义翘讲堂《非酒精性脂肪性肝病药物研发进展及靶点》

非酒精性脂肪性肝病药物研发进展及热门靶点霍彤博士高级产品经理北京义翘神州科技股份有限公司（美国子公司）DrugDevelopmentProgressandHotTargetsforNAFLD义翘神州主要内容NAFLD全球药物研发进展1NAFLD主要病理机制及相关通路2重要在研靶点及其应用案例3义翘神州NAFLD全球药物研发进展01义翘神州非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）定义及背景NAFLD是指除酒精和其他明确损肝因素外，肝内脂肪过渡沉积或代谢紊乱引起的慢性疾病。今年6月，美国肝病研究协会（AASLD）和欧洲肝脏研究协会（EASL）倡议将其更名为代谢功能障碍相关的脂肪性肝病（MASLD），以突出代谢对疾病的影响。NAFLD的疾病谱包括：单纯性非酒精性脂肪肝（NAFL）、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）及其相关的肝硬化和肝细胞癌。/10.1016/j.cell.2021.04.01525%NAFLD人群20%发展为NASH20%发展为肝纤维化20%发展为肝硬化最终有转为肝癌的可能义翘神州非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）药物治疗F1–F4,fibrosisstages1–4缓解肝炎血糖控制缓解脂质代谢紊乱针对心血管疾病减缓纤维化过程多个药物治疗阶段和方向/10.1038/s41575-020-00408-y义翘神州非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）药物研发药物获批情况：尚未有任何针对NAFLD的有效药物获得FDA和NMPA批准临床2/3期的药物靶点布局：PPAR、THRB、GLP1、ACC、SCD1、FXR、FGF、Galectin-3/10.1038/s41575-020-00408-y义翘神州临床3期的重要药物靶点及销售预测：无任何药物获FDA批准极大的患者人群及市场需求全球第一个NASH药物竞争激烈全球第一支NAFLD/NASH新药竞争激烈*GlobalData义翘神州NAFLD主要病理机制及相关通路02义翘神州NASH病理机制：从“Two-Hit”模型到复杂诱因脂肪的积累产生影响第一击：脂肪积累，但不引发炎症和纤维化第二击：其它因素加剧损伤，如炎症、氧化应激、细胞死亡肥胖、胰岛素抵抗、高脂血症、心血管疾病、慢性肾脏疾病的协同诱因Doi:10.3389/fphar.2020.603926“Two-Hit”二次打击理论复杂诱因义翘神州从“多诱因”到“多靶点”代谢脂代谢：PPAR、THRB、ACC、FGF21胆酸代谢：FXR、FGF-19糖代谢：GLP-1R、SGLT、mTOR炎症抑制炎性细胞招募，阻断炎性信号纤维化靶向肝脏星形细胞，增强纤维分解Doi:10.1136/gutjnl-2021-326874NASH的三大药物研发方向：义翘神州甲状腺激素T3提高线粒体和过氧化酶对脂肪酸的β氧化，降低肝型脂肪酸结合蛋白表达（l-FABP），阻止肝脏脂肪变性。抑制基因表达：TR、RXR与TRE结合，招募辅助抑制因子和组蛋白去乙酰化酶（HDAC）激活基因表达：T3的结合引起TR构象变化，释放辅助抑制因子，招募辅助激活因子和组蛋白乙酰转移酶（HAT）Doi:10.3389/fmed.2020.00331代表靶点：TH-THR脂代谢代表靶点：TH-TR义翘神州T3、rT3、T4：甲状腺激素的3种形式TR：甲状腺激素受体TRE：甲状腺激素反应元件与脂肪酸氧化相关的PPARα靶基因主要通过PPRE结合的依赖方式进行调控。激活的PPARα：促进脂肪酸氧化阻碍炎症反应诱导过氧化氢酶（CAT）的表达，降低肝脏中的过氧化氢水平降低环氧合酶-1（COX-1）的表达，改善和减轻肝脏血管阻力https://www.journal-of-hepatology.eu/article/S0168-8278(14)00806-X/fulltext脂代谢代表靶点：PPARα-PPRE义翘神州/1422-0067/24/5/4583FGF19抑制胆固醇7α羟化酶（CYP7A1），抑制胆酸合成FGF19抑制CREB/PGC1α信号级联，抑制糖异生FGF19激活STAT-3通路，将正常肝细胞转化为恶性细胞胆酸代谢代表靶点：FGF19-FGFR义翘神州胆汁酸激活核受体FXR，导致胆汁分泌增加，合成和摄取减少，维持胆汁酸稳态上调脂肪酸（FA）氧化降低肪酸FA合成下调葡萄糖新生肠道FXR导致FGF19水平升高，介导脂肪酸氧化增加DOI:10.1055/s酸代谢代表靶点：FXR义翘神州GLP-1和GLP-1受体激动剂可直接改善肝脏胰岛素抵抗GLP-1受体激动剂可以提高脂联素水平，间接改善胰岛素抵抗程度胰岛素信号通路的调节将减少肝细胞三酰甘油的储存Doi:10.3390/ijms24021703糖代谢代表靶点：GLP1R-GLP1义翘神州重要在研靶点及其应用案例03义翘神州文章：Discoveryofecnoglutide-Anovel,long-acting,cAMP-biasedglucagon-likepeptide-1(GLP-1)analog发表时间：2023年6月22日靶点：GLP-1R义翘产品：重组人GLP-1R蛋白（Cat:13944-H02H）合成一系列GLP-1类似物通过评估cAMP水平，beta-arrestin募集和受体内化水平，筛选化合物(M2,M4)案例展示义翘神州通过评估与GLP-1受体的结合，筛选出最优化合物（M4）小鼠模型中显示，M4化合物有效降低体重实验步骤：重组人GLP-1R蛋白（义翘神州，13944-H02H）通过氨基偶联固定于Biacore，进行亲和力检测。加入梯度浓度的GLP-1类似物进行筛选

案例展示义翘神州文章：FOXO1inhibitionsynergizeswithFGF21tonormalizeglucosecontrolindiabeticmice发表时间：2021年2月10日靶点：FGF21义翘产品：重组人FGF21蛋白

（10911-H07E/10911-HNAE）细胞实验评估抑制剂活性抑制剂降低小鼠体重，对FOXO1敲除小鼠无明显效果案例展示义翘神州抑制剂和FGF21具有协同作用实验步骤：将重组人FGF21蛋白（义翘神州）配制在生理盐水中，每日以0.45mg/kg剂量注射小鼠。对于同时注射的小鼠，在第一天开始注射FGF21，第四天开始注射抑制剂。义翘神州文章：Regulationofgenetranscriptionbythyroidhormonereceptorβagonistsinclinicaldevelopmentforthetreatmentofnon-alcoholicsteatohepatitis(NASH)发表时间：2020年12月11日靶点：

THR-beta（LBD)选择对照化合物，合成新化合物基于FRET的THR-betaLBD结合实验案例展示/10.1371/journal.pone.0240338义翘神州选用Huh-7和PHH细胞，检测THRB下游基因表达水平义翘神州“Primary

invitro

screenssuchastheTR-FRETandluciferasereporterassaysprovidegeneraltrendsastohowtestcompoundsmayinteractwithTHRs.

”作者提出：“FRET和荧光素酶报告基因检测等原位体外筛选方法能够提供有关测试化合物如何与甲状腺激素受体相互作用的普遍趋势”义翘神州助力NASH重要靶点的开发-THRB

≥95%asdeterminedbySDS;≥90%asdeterminedbySEC-HPLC.THRB:Cat:15737-H07ELBDdomain高纯度人源蛋白His标签案例展示义翘神州HumanTHR-βProteinHisTagCat:15737-H07EHPLCVerifiedHumanNR1H4/FXRProteinHisTagCat:17624-H07EHPLCVerifiedHumanGLP1-RProteinHis&AVITag(Biotinylated)Cat:15737-H07EHPLCVerifiedPurity≥95%Purity≥95%Purity≥95%ProductCatalogNo.TagCitationsHumanFASN30113-H07EN-His

MouseFASN57840-M07EN-His

MouseNR1H4/FXR53744-M07EN-His

HumanGLP1-R13944-H02HhFc5CitationsHumanPPARA12080-H07EN-His

MousePPARA56956-M07EN-His

HumanACLY11769-H07BN-His7CitationsHumanFGF1912226-HNAENoTag2CitationsMouseFGF2150421-M08HHisTag5CitationsHumanFGF2110911-HNAENoTag

HamsterFGF215A7643-M08HHisTag

HumanFGF2110911-H07EHisTag3CitationsAnti-FASNAb,RabbitpAbCat:100685-T10

Applications:IHC-P,ICC/IFAnti-FGFR1Ab,RabbitpAbCat:109326-T08Applications:IHC-PAnti-JNK2Ab,Rabbit

mAbCat:10745-R011Applications:WB,ELISA,IHC-P,ICC/IF,IPImmunofluorescencestainingofFASNinA549cellsIHCstainingofmouseFGFR1inmousekidneywithrabbitpolyclonalantibodyJurkatwholecelllysateprobedwithanti-JNK2/MAPK9antibodyAntibodyCatalogNo.ApplicationFASN105090-T04IPFGF2150421-R005ELISAFGF2150421-RP02ELISAFGF2150421-RP01ELISAACLY11769-T52WB,ELISA,IPFGF1912226-T16ELISAFGF1912226-R032ELISAFGF1912226-RP01ELISA义翘神州助力NASH靶点开发NASH研究相关靶点蛋白NASH研究相关抗体义翘神州关于“北京义翘神州”坚持自主研发生产