山东省烟台市莱州市一中2025届高三第六次模拟考试生物试卷含解析

山东省烟台市莱州市一中2025届高三第六次模拟考试生物试卷注意事项1．考生要认真填写考场号和座位序号。2．试题所有答案必须填涂或书写在答题卡上，在试卷上作答无效。第一部分必须用2B铅笔作答；第二部分必须用黑色字迹的签字笔作答。3．考试结束后，考生须将试卷和答题卡放在桌面上，待监考员收回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下列有关细胞的组成成分、结构和功能的叙述，正确的是（）A．生物膜系统是由细胞膜和各种细胞器膜共同组成的B．物质通过核孔和细胞膜时均体现了选择透过性，且都需要载体蛋白协助C．某人的胰岛A细胞和胰岛B细胞中的核基因是相同的，但合成的蛋白质有所不同D．各种生物的红细胞都不含细胞器和细胞核，所含的血红蛋白可以运输氧气2．下列为某家族ABO血型与某遗传疾病的遗传系谱图，其中有些家庭成员的血型已经清楚（见图中标注）。已知该地区人群中IA基因频率为1．1，IB基因频率为1．1，i基因频率为1．8；人群中该遗传病的发病率为1/11111。已知控制血型与疾病的基因是独立遗传的。下列叙述正确的是（）A．该遗传病为伴X染色体隐性遗传病B．9号为该病男患者的概率为1/313C．3号与4号再生一个O型孩子的概率为9/21D．5号与B型血男性生一个O型血儿子的概率为1/173．如图为神经调节中两个重要的结构模式图，下列选项中错误的是（）A．甲图中③内的物质为神经递质，它可以和⑥上的特异性受体结合B．图甲为图乙中结构c的局部放大图像C．图乙中b受损的情况下，刺激a仍有感觉，但是肌肉不能收缩D．图乙中的X所示神经纤维为传入神经4．研究发现，活跃分裂的动物细胞多是二倍体细胞，多倍体细胞通常不能分裂。科研人员对比不同动物心脏中二倍体细胞所占比例以及甲状腺激素水平，结果如下图所示。相关分析正确的是（）A．需抽取不同动物的血液，以测定其甲状腺激素的浓度B．需通过盐酸解离获得单个心肌细胞，以观察细胞内的染色体数目C．恒温动物心脏组织因二倍体细胞比例低，分裂能力较强D．甲状腺激素水平与心肌细胞分裂能力呈正相关5．下列关于内环境的叙述，正确的是（）A．人体的内环境与外界环境之间保持物质和能量的动态平衡B．单细胞生物直接与外界环境进行物质交换，多细胞生物只能通过内环境与外界环境进行物质交换C．线粒体内需要消耗大量的氧气，所以在线粒体中氧气浓度高于细胞溶胶D．内环境稳态的维持主要靠神经-体液-免疫调节6．下列数据是人体部分器官中所表达基因的估计数，有关叙述中不科学的是（）器官或细胞

所表达基因的估计数

眼

1932

唾液腺

186

皮肤

3043

甲状腺

2381

血细胞

23505

心脏

9400

A．人体各器官表达的基因数目有差异是细胞内基因选择性表达形成的B．血细胞所表达的基因数目最多说明其遗传物质相对含量较高C．人体各器官基因表达数目有差异说明细胞中所含蛋白质有差异D．不同功能的细胞表达的基因不相同，这是与其不同功能相适应的二、综合题：本大题共4小题7．（9分）因含N、P元素的污染物大量流入，我国某大型水库曾连续爆发“水华”。为防治“水华”，在控制上游污染源的同时，研究人员依据生态学原理尝试在水库中投放以藻类和浮游动物为食的鲢鱼和鳙鱼，对该水库生态系统进行修复，取得了明显效果。（1）在该水库生态系统营养结构中，引起“水华”的藻类属于_________。（2）研究人员调查投放区鲢、鳙的捕食对象的生物积累量（在本题中指单位面积中生物的总量，以t·hm-2表示）以便确定鲢、鳙的投放量，他们依据的生态学原理是____________。（3）藻类吸收利用水体中的N、P元素，浮游动物以藻类为食，银鱼主要以浮游动物为食，由图可知，将鲢、鳙鱼苗以一定比例投放到该水库后，造成银鱼生物积累量下降，引起该变化的原因是______。（4）鲢鱼和鳙鱼是人们日常食用的鱼类。为增加渔业产量，除了定期合理投放鲢、鳙，还要定期适度捕捞鲢、鳙。请依据种群增长的规律说明“定期适度”是指____________。8．（10分）研究证实ATP既是“能量通货”，也可作为神经细胞间信息传递中的一种信号分子，其作为信号分子的作用机理如下图所示。请分析回答：（1）神经细胞中的ATP主要来自细胞呼吸，其结构简式是___________。正常成年人安静状态下24小时有40kgATP发生转化，而细胞内ADP、ATP的浓度仅为2～10mmol/L，为满足能量需要，人体解决这一矛盾的合理途径是__________。（2）由图可知，细胞间隙中的ATP在有关酶的作用下，磷酸基团逐个脱离下来。最后剩下的是___________。（3）一些神经细胞不仅能释放典型神经递质，还能释放ATP，两者均能引起受体细胞的膜电位变化。据图分析，科学家当初推测“ATP可作为神经细胞间传递信息的信号分子”的实验思路是：①科学家用化学物质阻断__________后，发现靶细胞膜能接受到部分神经信号；②科学家寻找到靶细胞膜上有ATP的____________。（4）为了研究X物质对动物细胞的影响，某研究小组用不同浓度的X物质将细胞处理24小时。然后测量各组细胞内ATP的浓度和细胞死亡的百分率，经过多次实验，所得数据如下表所示：实验编号X物质浓度（ng•mL-1）细胞内ATP浓度（nmoL•mL-1）细胞死亡百分率A0801B2703C45010D82025E16570①实验的因变量是____________。②实验数据表明，该实验因变量之间的联系是____________。③若用混有浓度为2ng•mL-1的X物质的饲料饲喂大鼠，其小肠的消化和吸收功能受到抑制的主要原因是：阻碍消化酶的_______，影响消化；妨碍______，影响营养物质的吸收。9．（10分）干扰素是动物体内的一种蛋白质，可用于治疗病毒的感染和癌症。长期以来，人们利用相关病毒诱导白细胞产生干扰素再从血液中提取，但每升血只能提取0.05μg。1982年，我国科学家通过基因工程等技术开发研制出我国首个基因工程药物——重组人干扰素。回答下列相关问题。（1）相对于从基因组文库中获取干扰素基因，从已病毒免疫的白细胞中提取mRNA，再反转录并构建的cDNA文库中获取的干扰素基因，更易在大肠杆菌中合成正常干扰素。从基因表达的角度分析，其原因是_____。（2）天然的干扰素很难在体外保存，但通过蛋白质工程可得到“可保存的干扰素”。蛋白质工程以_____和_____的关系为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质。（3）在构建该基因表达载体时，需同时用限制酶HindⅢ和BstⅠ处理目的基因和质粒，主要目的是_____。（4）质粒中LacZ基因编码的半乳糖苷酶，能催化生成蓝色物质从而将细菌染成蓝色。在含有四环素的培养基中，未被转化的大肠杆菌的生长现象是_____，含有质粒载体的大肠杆菌的生长现象是_____，含有重组质粒的大肠杆菌的生长现象是_____，从而获得所需重组细胞。（注：若能正常生长需要写出菌落特征）（5）转基因细菌产生的干扰素可能会成为某些人的过敏原，存在潜在风险。有科学家将干扰素基因转入小鼠基因组，获得膀胱生物反应器，最终在尿液中获得干扰素。在该操作中，应使干扰素基因在_____细胞中特异性表达。10．（10分）“滔滔”是我国第一例转入人体白蛋白基因的转基因试管牛，人们利用该转基因奶牛的乳汁能生产人类血清白蛋白。（1）试管动物实际上是体外受精与胚胎移植两项技术的综合运用。体外受精前需要把奶牛的精子放入__________中，进行__________处理。防止多精入卵的生理反应包括透明带反应和__________。胚胎工程的终端环节是胚胎移植。移植后的胚胎能在受体子宫内存活的生理基础是____________________。（2）基因工程的核心步骤是__________，一般利用显微注射技术导入牛的受精卵中，当受精卵分裂到囊胚期时，需要取囊胚的滋养层细胞进行__________鉴定，以确保发育成熟的牛能分泌乳汁并获取人类血清白蛋白。（3）为了提高胚胎的利用率，同时获取更多的人类血清白蛋白，在胚胎移植前可进行__________，操作时应注意将内细胞团均等分割，有利于__________。11．（15分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、C【解析】

细胞膜的主要组成成分是蛋白质和磷脂，细胞的细胞膜、细胞器膜、核膜构成生物膜系统；生物膜具有选择性，核膜上的核孔可实现核质之间频繁的物质交换和信息交流，在物质交换上也具有选择性。同一生物个体的所有体细胞的细胞核中所含的遗传物质相同，但由于基因的选择性表达，各细胞所含的mRNA和蛋白质不一定相同。【详解】A、细胞膜、细胞器膜及核膜，共同组成了细胞的生物膜系统，A错误；B、物质通过核孔和细胞膜时均体现了选择透过性，前者不需要载体蛋白协助，B错误；C、某人的胰岛A细胞和胰岛B细胞中的核基因是相同的，但由于基因的选择性表达，合成的蛋白质有所不同，C正确；D、哺乳动物成熟的红细胞不含细胞器和细胞核，所含的血红蛋白可以运输氧气，D错误。故选C。2、D【解析】

分析系谱图：1号和2号均正常，但他们有一个患该遗传病的女儿，即“无中生有为隐性，隐性看女病，女病男正非伴性”，说明该病为常染色体隐性遗传病（相应的基因用E、e表示），据此答题。【详解】A、据分析可知，该病为常染色体隐性遗传病，A错误；B、6号的基因型及概率为1/3EE、2/3Ee，人群中患病的概率为1/11111，即ee的概率为1/11111，则e的概率为=1/111，因此E的概率为99/111，根据遗传平衡定律，EE的概率为（99×99）/（111×111），Ee的概率为2×99/111×1/111，人群中正常个体中Ee的概率为Ee/（EE+Ee）=2/111，因此，9号患病为男性的概率为2/3×2/111×1/4×1/2=1/616，B错误；C、关于血型，3号的基因型及概率为IAi：IBi：ii=（2×1.1×1.8）：（2×1.1×1.8）：（1.8×1.8）=1：1：4，则3号为O型血的概率为4/6＝2/3，3号个体产生i配子的概率是1/6×1/2+1/6×1/2+4/6=5/6，4号个体产生i配子的概率是1/2，因此3号和4号再生一个O型血孩子的概率为5/6×1/2＝5/12，C错误；D、5号个体有A型、B型和AB型三种血型，其中产生i配子的概率是1/4×1/2×2=1/4，6号B型血有两种基因型IBiB或IBi，其中基因型是IBi的概率为（2×1.1×1.8）/（2×1.1×1.8+1.1×1.1）=16/17，因此5号与B型血男性生一个O型血儿子的概率为1/4×16/17×1/2×1/2=1/17，D正确。故选D。3、C【解析】

分析题甲图中突触的结构组成可知，①是轴突末端，②是线粒体，③是突触小泡，④是突触前膜，⑤是突触间隙，⑥是突触后膜；图乙是反射弧的结构模型图，X所在的神经元是传入神经元，b所在的神经元为传出神经元，c代表突触的位置，兴奋在反射弧上的传导是单向的，只能是感受器→传入神经→神经中枢→传出神经→效应器。【详解】甲图中③是突触小泡，突触小泡内含有神经递质，神经递质由突触前膜释放后，与突触后膜上的特异性受体结合，引起突触后膜所在的神经元兴奋或抑制，A正确；甲图为图乙中结构c的局部放大图像，B正确；由于兴奋在反射弧上的传导是单向的，若b受损的情况下，刺激a不会有感觉，C错误；图乙中的X所示神经纤维为传入神经，D正确。【点睛】关键点：判断反射弧中传入神经和传出神经的依据——由于题图中反射弧没有神经节，所以可以根据突触的结构模式图（—<●―）判断或者根据效应器可以是传出神经末梢和所支配的肌肉组成判断。4、A【解析】

曲线图分析：由变温动物到恒温动物的进化过程中，高等动物的甲状腺激素水平较高，但心脏中二倍体细胞所占比例较低，说明高等动物心脏再生能力较差。【详解】A、该实验的自变量是动物种类，因变量是心脏中二倍体细胞所占比例以及甲状腺激素水平，而甲状腺激素主要存在与动物血液中，故需抽取不同动物的血液，以测定其甲状腺激素的浓度，A正确；B、需通过胰蛋白酶处理获得单个心肌细胞，以观察细胞内的染色体数目，B错误；C、活跃分裂的动物细胞多是二倍体细胞，恒温动物心脏组织因二倍体细胞比例低，分裂能力较弱，C错误；D、由图中结果可知，甲状腺激素水平越高，心脏组织二倍体细胞比例低，心肌细胞分裂能力较弱，两者呈负相关，D错误。故选A。5、D【解析】

1、内环境又叫细胞外液，由血浆、组织液和淋巴组成，内环境是多细胞生物体的细胞生活的直接液体环境，是多细胞生物体的细胞与外界环境进行物质交换的媒介；内环境的稳态是细胞完成正常生命活动的必要条件。

2、内环境稳态是指正常机体通过调节作用，使各个器官、系统协调活动，共同维持内环境的相对稳定的状态，内环境稳态是机体进行正常生命活动的必要条件。【详解】A、通过稳态调节，使人体内环境的成分和理化性质都处于动态平衡，而不是与外界环境的物质和能量构成动态平衡，A错误；

B、单细胞动物都直接与外界环境进行物质交换，多细胞动物的部分细胞可以直接与外界进行物质交换，例如蛙的皮肤细胞可以直接从外界吸收氧气并排出二氧化碳，B错误；

C、线粒体内需要消耗大量的氧气，氧气从细胞溶胶进入线粒体，所以在线粒体中氧气浓度低于细胞溶胶，C错误；

D、内环境稳态的维持主要赖神经-体液-免疫的调节机制，D正确。

故选D。6、B【解析】人体各器官表达的基因数目有差异是细胞内基因选择性表达的结果，A项正确；人体的细胞均是由一个受精卵经有丝分裂而形成的，所以细胞内遗传物质相同。血细胞所表达的基因数目最多，这是与细胞的功能相适应的，B项错误；基因表达的产物是蛋白质，因此表达的基因数目有差异说明细胞中所含蛋白质也有差异，C项正确；蛋白质是生命活动的主要承担者，而基因控制蛋白质的合成，因此不同功能的细胞表达的基因不相同，这是与细胞具有不同功能相适应的，D项正确。【考点定位】细胞的分化二、综合题：本大题共4小题7、第一营养级能量沿着食物链食物网单向流动、逐级递减；相邻营养级之间的能量传递效率是10%—20%鲢、鳙与银鱼在食物上存在竞争关系在种群数量超过K/2但还未达K值的一定数量时进行捕捞，并使捕捞后的剩余量为K/2【解析】

生态系统的结构包括生态系统的组成成分和营养结构，组成成分又包括非生物的物质和能量，生产者、消费者和分解者，营养结构就是指食物链和食物网。生产者主要指绿色植物和化能合成作用的生物，消费者主要指动物，分解者指营腐生生活的微生物和动物。生态系统的功能包括能量流动、物质循环和信息传递，三者缺一不可；物质循环是生态系统的基础，能量流动是生态系统的动力，信息传递则决定着能量流动和物质循环的方向和状态；信息传递是双向的，能量流动是单向的，物质循环具有全球性。【详解】（1）该水库生态系统组成中，引起“水华”的藻类属于生产者，属于第一营养级。（2）由于能量沿着食物链食物网单向流动、逐级递减；相邻营养级之间的能量传递效率是10%—20%。因此为确定鲢、鳙的投放量，应根据食物网中的营养级，调查投放区鲢、鳙上一营养级的生物积累量，根据能量流动逐级递减的特点，根据上一营养级的生物量，确定鲢鱼鳙鱼的投放量，保证流入生态系统的能量大于输出的能量。（3）鲢鱼、鳙鱼等以浮游动物为食，是银鱼的竞争者，鲢、鳙与银鱼在食物上存在竞争关系,所以将鲢、鳙鱼苗以一定比例投放到该水库后，导致银鱼种群数量下降。（4）根据“S”型种群数量的增长曲线，种群数量在K/2值时增长速率最大，因此为了既要增加渔业产量，又要保证鲢、鳙的快速生长，需要进行定期适度捕捞，即在种群数量超过K/2但还未达K值的一定数量时进行捕捞，并使捕捞后的剩余量为K/2。【点睛】此题主要考查的是生态系统的结构和功能，难度不大，意在考查学生对基础知识的理解和掌握程度。8、A—P～P～PATP和ADP相互迅速转化腺苷典型神经递质在神经细胞间的信息传递受体细胞中ATP的浓度和细胞死亡的百分率细胞内ATP浓度下降，能量供应减少，细胞死亡率增加合成和分泌主动运输【解析】

由题干和图可知，细胞膜上存在着P2X、P2Y和P1受体，而ATP与P2X和P2Y受体特异性结合，直接引起神经纤维发生电位变化，则ATP可以在神经细胞之间传递信息。ATP全名叫做三磷酸腺苷，结构简式A-P～P～P，其中A代表腺苷，P代表磷酸基团，～代表高能磷酸键；细胞中ATP和ADP的含量不多，是不断的相互转化，维持动态平衡的；合成ATP的能量来自呼吸作用或光合作用。【详解】（1）ATP的结构简式为A—P～P～P。尽管生物消耗的ATP很多，但细胞内ATP的含量却很少，这是因为细胞中ATP和ADP可快速的相互转化，既为生命活动及时提供了能量，又避免一时用不尽的能量白白流失掉。（2）ATP的结构简式是A-P～P～P，由图可知，细胞间隙中的ATP在有关酶的作用下，磷酸基团逐个脱离下来，最后剩下的是A，即腺苷。（3）一些神经细胞不仅能释放典型神经递质，还能释放ATP，两者均能引起受体细胞的膜电位变化。要想知道ATP是否能作为神经细胞间传递信息的信号分子，应先排除典型神经递质的作用，所以科学家的实验设计思路是：①科学家用化学物质阻断典型神经递质在神经细胞间的信息传递后，发现靶细胞膜能接受到部分神经信号；②科学家寻找到靶细胞膜上有ATP的受体。（4）①根据“为了研究X物质对动物细胞的影响，某研究小组用不同浓度的X物质将细胞处理24小时”并结合表格中信息可知，该实验中自变量是X物质的浓度，因变量是细胞中ATP的浓度和细胞死亡的百分率。②由实验数据可知，细胞内ATP的浓度下降，能量供应减少，使细胞死亡率增加。③食物在小肠内被消化需要消化酶催化，有些食物如氨基酸等物质通过主动运输方式在小肠内壁被吸收。主动运输需要能量和载体蛋白协助。由表格可知X物质浓度越高，细胞产生ATP量越少，细胞死亡率越高。细胞死亡影响消化酶的合成和分泌，同时ATP的生成量减少，为生命活动提供能量就少，妨碍主动运输，影响营养物质的吸收。【点睛】本题的知识点是ATP的简式、ATP与ADP的相互转化和ATP的功能，主要考查学生的识图能力并利用题图信息解题的能力，分析实验数据获取结论的能力。9、从基因组文库中获得的干扰素基因有内含子，在大肠杆菌中干扰素基因的转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，无法表达出干扰素蛋白质分子的结构规律生物功能防止目的基因和载体任意连接（或自身环化或反向连接）无法生长正常生长，菌落呈蓝色正常生长，菌落呈白色（或无色）膀胱上皮【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质﹣﹣抗原﹣抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）从基因组文库中获得的干扰素基因有内含子，在大肠杆菌中干扰素基因的转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，无法表达出干扰素。因此相对于从基因组文库中获取干扰素基因，从已病毒免疫的白细胞中提取mRNA，再反转录并构建的cDNA文库中获取的干扰素基因，更易在大肠杆菌中合成正常干扰素。（2）蛋白质工程以蛋白质分子的结构规律和生物功能的关系为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质。（3）在构建该基因表达载体时，需同时用限制酶HindⅢ和BstⅠ处理目的基因和质粒，主要目的是防止目的基因和载体任意连接（或自身环化或反向连接）。（4）用限制酶HindⅢ和BstⅠ处理质粒时，破坏了lacZ基因，导致半乳糖苷酶不能合成，而半乳糖苷酶能催化生成蓝色物质从而将细菌染成蓝色。在含有四环素的培养基中，未被转化的大肠杆菌不含四环素抗性基因，无法生长；含有质粒载体的大肠杆菌含有四环素抗性基因，能正常生长，含有lacZ基因，菌落呈蓝色；含有重组质粒的大肠杆菌含有四环素抗性基因能正常生长，lacZ基因被破坏，菌落呈白色（或无色）。（5）要获得膀胱生物反应器，最终在尿液中获得干扰素，应使干扰素基因在膀胱上皮细胞中特异性表达。【点睛】本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能正确分析题图，再运用图中信息准确答题，属于考纲理解和应用层次的考查，有一定难度。10、获能液（或一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液）获能卵黄膜封闭作用受体对移入子宫的外来胚胎（基本上）不发生免疫排斥反应基因表达载体的构建性别鉴定胚胎分割分割后胚胎的恢复和进一步的发育【解析】

1.试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术，可见试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术。2.胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，这是胚胎工程的最后一道工序，胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。【详解】（1）体外受精前，需要对精子进行获能处理，具体做法是把奶牛的精子放入获能液（或一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液）中培养，进行获能处理。透明带反应和卵黄膜封闭作用是防止多精入卵的两道屏障。胚胎移植是胚胎工程的最后一道工序，受体对移入子宫的外来胚胎（基本上）不发生免疫排斥反应，这是移植后的胚胎能在受体子宫内存活的生理基础。（2）基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，一般利用显微注射技术将目的基因表达载体导入牛的受精卵中，当受精卵分裂到囊胚期时，取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定鉴定，确保发育成熟的牛能分泌乳汁并获取人类血清白蛋白。（3）为了提高胚胎的利用率，同时获取更多的人类血清白蛋白，可以采用胚胎分割移植技术，具体做法是在胚胎移植前可进行胚胎分割，为保证分割后胚胎的恢复和进一步的发育，应注意将内细胞团进行均等分割，从而达到提高胚胎利用率的目的。【点睛】熟知试管动物激素的操作流程是解答本题的关键！基因工程的操作要点也是本题考查的内容，关注各项操作细节是解答这类题目的关键！11、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有