动物组织学与胚胎学：绪论

动物组织学与胚胎学

绪论组织学—研究正常动物机体微细结构及其相关功能的学科。Histology胚胎学—研究动物从生殖细胞形成，经过受精、早期胚胎发育，至个体形成的演变过程。大部分是在母体子宫内进行的。Embryology细胞学概论基本组织学器官组织学胚胎学概论2学分：讲18学时实验18学时动物组织学发展简史光学显微镜的发明与细胞、组织概念的提出

RobertHooke（英）1665年，细胞

Bichat（法）1801年，组织。21种组织构成器官细胞学说的提出与组织学的建立

Schleiden1838,Schwann1839，细胞学说。电子显微镜的发明和超微结构的研究Ruska和Konll

（德）1932年。分辨率由0.2

m提高到0.2nm。1985年诺贝尔奖19世纪中期以后，随着光学显微镜、切片技术及染色方法的不断改进与充实，推动着组织学的继续发展。

细胞化学、流式细胞术、图像分析、组织培养、细胞工程等

现代组织学学科的发展与研究方法的建立和改进、实验仪器设备的发明密不可分。

动物胚胎学发展简史古希腊Aristotle，最早描述鸡胚发育。1651年，英国Harvey提出了“一切生命皆来自卵”的假说。显微镜发明后，LeeuwenHoek与Graaf分别发现了精子和卵泡。意大利Malpighi

提出“预成论”。18世纪中叶，德国Wolff提出“渐成论”。1828年，爱沙尼亚Barr提出了“贝尔定律”，认为各种动物的早期胚胎极为相似，随着发育的进行才逐渐出现纲、目、科、属、种的特征。（比较胚胎学）1855年，德国Remak提出胚胎发育的三胚层学说。（描述胚胎学）1860年代，德国Muller和Haeckel

提出“重演律”，认为个体发生是系统发生的重演。19世纪末，德国Spemann开展实验胚胎学研究，分离、切割、移植、重组等。并提出诱导学说。1935年的诺贝尔奖。1931年，英国Needham发表“化学胚胎学”，研究发育过程中化学物质的变化、能量的消长、新陈代谢特点、化学因素与胚胎形态演变的关系。20世纪50年代开始了现代胚胎学研究。转基因、克隆、试管婴儿。胚胎学与分子生物学、遗传学和细胞生物学的彼此渗透，相互交叉，形成了

“发育生物学”我国胚胎学先驱：童第周、朱冼组织学与胚胎学研究方法简介

常规光镜技术石蜡切片Paraffinsectioning

最经典、最常用。基本程序：取材固定脱水和透明石蜡包埋切片染色封片最常用的染色方法：苏木精－伊红染色法Hematoxylin-eosinstaining,H-E细胞核嗜碱性,呈蓝色；细胞质嗜酸性,呈红色制片方法还有：涂片（血液）、印片（内脏断面）、撕片（纤维性组织）、磨片（骨）、铺片（肠系膜）、冰冻切片。此外，有些组织结构经硝酸银处理（又称银染）后呈现黑色，此现象称嗜银性（argyrophilia）。有些组织成分用甲苯胺蓝（toluidine）等碱性染料染色后不显蓝色而呈紫红色，这种现象称异染性。不同的染色方法可以显示不同的细胞或结构。光学显微镜最好的光镜其分辨率约为0.2μm，可将物体放大约1500倍。借助光镜能观察到的细胞、组织的微细结构，称光镜结构。

显微摄影技术石蜡切片机冰冻切片机荧光显微镜是用设置了特殊的光源、滤片系统的显微镜观察标本内的自发荧光物质或荧光素染色或标记的结构。

电子显微镜技术电子显微镜（简称电镜）虽与光镜不同，但基本原理相似。电镜是以电子发射器代替光源，以电子束代替光线，以电磁透镜代替光学透镜，最后将放大的物像投射到荧光屏上进行观察。分辨率比光镜高1000倍。在电镜下所见的结构，称超微结构（ultrastructure）。透射电子显微镜技术参数1.点分辨率：0.19nm

2.线分辨率：0.14nm

3.加速电压：80,100,120,160,200kV

4.倾斜角：25

5.EDS:13主要特点1.五种极靴UHR、HR、HT、HC、CRYO

2.稳定的操作系统

3.最小束斑尺寸：0.5nm

4.良好的扩展性

仪器介绍JEM-2100搭载Windows操作界面,操作更简单。并与STEM,EDS,CCD和EELS实现了一体化控制。

JEM-2100高度稳定性的测角台设计先进，非常适于包括3位重构在内的样品台倾斜。选用日本电子专用软件，可以轻松实现3D观察。压电陶瓷控制样品台也独步天下。

TheJEM-2100采用3级聚光镜设计在任何束斑尺寸下都可以提供高亮度电子束，大大提高了分析和衍射成像能力。扫描电子显微镜技术参数1.高真空模式：3.0nm低真空模式：4.0nm

2.低真空度1to270Pa，高、低真空切换

3.样品台X:80mmY:40mmT:-10to+90degreeR:360degree

4.加速电压0.5kVto30Kv束流1pA—1uA

5.真空系统马达驱动台能谱分析接口主要特点1.既保证高电压下的高分辨率，也可提供低电压下高质量的图像。

2.全自动电子枪

3.高灵敏度半导体背散射探头

4.超级圆锥形物镜,高精度的变焦聚光镜系统

5.大样品室，全对中的样品台，大视野观察范围可观测到2厘米见方的样品仪器介绍

JSM-6390LV钨灯丝扫描电镜，是日本电子株式会社在2006年1月推出的新型号数字化扫描电镜，堪称世界上最先进的扫描电子显微镜。主要特点为全数字化控制系统，高分辨率、高精度的变焦聚光镜系统、全对中样品台及高灵敏度半导体背散射探头；用于各种材料的形貌组织观察、金属材料断口分析和失效分析。透射电镜技术Transmissionelectronmicroscopy,TEM电子束作光源，电磁场作透镜，荧光屏成像。观察细胞内部的微细结构，超微结构Ultrastructure。(显微结构Microstructure)超薄切片，重金属染色。结构不同，电子密度高低也不同。扫描电镜技术Scanningelectronmicroscopy,SEM观察组织细胞表面的立体结构，立体感强。用于观察细胞表面的结构或内部刨面

激光共聚焦扫描显微技术以激光为光源，采用共焦成像系统和电子光学系统，经过微机图像分析系统对组织或细胞进行二维或三维分析处理。更准确、快速地对细胞内的微细结构进行定性和定量测定.20世纪80年代研制的高光敏度、高分辨率新型生物学仪器

组织化学Histochemistry利用化学反应原理，对组织和细胞所含化学物质进行定位、定性研究。有色产物，镜下可见。可显示蛋白质、酶类、脂类、糖类和核酸等物质。免疫组织化学Immunohistochemistry

应用抗原抗体特异性结合的免疫学原理，检测组织细胞中某种肽类或蛋白质分布。特异性强，灵敏度高、定位准确。已知抗体需用荧光素、酶或胶体金标记。

原位杂交Insituhybridization是一种特异性的核酸生物化学技术。用带有标记的已知碱基序列的核酸探针，按照碱基互补原理,与细胞内未知的核酸进行特异性原位杂交，再通过显示标记物，从而确定待检核酸的分布。标记物有地高辛、放射性同位素等转基因与双原位杂交鸡胚Shh原位杂交

细胞培养Cellculture无菌条件下取出体内的活细胞或组织，在体外适宜环境（培养基）中培养并进行生命活动，利于在体外进行实验研究。又称体外培养Invitroculture体外培养需要模拟体内环境：充足的营养，合理的O2和CO2比例，适宜的渗透压、pH、温度和湿度等。组织胚胎学的学习方法（一）形态与功能相互联系的观点（二）进化发展的观点（三）局部与整体统一的观点（四）理论与实际相结合的观点

与其他学科的关系专业基础课与解剖学的关系：大体与微细（宏观与微观）与生理学的关系：结构与功能与病理学的关系：正常与异常（健康与病理）与生物化学关系：代谢是在细胞组织中进行与免疫学的关系：免疫系统与淋巴组织与产科学的关系