全国高考生物试题汇编（10月 下）L单元 生物工程及技术（含解析）

L单元生物工程及技术目录L单元生物工程及技术 1L1传统发酵技术与发酵工程的应用 1L2微生物的类型、营养和代谢 1L3微生物的培养与应用 1L4酶的应用 2L5DNA的粗提取及蛋白质提取技术 2L6植物有效成分的提取 2L7基因工程与蛋白质工程 2L8植物细胞工程与植物的组织培养技术 2L9动物细胞工程与单克隆抗体 2L10胚胎工程 3L11生物技术的安全性和伦理问题 3L12生态工程 3L13生物工程及技术综合 3L1传统发酵技术与发酵工程的应用【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】19．亚硝酸盐在酸性条件下与对氨基苯磺酸重氮化后,再与α-萘胺反应生成的溶液呈()A．紫红色 Ｂ．蓝色 Ｃ．砖红色 Ｄ．橘红色【答案】【知识点】L1传统发酵技术与发酵工程的应用【答案解析】A解析：在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化反应后，再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合生成紫红色复合物，A正确。【典型总结】本题是考查泡菜中亚硝酸盐含量测定的原理，亚硝酸盐含量测定的原理是在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化反应后，再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合生成紫红色复合物，根据颜色的深浅与标准比色卡比色估算出亚硝酸盐的含量。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】18．腐乳味道鲜美，易于消化、吸收，是因为其内主要含有的营养成分是（

）A．无机盐、水、维生素

B．NaCl、水、蛋白质C．多肽、氨基酸、甘油和脂肪酸

D．蛋白质、脂肪、NaCl、水【答案】【知识点】L1传统发酵技术与发酵工程的应用【答案解析】C解析：豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪，都是大分子有机化合物，难以消化、吸收，毛霉、酵母菌等多种微生物分泌的蛋白酶，能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸，在多种微生物的协同下，豆腐转变成腐乳。C正确。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】17．下列关于果醋的制作，错误的是()A．果醋的制作需用醋酸菌，醋酸菌是一种好氧菌，所以在制作过程中需通氧气B．醋酸菌是一种嗜温菌，温度要求较高，一般在50℃C．醋酸菌能将果酒变成果醋D．当氧气、糖源充足时，醋酸菌可将葡萄中的糖分解成醋酸【答案】【知识点】L1传统发酵技术与发酵工程的应用【答案解析】B解析：醋的制作需用醋酸菌，醋酸菌是一种好氧菌，所以在制作过程中需适时通氧气，A正确；醋酸菌是一种嗜温菌，温度要求较高，一般在30-35℃【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】2.制果醋时，要适时通过充气口进行充气是因为（）A.醋酸菌是好氧菌，将酒精变成醋酸时需要氧气的参与B.酵母菌进行酒精发酵时需要氧气C.通气可防止发酵液霉变D.防止发酵时产生的二氧化碳气体过多而引起发酵瓶的爆裂【答案】【知识点】C4细胞呼吸L1传统发酵技术与发酵工程的应用【答案解析】A解析：醋酸菌属于好氧菌，将酒精变成醋酸时需要O2的参与，所以要适时通过充气口进行充气，故A正确；酵母菌酒精发酵是利用的酵母菌无氧呼吸，故B错误；充气是为了保证醋酸菌有充足的氧气进行有氧发酵，故C错误；酒精发酵过程中由于产生二氧化碳要设置出气口，而醋酸发酵过程中不产生气体，故D错误。L2微生物的类型、营养和代谢【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】14.甲、乙、丙是三种微生物，下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是A．甲、乙、丙都是异养微生物

B．甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物C．甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物D．甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物【答案】【知识点】L2微生物的类型、营养和代谢【答案解析】D解析：从表中所列的三种培养基成分着手，培养基I中缺少氮源，培养基Ⅱ中缺少有机碳，培养基Ⅲ中营养成分最全．由题意中所给的情况分析，只有甲能在培养基I中生长，而乙、丙不能说明甲能自行固氮；乙能在Ⅱ中生长，说明乙可自行合成有机碳，是一种自养微生物；而丙只能在Ⅲ中生长，说明它既不能固氮也不能自行合成有机物。由此可知甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物，D正确。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】4．微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是（）A．细菌的大小、形状、颜色 B．菌落的大小、形状、颜色C．有无鞭毛D．培养基的不同【答案】【知识点】L2微生物的类型、营养和代谢【答案解析】B解析：肉眼观察不到细菌的大小、形状、颜色，A错；鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是菌落形态，如菌落的大小、形态、颜色，B正确；肉眼无法观察到细菌的鞭毛，C错；培养基不同不是鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据，D错。【思路点拨】鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是菌落形态，金黄色葡萄球菌为圆形光滑较小菌落，直径一般只有1mm左右，白色或金黄色．而枯草杆菌的菌落表面为不规则隆起，菌落较大，直径有5mm左右，表面粗糙，白色或略带一些暗黄色。L3微生物的培养与应用【生物卷（解析）·届江西省师大附中高三10月月考（10）】29下面是弗来明对青霉素的早期研究过程。发现问题：在培养细菌的器具中发现一种青霉菌，在这种青霉菌的周围有没有其它细菌生存。为什么会产生这种现象？提出假设：。设计实验：用培养液培养青霉菌后，考察这种液体对细菌增殖的影响。实验结果：培养液使细菌的增殖停止。结论：下面几项最适合作为该实验假设的是（）A．青霉菌与细菌之间是共生关系 B．青霉菌污染了细菌生存的环境C．青霉菌产生了对人体有益的物质 D．青霉菌能产生抑制细菌增殖的物质【答案】【知识点】L3微生物的培养与应用【答案解析】D解析：弗莱明在培养细菌的器具中发现一种青霉菌，在这种青霉菌的周围没有其他细菌生存，因此，他提出的问题应该是：青霉菌产生的处为什么没有细菌？作出假设是对提出问题的回答，弗莱明针对青霉菌处没有细菌的事实作出的假设应该是：青霉菌能产生抑制细菌增殖的物质。D正确。【生物卷（解析）·届江苏省盐城中学高三10月月考（10）】18.下列有关微生物培养的说法，正确的是A．制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、消毒、倒平板B．分离能分解纤维素的细菌，要以纤维素作为培养基中唯一碳源C．配置培养不同微生物的培养基时都要将pH调至中性或微碱性D．在无氮培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌【答案】【知识点】L3微生物的培养与应用【答案解析】B解析：制备固体培养基的操作顺序应为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板；配置培养不同微生物的培养基时PH应有所不同；在以尿素为唯一尿源的培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌。【思路点拨】根据微生物培养分离的实验进行分析。【生物卷（解析）·届甘肃省兰州一中高三9月月考（09）】39、[生物——选修1：生物技术实验]（每空2分，共16分）植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将分解成。（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的。（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基：（注：“+”表示有，“－”表示无）据表判断，培养基甲（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是；培养基乙（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是。【答案】【知识点】L3微生物的培养与应用【答案解析】（1）纤维二糖葡萄糖（2）红色透明圈（3）不能液体培养基不能分离单菌落不能乙培养基中没有纤维素，不能形成CR纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定为纤维素分解菌解析：葡萄糖苷酶的作用是将纤维二糖分解成葡萄糖；CR可与纤维素形成红色复合物，纤维素被纤维素分解菌分解后不会与CR形成红色复合物，因而该菌落分布的位置为透明的；培养基甲中没有加琼脂，可知为液体培养基，液体培养基不能分离单菌落，不能用于分离和鉴别纤维素分解菌；培养基乙中没有纤维素，不能用于分离鉴别纤维素分解菌。【思路点拨】根据纤维素分解菌的培养与分离进行分析。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】47．（每空2分，共14分）某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起，圆褐固氮菌属于固氮细菌。请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤，并回答有关问题：⑴主要步骤：①制备两种培养基：一种是___________培养基，另一种___________的培养基。分别分成两份，依次标上A，A／的B，B／，备用。②分别向A、B培养基中接种___________。③接种后，放在恒温箱中培养3～4天。④分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种，接种到A／、B／培养基中。⑤接种后，把A／、B／培养基放入恒温箱中培养3～4天。⑵回答问题：在步骤①中，为保证无杂菌污染，实验中应采用的主要措施有、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。第④⑤两个步骤的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。【答案】【知识点】L3微生物的培养与应用【答案解析】（1）无氮加青霉素混合菌

（2）培养基高压蒸气灭菌接种环在酒精灯火焰上灭菌接种过程在酒精灯火焰附近进行获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌解析：（1）将微生物进行分离一般采用选择培养基。选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养基上生长繁殖，而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖。根据这一原理可将两种微生物分离开来。（2）在微生物培养过程中的灭菌措施有：培养基和培养皿的高压蒸气灭菌、金属用具的灼烧灭菌、接种过程在酒精灯火焰附近进行等。为获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌，可以用选择培养基重复进行选择培养。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】16．通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微牛物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10％酚可以抑制细菌和霉菌。利用下述方法不能从混杂的微生物群体中分别分离出（）A．大肠杆菌B．霉菌C．放线菌D．固氮细菌【答案】【知识点】L3微生物的培养与应用【答案解析】A解析：大肠杆菌需要氮源、青霉素抑制大肠杆菌生长、酚也抑制细菌的生长；霉菌是真菌，在培养基中加入青霉素后，青霉素可以抑制细菌和放线菌，但是不抑制真菌，所以加入青霉素的培养基可以选择出霉菌；培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌，所以可以筛选放线菌；固氮菌的氮源氮气，在培养基中不需要氮源，所以缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，但是固氮细菌可以生长。A符合题意。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】15．农田土壤的表层，自生固氮菌的含量比较多，将用表层土制成的稀泥浆，接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其它细菌分开，对培养的要求是（）①加抗生素②不加抗生素③加氮素④不加氮素⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦37℃恒温箱培养⑧28℃--A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．②④⑤⑧ D．①④⑥⑦【答案】【知识点】L3微生物的培养与应用【答案解析】C解析：自生固氮菌是异养菌，生长繁殖需要有机碳源；自生固氮菌能利用空气中的氮气，培养基中不加氮源，固氮菌能生长繁殖，不能固氮的菌不能生长繁殖，；自生固氮菌的生长繁殖的最适宜温度是28～30℃；自生固氮菌对青霉素敏感，培养基中不能加青霉素．所以如果从土壤浸出液中分离出自生固氮菌对培养基的要求是②不加抗生素、④不加氮素、⑤加葡萄糖、⑧28～30℃恒温箱中培养。C正确。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】13．能排除培养基是否有杂菌污染的方法是（）A.将未接种的培养基放在实验桌上培养 B.将未接种的培养基放在窗台上培养 C.将未接种的培养基放在恒温箱中培养D.将已接种的培养基放在恒温箱中培养【答案】【知识点】L3微生物的培养与应用【答案解析】C解析：实验桌旁本身就有许多微生物，没法判断培养基上的菌落是来自培养基本身还是来自培养环境，A错；窗台上周围含有微生物，无法判断培养基上的菌落是来自培养基本身还是来自培养环境，B错；将未接种的培养基放在恒温箱中培养，一段时间后若有菌落说明培养基被污染，若无菌落说明培养基没有被污染，C正确；培养基已经接种微生物，无法判断培养基上的菌落是来自培养基本身还是来接种的微生物，D错。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】11．下列叙述错误的是（）Ａ．培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素Ｂ．培养霉菌时需将培养基的PH调至碱性Ｃ．培养细菌时需将PH调至中性或微碱性Ｄ．培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件【答案】【知识点】L3微生物的培养与应用【答案解析】B解析：维生素是乳酸菌生长繁殖所必须的，在体内又不能合成，因此要在培养乳酸菌的培养基中添加维生素，A正确；霉菌生长所需要的PH是酸性，培养霉菌时应将PH调至酸性，在碱性情况下不易繁殖，甚至会导致霉菌死亡，培养霉菌时应将PH调至酸性，C错；细菌生长繁殖所需要的PH是中性或微碱性，所以培养细菌时需将PH调至中性或微碱性，C正确；厌氧微生物在有氧时无氧呼吸受抑制，因此培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件，D正确。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】10.涂布平板操作需要用到（）A.接种环、滴管、酒精灯 B.接种环、移液管、酒精灯C.涂布器、移液管、酒精灯D.涂布器、接种环、酒精灯【答案】【知识点】L3微生物的培养与应用【答案解析】C解析：涂布平板时，需要移液管将菌液进行一系列梯度的稀释；需要用酒精灯对涂布器进行灼烧灭菌；进行涂布时，需要用涂布器将菌液涂布均匀，该操作要在酒精灯的火焰旁进行。C正确。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】9．有关倒平板的操作错误的是（）Ａ．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置【答案】【知识点】L3微生物的培养与应用【答案解析】C解析：将过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，防止培养皿被污染，A正确；使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰，对锥形瓶的口径处进行灼烧灭菌，防止空气中的杂菌污染，B正确；倒平板时不能把培养皿盖完全打开并放到桌面上，这样会污染培养皿中的培养基，C错；倒平板后冷却需要倒过来放置，防止皿盖上的水珠滴落到培养基上，D正确。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】8.关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述错误的是【生物卷(解析)·届江苏省扬州中学高三10月质量检测（10）】32、（9分）固定化酶技术运用工业化生产前，需要获得酶的有关参数。如右图：曲线①表示某种酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比；曲线②是将该种酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到酶的热稳定性数据。请回答下列问题：（1）与普通酶制剂相比，固定化酶在生产中的优点是。（2）曲线②中，35℃和80℃的数据点是在℃时测得的。通过本实验，你对酶的最适温度的认识是。该种酶固定化后运用于生产，最佳温度范围是（3）研究发现有甲、乙两种物质能降低该种酶的催化效率，该酶催化的底物浓度变化会改变甲物质对酶的影响，而不会改变乙物质对酶的影响。下图是降低酶活性的两种机制模型，符合甲、乙物质对酶影响的模型分别是、。（4）在酶的活性不受抑制时，起始反应速率与底物浓度的关系如下图所示。请在答题卡的指定位置画出加入甲物质时，起始反应速率与底物浓度之间的关系曲线。【答案】【知识点】L4酶的应用【答案解析】（1）可反复使用（2）80

既能使酶具有高的催化活性，又能维持较长时间

60～70℃（3）A

B（4）曲线如下图（1）与普通酶制剂相比，固定化酶的优点是：可以反复使用。（2）由于曲线②是将该种酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，而酶的最适温度为80℃，因此曲线中数据均为80℃下的数据；结合曲线②可知，酶的最适温度可以认为是既能使酶具有高的催化活性，又能维持较长时间的温度；该酶的最适温度范围是60～70（3）观察两个模型可知，图A中抑制剂和底物都可以和酶结合，因此底物浓度的变化，可以影响酶的催化效率；图B中抑制剂与酶结合后，酶的结构发生改变，不能和底物结合，因此底物浓度升高，也不能影响酶的催化效率。故甲乙分别对应图A和图B中模型。（4）根据甲模型，加入抑制剂甲后，起始反应速率变小，但是随着底物浓度的增加，起始反应速率加快，但不能超过不加抑制剂时的起始反应速率。A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C.待培养基冷却至50℃D.待平板冷却凝固约5∽10min后将平板倒过来放置【答案】【知识点】L3微生物的培养与应用【答案解析】A解析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，A错；将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，B正确；待培养基冷却至50℃【思路点拨】用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分为制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段进行，其中制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板．微生物接种的核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】7.细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽灭菌、酒精消毒、火焰灼烧灭菌的几种不同的处理，这些方法可依次用于杀死哪些部位的杂菌（

）A.接种环、手、培养基

B.高压锅、手、接种环C.培养基、手、接种环

D.接种环、培养基、手【答案】【知识点】L3微生物的培养与应用【答案解析】C解析：高压蒸汽气灭菌通常用于培养基的灭菌；用酒精擦拭双手是消毒的一种方法；火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环、接种环等金属用具。C正确。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】6．细菌培养基通常在121℃压力锅中灭菌。如果只有在100A．大肠杆菌 B．一种青霉菌C．枯草芽孢杆菌 D．鼠伤寒沙门氏菌【答案】【知识点】L3微生物的培养与应用【答案解析】C解析：芽孢杆菌能形成芽孢（内生孢子），对外界有害因子的抵抗力强，大肠杆菌、青霉菌、鼠伤寒沙门氏菌不能形成芽孢，在100℃的温度下可以灭活；枯草芽孢杆菌能形成芽孢，抵抗高温的能力强，在100【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】5．下列有关平板划线接种法的操作错误的是（）A．将接种环放在火焰上灼烧B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连【答案】【知识点】L3微生物的培养与应用【答案解析】D解析：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他的金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，A正确；接种环必须冷却后，才可以伸入菌液中蘸取一环液，否则会烧伤或烧死微生物，B正确；蘸取菌液和划线要在火焰旁进行，防止空气中的杂菌，C正确；划线时要避免最后一区的划线与第一区线连．因为最后一区是细菌最稀少的，而第一区是细菌最致密的，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果，D错。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】3.发酵工程的第一个重要工作是选种优良的单一纯种。消灭杂菌，获得纯种的方法不包括（）A．根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基B．根据微生物缺乏生长因子的种类，在培养基中增减不同的生长因子C．根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸D．根据微生物对抗菌素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗菌素【答案】【知识点】L3微生物的培养与应用【答案解析】C解析：根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基可以选择微生物种类，能获得纯种，所以A正确；在培养基中增减不同的生长因子作用也是选择微生物，所以B正确；抗生素也可对生物起选择作用，抗生素杀菌，但对真核生物无效果，所以D正确；根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸，核酸就是DNA和RNA，它不会直接影响到微生物自身的遗传组成，即使被微生物利用，也是被分解为核苷酸后利用，所以培养基中加入不同比例的核酸（DNA、RNA），不会对微生物起选择作用，

C错误。L4酶的应用【生物卷（解析）·届江苏省盐城中学高三10月月考（10）】19.在DNA的粗提取和鉴定实验中，以下操作步骤错误的是A．将鸡血细胞置于蒸馏水中并用玻棒快速搅拌释放出DNA等核物质B．在DNA析出和再溶解过程中要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C．在用酒精析出DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却D．鉴定DNA时，需要将甲基绿试剂加入到含DNA溶液中并进行水浴加热【答案】【知识点】L5DNA的粗提取及蛋白质提取技术【答案解析】DL5DNA的粗提取及蛋白质提取技术L6植物有效成分的提取【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】46.（每空1分，共1０分）降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：（1）Klenow酶是一种________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。（2）获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它___________,___________,_________________________。②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是___________________________。③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有_______________。（3）经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是__________________________________________________________。（4）上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是____________________。【答案】【知识点】L7基因工程与蛋白质工程【答案解析】(1)DNA聚合酶126(2)①繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少②保证目的基因和载体定向连接(或防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接)③标记基因(3)合成的核苷酸单链仍较长，产生缺失碱基的现象(4)蛋白质工程解析：本题从预期蛋白质功能出发，通过改造基因，合成所需蛋白质，所以应用的现代生物工程技术为蛋白质工程。(1)由题干可知，由单链DNA合成双链DNA需要酶，相当于DNA复制，所以Klenow酶是一种DNA聚合酶，合成双链DNA碱基对数为(72－18)＋72＝126。(2)选用原核生物作为受体细胞是因为其为单细胞，繁殖快，遗传物质相对较少。用两种酶切割目的基因是为了防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接。(3)最初重组质粒未发现完全正确的基因序列，可能是合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】38．在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（）A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C．将重组DNA分子导入烟草原生质体D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞【答案】【知识点】L7基因工程与蛋白质工程【答案解析】A解析：限制性核酸内切酶只能切割特定的脱氧核苷酸序列，而烟草花叶病毒的核酸是核糖核苷酸，A错；构建基因表达载体时，需要用限制酶切割得到抗除草剂基因和切开载体，再用DNA连接酶将两者连接形成重组DNA，B正确；基因表达载体构建好之后，需要将重组DNA分子导入受体细胞（烟草原生质体），C正确；基因工程的最后一步是目的基因的检测和鉴定，可以用含有除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞，D正确。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】37．下列叙述符合基因工程概念的是（）A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上【答案】【知识点】L7基因工程与蛋白质工程【答案解析】B解析：B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，这属于细胞工程的范畴，A错；将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，符合基因工程概念，B正确；用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株，属于诱变育种，不符合基因工程概念，C错；基因工程是按照人们的意愿，对生物进行的定向改造，而自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上不符合基因工程的概念，D错。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】21.有关基因工程的叙述正确的是（）A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成在细胞内完成C.质粒都可作运载体D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料【答案】【知识点】L7基因工程与蛋白质工程【答案解析】D解析：基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。限制性内切酶在获得目的基因和基因表达载体的构建时都要用到；重组质粒的形成在细胞外完成的；质粒有的可作运载体，天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。所以A、B、C不正确。蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料，通过逆转录人式合成目的基因，故D正确。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】20．人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是()A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性B.有利于对目的基因是否导入进行检测C.增加质粒分子的分子量D.便于与外源基因连接【答案】【知识点】L7基因工程与蛋白质工程【答案解析】B解析：抗性基因的作用是帅选重组子，A错；抗性基因是标记基因，有利于对目的基因是否导入进行检测，B正确；细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因，其作用不是增加质粒分子的分子量，C错；质粒上含有限制酶切割位点时，便于与外源基因连接，D错。L7基因工程与蛋白质工程【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】49.（每空1分,共11分）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。据图回答下列问题：（1）过程=1\*GB3①所需的酶是。（2）过程=2\*GB3②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是。原生质体经过再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和植株的根尖，通过、、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。（5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1—4中一定是杂种植株的有，，。（6）对杂种植株进行接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。【答案】【知识点】L8植物细胞工程与植物的组织培养技术【答案解析】（1）纤维素酶和果胶酶（2）叶绿体（3）保持原生质体完整性（4）双亲（或花椰菜和黑芥）

解离

漂洗（5）1、2、4（6）黑腐病菌解析：（1）①表示去除植物细胞壁获得原生质体的过程，需要用纤维素酶和果胶酶处理细胞。（2）由于要培养的是抗黑腐病的花椰菜，所以需要供体含有黑腐病抗性基因，供体是由光照培养的黑芥苗提供的，所以供体一定含有叶绿体。（3）原生质体培养液中加入甘露醇可以保持一定的渗透压，防止原生质体吸水涨破，这样可以保持原生质体的完整性。（4）要分析再生植株染色体变异类型，需要观察再生植株与双亲的染色体差异，观察染色体需要经过解离、漂洗、染色和制片几个过程。（5）再生植株1、2、4同时含有花椰菜和黑芥的基因组，所以一定是杂种植株，而植株3只含黑芥的基因组，所以其一定不是杂种植株。（6）黑腐病菌的抗性基因进入到杂种植物体内，杂种植株能抗黑腐病，所以对杂种植株进行黑腐病菌接种实验，是筛选杂种植株的方法。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】44.为获得纯和高蔓抗病番茄植株，采用了下图所示的方法：图中两对相对性状独立遗传。据图分析，不正确的是()A、过程①的自交代数越多，纯合高蔓抗病植株的比例越高B、过程②可以任取一植株的适宜花药作培养材料C、过程③包括脱分化和再分化两个过程D、图中筛选过程不改变抗病基因频率【答案】【知识点】G4杂交育种与诱变育种L8植物细胞工程与植物的组织培养技术【答案解析】D解析：①表示连续自交过程，这样可以提高高蔓抗病植株的纯合度，A正确；由于F1植株的基因型都相同，所以过程②可以任取一植株的适宜花药作培养材料，B正确；③是植物组织培养获得转基因植株的过程，包括脱分化和再分化过程两个阶段，C正确；筛选纯合高蔓抗病植株的过程实质就是定向改变基因频率的过程，即使抗病基因频率升高，D错。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】41.在细胞工程中，需要利用细胞的全能性，下列细胞中全能性最高的是（）A.胡萝卜的韧皮部B.水稻的花粉C.绵羊的乳腺D.大白鼠的受精卵【答案】【知识点】L8植物细胞工程与植物的组织培养技术【答案解析】D解析：细胞的全能性最高的是受精卵细胞，其次是生殖细胞，最差的是体细胞．胡萝卜韧皮部细胞属于体细胞，水稻的花粉细胞属于生殖细胞，大白鼠的受精卵全能性高于生殖细胞和胡萝卜韧皮部细胞．绵羊的乳腺细胞全能性受到限制。D正确。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】40.下列属于植物细胞工程实际应用的是：（）①制造人工种子②培育抗盐植物③制作“生物导弹”④培育单倍体⑤生产脱毒植株A.①②③④B.①③④⑤C.①②④⑤D.②③④⑤【答案】【知识点】L8植物细胞工程与植物的组织培养技术【答案解析】C解析：通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，故①正确；利用基因工程获得含抗盐基因的重组细胞，经过植物组织培养获得抗盐植物，故②正确；“生物导弹”由单克隆抗体和放射性同位素、化学药物或细胞毒素组成，涉及的技术是动物细胞融合和动物细胞培养，故③错误；利用花粉离体培养技术培育单倍体幼苗，故④正确；利用分生区（如茎尖）细胞进行组织培养，形成脱毒苗，故⑤正确。【思路点拨】植物细胞工程技术的应用：（1）植物繁殖的新途径：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子；（2）作物新品种的培育：培育单倍体、突变体的利用；（3）细胞产物的工厂化生产。培育抗盐植物是基因工程的应用；制作“生物导弹”是动物细胞工程的应用。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】39．在下列选项中，没有采用植物组织培养技术的是（）A．利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到多倍体植株B．利用花药离体培养得到单倍体植株C．利用基因工程培育抗寒的番茄植株D．利用细胞工程培育“番茄—马铃薯”杂种植株【答案】【知识点】L8植物细胞工程与植物的组织培养技术【答案解析】A解析：利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到多倍体植株，原理是染色体变异，A正确；花药离体培养得到单倍体，由配子发育形成个体，体现植物细胞的全能性，B错误；通过基因工程的方法获取含抗寒基因的重组细胞，经过植物组织培养获得抗寒的番茄植株，C错误；植物体细胞杂交形成“番茄-马铃薯”杂种细胞，经过植物组织培养形成杂种植株，故D错。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】30.以下四种生物工程技术中培育出的新个体，只有一个亲本遗传性状的是()A．植物组织培养B．细胞融合C．动物胚胎移植D．细胞核移植【答案】【知识点】L8植物细胞工程与植物的组织培养技术【答案解析】A解析：植物组织培养是高度分化的植物细胞、组织、器官离体培养技术，是无性生殖，A正确；细胞融合含有两细胞的全部遗传物质，B错误；动物胚胎移植中的胚胎是由精子和卵细胞结合成发育而成的，经动物胚胎移植培育出的新个体的遗传物质来自于两个亲本，C错误；经细胞核移植形成的重组细胞，细胞核是来自于供体细胞，细胞质来自于受体细胞，重组细胞中的遗传物质来自于两个亲本，所以培育培育出的新个体具有两个亲本的遗传性状，D错误。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】28.在植物组织培养过程中，愈伤组织的形成和形态发生是十分关键的一步。而这除需要必备的营养和一些刺激因素外，还需要有起诱导作用的物质，它是()A．铜、锌等微量元素B．细胞分裂素和生长素C．蔗糖和葡萄糖D．维生素和氨基酸【答案】【知识点】L8植物细胞工程与植物的组织培养技术【答案解析】B解析：在植物组织培养时，通过调节生长素和细胞分裂素的比值能影响愈伤组织分化出根或芽。生长素用量与细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长。B正确。【生物卷（解析）·届陕西省西安一中高三上学期二模考试（10）】25．图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。下列分析中正确的是A.若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，能产生2个黏性末端B.若单纯为了获取目的基因，也可以选择限制酶MspⅠC.若需将目的基因D导入图2中的质粒，应选择的限制酶是BamHⅠD.为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，培养基上需添加抗生素A和抗生素B【答案】【知识点】L7基因工程与蛋白质工程【答案解析】C解析：限制酶SmaⅠ的识别序列为CCC↓GGG，用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，能产生2个平末端，而不是黏性末端，A错；限制酶MspⅠ的识别序列是C↓CGG，在目的基因上，用该限制酶切割目的基因会破坏末端基因，所以为了获取目的基因，不能选择限制酶MspⅠ，而应选择限制酶BamHⅠ，B错；限制酶MspⅠ和SmaⅠ切割会破坏目的基因，用限制酶MboⅠ切割会将质粒上的两个标记基因都破坏，但在目的基因两侧和质粒上都含有限制酶BamHⅠ的识别序列，所以将目的基因D导入图2中的质粒，应选择的限制酶是BamHⅠ，C正确；用限制酶BamHⅠ切割破坏了抗生素A抗性基因，但没有破环抗生素B抗性基因，因此含有重组质粒的大肠杆菌能抗抗生素B，但不能抗抗生素A，所以为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，培养基上需分别添加抗生素B和抗生素A，D错。L8植物细胞工程与植物的组织培养技术【生物卷（解析）·届江苏省盐城中学高三10月月考（10）】25．下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述正确的是A．图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原B．利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法均可诱导细胞融合获得乙C．用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能增殖，未融合细胞均不能增殖D．丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁【答案】【知识点】L9动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】ABD解析：乙细胞中两两融合的有三种：B淋巴细胞与B淋巴融合的细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞的融合，杂交瘤细胞，其中B淋巴细胞与B淋巴融合的细胞不能增殖，未融合细胞有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，其中骨髓瘤细胞能增殖。【思路点拨】根据单克隆抗体的制备原理及过程分析，了解相关细胞的特点。第=2\*ROMANII卷非选择题(共65分)三．非选择题：本部分包括7小题，共65分。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】48．（每空1分，共10分）克隆猪成功率较低，与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR技术可以检测该基因转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。请回答：（1）图中重组细胞的细胞核来自细胞，早期胚胎移入受体子宫后继续发育，经桑椹胚、囊胚和胚最终发育为克隆猪。（2）在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2cDNA的分子数，进而计算总mRNA中Bcl-2mRNA的分子数，从而反映出Bcl-2基因的转录水平。①图中X表示过程。②从基因组数据库中查询Bcl-2mRNA的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成用于PCR扩增，PCR扩增过程第一轮循环的模板是③在PCR过程中利用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿技术可检测出cDNA中Bcl-2cDNA的分子数。(３)该过程所涉及的现代生物技术有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。（４）目前使用的供体细胞一般都选择传代10代以内的细胞，原因是；＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿【答案】【知识点】L7基因工程与蛋白质工程L9动物细胞工程与单克隆抗体L10胚胎工程【答案解析】（1）体

原肠

（2）①反转录

②引物

Bcl-2cDNA（3）动物细胞培养、核移植技术、早期胚胎培养、胚胎移植（4）10代以内的细胞保持正常的二倍体核型解析：（1）图中卵母细胞是受体细胞，良种猪的体细胞是供体细胞提供细胞核，形成重组细胞；早期胚胎发育经过桑椹胚、囊胚和原肠胚，最终形成克隆猪。（2）①mRNA→cDNA的过程表示反转录过程。②PCR技术获取目的基因的前提是已知Bcl-2基因或者Bcl-2mRNA的核苷酸，以便合成引物；条件包括模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶，根据题中流程图，第一轮循环的模板式cDNA。（3）据图分析，涉及的现代生物技术有动物细胞培养、核移植技术、早期胚胎培养、胚胎移植。（4）供体细胞一般都选择传代10代以内的细胞，原因是传代10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，10代之后，细胞发生遗传物质改变的概率增加，到50代后，细胞发生突变形成的癌细胞。物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】45.下列关于细胞工程的叙述，错误的是()A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体D.某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同【答案】【知识点】L8植物细胞工程与植物的组织培养技术L9动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】D解析：电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合，体现细胞膜的流动性，A正确；纤维素酶或者果胶酶去除植物细胞的细胞壁，用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶处理，将动物组织分散成单个细胞，B正确；小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合形成的杂交瘤细胞，即能无限繁殖，又能产生特异性抗体，C正确；甲染色体数目2M，乙为2N，体细胞杂种染色体数目为2M+2N，甲乙两品种杂交后代的染色体数目为M+N，故D错【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】43.细胞工程技术是一门综合科学技术，下列哪项技术不属于细胞工程？（）A.有性杂交B.体细胞杂交C.组织培养D.细胞核移植【答案】【知识点】L9动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】A解析：有性杂交是利用基因重组的原理进行的杂家育种的方法，不属于细胞工程技术，A正确；体细胞杂交属于植物细胞工程中的技术，B错；组织培养也属于植物细胞工程中的技术，C错；细胞核移植属于动物细胞工程中的技术手段，D错。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】29.动物细胞培养的特点是()①细胞贴壁②有丝分裂③分散生长④接触抑制⑤减数分裂⑥原代培养一般传代1～10代A．①②④⑥B．②③④⑤C．①③④⑥D．③④⑤⑥【答案】【知识点】L9动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】A解析：动物细胞培养过程是有丝分裂、细胞增殖过程，存在贴壁生长、接触抑制的特点。原代培养到10代左右，再传代培养，所以A选项正确。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】27.下列过程中，没有发生膜融合的是()A．植物体细胞杂交B．受精过程C．氧进入细胞中的线粒体D．效应B细胞产生抗体【答案】【知识点】L9动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】C解析：植物体细胞杂交两种原生质体融合，体现了细胞膜等膜的融合，A不符合题意；有性杂交的精子与卵细胞融合形成受精卵，体现细胞膜的流动性，B不符合题意；氧进入到线粒体内只是物质出入生物膜的物质运输过程，没有发生膜融合，C符合题意；效应B细胞合成和分泌抗体的过程，是以出芽方式形成具膜小泡移到另一膜上，与该膜融合后成为该膜的一部分，D不符合题意。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】26.科学家用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，所用的B淋巴细胞是来自()A．骨髓的B淋巴细胞B．脾脏的能产生抗体的B淋巴细胞C．胸腺的B淋巴细胞D．脾脏经过筛选的，能产生单一抗体的B淋巴细胞【答案】【知识点】L9动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】B解析：杂交瘤细胞培养需要的B细胞是经过免疫的能产生抗体的效应B淋巴细胞，B正确。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】25.关于动物细胞培养的错误叙述是()A．用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B．将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞C．在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D．动物细胞培养只能传50代左右。所培育的细胞会衰老死亡【答案】【知识点】L9动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】D解析：胚胎或幼龄动物的器官或组织细胞增殖能力强，故A正确。先用胰蛋白酶分解动物细胞直接蛋白质，使之分散容易培养，故B正确。在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液继续培养，否则细胞会因为接触抑制停止增殖，故C正确；动物细胞培养只能传50代左右，部分细胞可能会出现变异变成不死性细胞，D错。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】24.离体的植物组织或细胞在适当培养条件下发育成完整的植株，离体动物体细胞却没有发育成动物的成熟个体，原因是()A．动物细胞内没有成套的遗传物质B．动物细胞的全能性随分化程度提高而受到限制，分化潜能变弱C．动物细胞的细胞核太小D．动物细胞的全能性低于植物细胞【答案】【知识点】L9动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】B解析：动物细胞的全能性随分化而受限变弱，只能通过核移植实现克隆动物的目的；动物体细胞克隆：将供体体细胞核与受体去核卵细胞的细胞质进行人工组合，借助于卵细胞的发育能力，经培养发育成胚胎进而形成个体的技术。B正确。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】23.一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件()①无毒的环境②无菌的环境③合成培养基需加血浆④温度与动物体温相近⑤需要02，不需要C02⑥C02能调培养液pHA．①②③④⑤⑥B．①②③④C．①③④⑤⑥D．①②③④⑥【答案】【知识点】L9动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】D解析：动物细胞培养需要无毒环境，故①正确；动物细胞培养需要无菌环境，故②正确；用于动物细胞培养的合成培养基需加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．故③正确；动物细胞培养需要适宜的温度和PH，其中温度要与动物体温相近，故④正确；动物细胞培养需要一定的气体环境，95%空气和5%的CO2，故⑤错误；5%的CO2能调培养液pH，故⑥正确。【典型总结】动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物；（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质；（3）温度和PH；（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】22．下列关于各种酶作用的叙述，不正确的是()A．DNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接B．RNA聚合酶能与基因的特定位点结合，催化遗传信息的转录C．一种DNA限制酶能识别多种核苷酸序列，切割出多种目的基因D．胰蛋白酶能作用于离体的动物组织，使其分散成单个细胞【答案】【知识点】L7基因工程与蛋白质工程L9动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】C解析：DNA连接酶能使双链DNA片段的不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接，A正确；RNA聚合酶能与基因的特定位点结合，催化遗传信息转录成信使RNA，B正确；一种DNA限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并从特定部位切开，C错；胰蛋白酶能分解细胞间的物质，使其分散成单个细胞，D正确。L9动物细胞工程与单克隆抗体【生物卷(解析)·届江苏省扬州中学高三10月质量检测（10）】33、人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取。由于艾滋病病毒(HIV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。大致过程如下：a．将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛胚胎细胞，形成重组细胞①；b．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②；c．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎；d．将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。请回答下列问题：（1）重组细胞①和②中________(①/②)实现了基因的重组。（2）在实验过程a中要选择“雌性奶牛胚胎”的原因是_____________________________。（3）实验过程b利用的技术是________，胚胎工程操作中最后环节是________。（4）若将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞，让其分别发育成小牛，这些小牛的基因型________(相同/不同)，理由是________，此项技术称为________。（5）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞(ES细胞)，培养如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞。在培养过程中，必须用________处理内细胞团，使之分散成单个细胞。（6）哺乳动物的胚胎的营养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及________等物质。【答案】【知识点】L10胚胎工程【答案解析】(1)①(2)雌性转基因牛进入泌乳期后，可以从其乳汁中获得血清白蛋白(3)核移植胚胎移植(4)相同它们来自同一个受精卵胚胎分割(5)胰蛋白酶(6)动物血清（1）重组细胞①实现了基因的重组。（2）选择雌性奶牛胚胎的是因为雌性转基因牛进入泌乳期后，可以从其乳汁中获得血清白蛋白。（3）过程b利用了细胞核移植的技术，胚胎移植是胚胎工程操作中的最后环节，该环节能否成功，与供体和受体的生理状态有关．（4）早期胚胎分离成的若干胚胎细胞发育成的小牛基因型是相同的，因为这些胚胎干细胞都是同一个受精卵经过有丝分裂得到的，此项技术称为胚胎分割．在对囊胚阶段的胚胎进行操作时，需要特别注意的问题是将内细胞均等分割，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育．（5）从早期胚胎中获取胚胎干细胞后，必须用胰蛋白酶处理内细胞团，使之分散成单个细胞．将ES细胞培养在饲养层细胞上或添加抑制因子的培养液中，能够维持ES细胞不分化的状态．在培养液中加入分化诱导因子（或牛磺酸、丁酰环腺苷酸等），可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化．（6）哺乳动物的胚胎的营养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及血清等物质．【典型总结】根据题意和图示分析可知：a过程是基因工程，b过程是细胞核移植；d过程是胚胎移植．图示为乳腺生物反应器的培育过程，首先构建基因表达载体，即将血清白蛋白基因与质粒连接形成重组质粒，其次将目的基因导入雌性奶牛胚胎细胞中形成重组细胞①；利用核移植技术将胚胎细胞核移植到去核卵细胞，形成重组细胞②；进行早期胚胎培养和胚胎移植，最终得到转基因克隆牛．该过程使用到了基因工程、细胞工程、胚胎工程．【生物卷（解析）·届江苏省盐城中学高三10月月考（10）】20.下列有关胚胎工程及其应用的叙述中，错误的是A．体外受精和胚胎发育的研究为胚胎工程提供了理论基础B．胚胎移植技术可在畜牧业生产中加速育种进程C．桑葚胚、囊胚是进行胚胎分割的最佳时期D．促进动物超数排卵的激素主要是垂体产生的促性腺激素【答案】【知识点】L10胚胎工程【答案解析】A解析：体内受精和胚胎发育的研究为胚胎工程提供了理论基础【思路点拨】注意体内受精与体外受精的不同。二、多选题：本部分包括5题，每题3分，共计15分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】42.胚胎干细胞是从时期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。它在基础生物学、畜牧学和医学上都具有十分重要的应用价值。下列关于其说法不正确的是（）A.用于治疗人类的某些顽症B.可用于培育人造组织器官C.是研究体外分化的理想材料D.可利用它通过有性生殖繁殖后代【答案】【知识点】L10胚胎工程【答案解析】D解析：可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、糖尿病、老年痴呆症、肝衰竭、心衰竭、成骨不良，A正确；培育各种组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题，B正确；ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态；在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段，C正确；胚胎干细胞属于体细胞，利用它繁育后代的过程应属无性生殖，D错。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】35．老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的β一淀粉样蛋白体，它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降．某些基因的突变会导致β一淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是（）A．胚胎移植技术B．胚胎干细胞技术c．单克隆抗体技术D．基因治疗技术【答案】【知识点】L10胚胎工程【答案解析】A解析：胚胎移植是为了获得优良个体，不能用于治疗疾病，A错误；胚胎干细胞技术能提供和修复受损伤的神经元，B正确；单克隆抗体技术能降低β淀粉样蛋白体的含量，定向改善免疫能力，C正确；基因治疗技术能导入正常的基因，治疗老年痴呆症，D正确。【生物卷（解析）·届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（10）】34．下列关于利用胚胎工程技术繁殖优质奶羊的叙述．错误的是（）A．对受体母羊与供体母羊进行同期发情处理B．人工授精后的一定时间内，收集供体原肠胚用于胚胎分割C．利用胚胎分剖技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎D．一次给受体母羊植入多个胚胎．可增加双胞胎和多胞胎的比例【答案】【知识点】L10胚胎工程【答案解析】B解析：在进行胚胎移植时需要对受体母羊与供体母羊进行同期发情处理，使它们属于相同的生理状态，A正确；胚胎分割应该取形态正