑制ADH的分泌的结论。（3）实验小组刺激雌性家兔的迷走神经，发现雌性家兔的尿量明显增加，说明参与尿量调节为神经调节--体液调节，其中涉及的信息分子除了抗利尿激素外还有神经递质，即机体调节尿量的方式是神经--体液调节。【点睛】熟知水盐平衡调节的过程是解答本题的关键！掌握抗利尿激素的合成、释放部位以及作用效果是解答本题的另一关键！8、细胞凋亡维持生物内部环境稳定，抵御外界各种因素干扰吞噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、浆细胞、效应T细胞血浆、淋巴和组织液B淋巴细胞和记忆细胞三毒副作用更小特异性更强，免疫应答更持久，有效性更高中心法则、所有生物共用一套遗传密码转录和翻译产生相应的抗原蛋白mRNA疫苗【解析】

人体中的特异性免疫调节可以分为体液免疫和细胞免疫两种，对病毒的免疫主要依靠特异性免疫来完成。当病毒侵入宿主细胞的时候，机体通过细胞免疫将靶细胞裂解，这种细胞裂解属于细胞凋亡。人体中的免疫细胞包括吞噬细胞和淋巴细胞两类，主要存在于人体的内环境中。【详解】（1）感染的宿主细胞的清除属于自身基因诱导下完成的细胞凋亡；该过程将入侵的病原体及时清除有利于维持生物内部环境稳定，抵御外界各种因素干扰；（2）当病毒初次侵入人体，主要由吞噬细胞、T细胞、B细胞、浆细胞和效应T细胞来进行免疫；这些细胞主要分布与血浆、淋巴和组织液中，以便对各处的病原体进行及时的识别与清除；当同一种抗原再次入侵的时候，则主要依靠B细胞和第一次免疫产生的记忆细胞增值分化形成浆细胞；（3）腺病毒载体疫苗是将S蛋白的基因装入改造后无害的腺病毒，按照题干疫苗的分类，其应该归为基因疫苗即第三代疫苗；第三代疫苗同第一代疫苗相比，毒副作用更小，使用针对性的基因或RNA做成的模板当疫苗，特异性更强，免疫应答更持久，有效性更高；（4）DNA和mRNA能够成为疫苗是由于其可以进行转录和翻译产生抗原蛋白，除此之外还因为各种生物共用一套遗传密码，所以翻译的蛋白质具有特异性；DNA疫苗本身并不能当作抗原，而是经过转录和翻译之后产生的蛋白质才能当作抗原；在基因疫苗中，由基因转录的相应的抗原蛋白mRNA疫苗本质属于RNA，本身不会整合到人体的基因组中去，安全性较高。【点睛】该题的难点是借由题干，分析第三代疫苗发挥作用的机制及相比较于前两代疫苗的优点。基因疫苗本身并不具有抗原的特性，也没有毒性，因此将基因疫苗注射到人体中安全性较高，后续由DNA或RNA进行转录或翻译后产生的特定的蛋白质才是具有抗原特性的物质。9、水稻肥料、空间、水分和阳光减弱增加调整能量流动关系，是能量持续高效的流向对人类最有益的部分营养结构（食物链和食物网）物质循环和能量流动可使稻田中害虫减少，代替或减少化肥及农药的使用，减轻了农业污染；避免了水体富营养化，从而减少环境污染【解析】

1、生态农业的基本原理：能量多级利用和物质循环再生。农业生态工程中种植业和畜牧业合理优化技术能减少化肥的使用。2、生态农业结合生态系统的能量流动、信息传递的功能等知识，将知识形成网络再结合题干信息完成该题的作答。【详解】（1）稻田养蟹生态系统组成中，主要的成分是生产者水稻。（2）水稻与田间杂草的种间关系是竞争，主要体现在肥料、空间、水分和阳光等方面的竞争。蟹类可以取食杂草等而达到减弱这种竞争使水稻增产。（3）从能量流动的角度分析，除草的主要目的是调整能量流动关系，是能量持续高效的流向对人类最有益的部分。（4）从生态系统结构分析，稻田养蟹增加了稻田生态系统中营养结构的复杂程度，提高了生态系统的稳定性。从生态系统功能分析，稻田养蟹促进了稻田生态系统中物质循环和能量流动。（5）稻田养蟹、鱼可使稻田中害虫减少，代替或减少化肥及农药的使用，减轻了农业污染；避免了水体富营养化，从而减少环境污染。【点睛】本题考查生态系统的相关知识，意在考查学生理解生态农业的知识要点，要求能运用所学知识，通过比较、分析对问题进行解释、推理，得出正确的结论的能力。10、纳豆杆菌等微生物分泌的蛋白酶能将豆类中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸充当碳源和氮源，提供能源物质（较大）溶解圈上清液去除/置换样品中分子量较小的杂质（25mmol/L）磷酸（盐）缓冲液添加适量收集液到纤维蛋白培养基上（或添加适量收集液到含有血栓的溶液里）【解析】

1、腐乳的制作原理：以豆腐为原料利用毛霉等微生物分泌出各种酶，促使豆腐坯中的蛋白质分解成营养价值高的氨基酸和一些风味物质。有些氨基酸本身就有一定的鲜味，腐乳在发酵过程中也促使豆腐坯中的淀粉转化成酒精和有机酸，同时还有辅料中的酒及香料也参与作用，共同生成了带有香味的酯类及其他一些风味成分，从而构成了腐乳所特有的风味。腐乳在制作过程中发酵，蛋白酶和附着在菌皮上的细菌慢慢地渗入到豆腐坯的内部，逐渐将蛋白质分解，大约经过三个月至半年的时间，松酥细腻的腐乳就做好了，滋味也变得质地细腻、鲜美适口。2、培养基的成分包括：碳源、氮源、无机盐和水，有的需要生长因子等。碳源分为无机碳源和有机碳源，无机碳源如二氧化碳，有机碳源如葡萄糖，碳源是构成生物体细胞的物质和一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质；氮源分为无机氮源（铵盐、硝酸盐等）和有机氮源（尿素、牛肉膏等），合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物。3、血红蛋白的提取和分离：（1）样品处理：洗涤，用生理盐水洗涤，低速离心，直至上清液中没有黄色；（2）血红蛋白释放：加入蒸馏水和甲苯，细胞破碎释放血红蛋白；（3）分离：低速离心，分成4层，第三层红色透明液体为血红蛋白水溶液层，分出该层；（4）透析：放入透析袋，出去分子量较小的杂质；（5）过凝胶色谱柱收集纯蛋白。【详解】（1）根据题意可知，用纳豆杆菌发酵大豆制作纳豆的流程原理与腐乳的制作相似，因此纳豆制作的原理是：利用纳豆杆菌等微生物分泌的蛋白酶能将豆类中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。（2）根据培养基的成分可知，纤维蛋白既含有碳元素也含有氮元素，因此可以作为碳源和氮源使用，提供能源物质，由于纳豆杆菌能分泌纳豆激酶，纳豆激酶能够水解水不溶性的纤维蛋白，在乳白色的固体培养基上如果存在纳豆杆菌，则可以在培养基上形成较大的溶解圈。（3）纳豆激酶的化学本质属于蛋白质，因此提纯纳豆激酶的方法即提纯蛋白质的方法。实验步骤：①接种具有高纤溶活性的菌落到液体发酵培养基。37℃，摇床振荡，发酵3天。②收集发酵液，离心，分层，取上清液作为提取纳豆激酶的材料。③透析法分离：将上述离心所得样品装人透析袋，置于25mmo/L磷酸盐缓冲液中透析，透析的目的是去除/置换样品中分子量较小的杂质。④