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文档简介

分子生物学习题集(1)证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是:肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是::(a)从被感染的生物体内重新分离得到DNA,作为疾病的致病剂(b)DNA突变导致毒性丧失(c)生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能(d)DNA是不能在生物体间转移的,因此它一定是一种非常保守的分子(e)真核生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代

--答案:c1953年Watson和Crick提出:()--类型:选择题--选择:(a)多核苦酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋(b)DNA的复制是半保留的,常常形成亲本—子代双螺旋杂合链(c)三个连续的核苦酸代表一个遗传密码(d)遗传物质通常是DNA而非RNA(e)分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变

--答案:a

双链DNA中的碱基对有:()--类型:选择题--选择:(a)A—U(b)G─T(c)C—G(d)T─A(e)C─A

--答案:c,d

DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键,并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述:()--类型:选择题--选择:(a)哺乳动物DNA约为45℃,因此发烧时体温高于42℃是十分危险的(b)依赖于A-T含量,因为A-T含量越高则双链分开所需要的能量越少(c)是双链DNA中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值(d)可通过碱基在260nm的特征吸收蜂的改变来确定(e)就是单链发生断裂(磷酸二酯键断裂)时的温度

--答案:c,d

DNA的变性:()--类型:选择题--选择:(a)包括双螺旋的解链(b)可以由低温产生(c)是可逆的(d)是磷酸二酯键的断裂(e)包括氢键的断裂

--答案:a,c,e

在类似RNA这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中,发夹结构的形成:()--类型:选择题--选择:(a)基于各个片段问的互补,形成反向平行双螺旋(b)依赖于A—U含量,因为形成的氢键越少则发生碱基配对所需的能量也越少(c)仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时才会发生(d)同样包括有像G—U这样的不规则碱基配对(e)允许存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基

--答案:a,d

DNA分子中的超螺旋:()--类型:选择题--选择:(a)仅发生于环状DNA中。如果双螺旋在围绕其自身的轴缠绕后(即增加缠绕数)才闭合,则双螺旋在扭转力的作用下,处于静止(b)在线性和环状DNA中均有发生。缠绕数的增加可被碱基配对的改变和氢键的增加所抑制(c)可在一个闭合的DNA分子中形成一个左手双螺旋。负超螺旋是DNA修饰的前提,为酶接触DNA提供了条件(d)是真核生物DNA有丝分裂过程中固缩的原因(e)是双螺旋中一条链绕另一条链的旋转数和双螺旋轴的回转数的总和

--答案:a,c,e

DNA在10nm纤丝中压缩多少倍(长度)?()--类型:选择题--选择:(a)6倍.(b)10倍(c)40倍(d)240倍(e)1000倍(f)10000倍

--答案:a

DNA在30nm纤丝中压缩多少倍?()--类型:选择题--选择:(a)6倍(b)10倍(c)40倍(d)240倍(e)1000倍(f)10000倍

--答案:c

DNA在染色体的常染色质区压缩多少倍?()--类型:选择题--选择:(a)6倍(b)10倍(c)40倍(d)240倍(e)1000倍(f)10000倍

--答案:e

DNA在中期染色体中压缩多少倍?()--类型:选择题--选择:(a)6倍(b)10倍(c)40倍(d)240倍(e)1000倍(f)10000倍

--答案:f

组蛋白的净电荷是:()--类型:选择题--选择:(a)正(b)中性(c)负

--答案:a

核小体的电性是:()--类型:选择题--选择:(a)正(b)中性(c)负

--答案:b

当新的核小体在体外形成时,会出现以下哪些过程?()--类型:选择题--选择:(a)核心组蛋白与DNA结合时,一次只结合一个(b)一个H32—H42核形成,并与DNA结合,随后按顺序加上两个H2A—H2B二聚体(c)核心八聚体完全形成后,再与DNA结合

--答案:b,c

1953年Watson和Crick提出:()(e)分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变--类型:选择题--选择:(a)多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋(b)DNA的复制是半保留的,常常形成亲本—子代双螺旋杂合链(c)三个连续的核苦酸代表一个遗传密码(d)遗传物质通常是DNA而非RNA

--答案:a

当一个基因具有活性时:()--类型:问答题--选择:(a)启动子一般是不带有核小体的(b)整个基因一般是不带有核小体的(c)基因被核小体遮盖,但染色质结构已发生改变以致于整个基因对核酸酶降解更加敏感

--答案:a,c

在高盐和低温条件下由DNA单链杂交形成的双螺旋表现出几乎完全的互补性,这一过程可看作是一个复性(退火)反应.--类型:判断题

--答案:1.错误;

B型双螺旋是DNA的普遍构型,而Z型则被确定为仅存在于某些低等真核细胞中。--类型:判断题

--答案:3.错误

病毒的遗传因子可包括1到300个基因。与生命有机体不同,病毒的遗传因子可能是DNA或RNA(但不可能同时兼有!)因此DNA不是完全通用的遗传物质。--类型:判断题

--答案:4.正确

C0t1/2与基因组大小相关。--类型:判断题

--答案:5.正确

C0t1/2与基因组复杂性相关。--类型:判断题

--答案:6.正确

非组蛋白染色体蛋白负责3nm纤丝高度有序的压缩。--类型:判断题

--答案:7.正确。

碱基对间在生化和信息方面有什么区别?--类型:简答题

--答案:1、答:从化学的角度看,不同的核苷酸仅是含氮碱基有差别。贮存在DNA中的信息是指碱基的顺序,而碱基不参与核苷酸之间的共价连接,因此贮存在DNA的信息不会影响分子结构,来自突变或重组的信息改变也不会破坏分子。

在何种情况下有可能预测某一给定的核苷酸链中“G”的百分含量?--类型:简答题

--答案:2、答:由于在分子中互补碱基的含量是一样的,因此只有在双链中G的百分比是可知的:G%=(G十C)/2。(G十c)可由分光光度法测定。

真核基因组的哪些参数影响C0t1/2值?--类型:简答题

--答案:3、答:C0t1/2值受基因组大小和基因组中重复DNA的类型和总数影响。

请问哪些条件可促使DNA复性(退火)?--类型:简答题

--答案:4、答:降低温度、pH值和增加盐浓度可以促进DNA复性(退火)。

在核酸双螺旋(如DNA)中形成发夹环结构的频率比单链分子低。发夹结构的产生需要回文序列使双链形成对称的发夹,呈十字结构。--类型:判断题

--答案:2.正确;

为什么DNA双螺旋中维持特定的沟很重要?--类型:简答题

--答案:5、答:形成沟状结构是DNA与蛋白质相互作用所必需的,这样DNA结合蛋白与DNA修饰蛋白中特定的氨基酸才能与对应的碱基相互作用。

大肠杆菌染色体的分子量大约是2,5x1000000000Da,核苷酸的平均分子量是330Da。邻近核苦酸对之间的距离是0.34nm;双螺旋每一转的高度(即螺距)是0.34nm,(1)该分子有多长(2)该DNA有多少转?--类型:简答题

--答案:6、答:(1)1碱基=330Da,l碱基对=660Da碱基对数=2.5×10000000000/660=3.8×1000000=3800kb每个碱基对相距0.34nm,这样:染色体DNA分子的长度=3.8×1000000×0.34nm=1.3×1000000nm=1.3mm(2)该DNA双螺旋中的转数=3.8×1000000×0.34/3.4=3.8×100000

曾经有一段时间认为,DNA无论来源如何,都是4个核苷酸的规则重复排列(如ATCG.ATCG,ATCG,ATCG…),所以DNA缺乏作为遗传物质的特异性。第一个推翻该四核苦酸定理的证据是什么?--类型:简答题

答案:在1949到1951年间,ErwinChargaff发现:(1)不同来源的DNA的碱基组成变化极大。(2)A和T、C和G的总量几乎总是相等(即Chargaff规则)。(3)虽然(A十G)/(C十T)的值总是l,但(A十T)/(G十C)的比值在各生物体之间变化极大。

现在对人类基因组的主要研究工作是进行基因组的序列测定。然而,有人根据人类基因组是由重复序列组成为由,认为反复对同一种DNA进行测序是不明智的。你能否拟定两份计划,一份计划应保证仅仅单一序列DNA被测序,第二个计划应允许仅仅转录的单一DNA序列被测序。请简述你的两份计划。--类型:分析题

答案计划一:进行一个复性实验,在从不同的温育时间取出等量样品。当所有重复DNA都发生退火时,从反应中去除双链DNA(可以使用一个仅能结合双链DNA的柱或过滤器)。接着继续进行复性反应直到所有的单拷贝DNA都发生复性;以这一单拷贝DNA建立克隆文库,用于测序。计划二:仅测序能够表达的单拷贝基因。用计划一中分离纯化得到的单一序列DNA与细胞总RNA杂交,使复性完全,然后从反应液中除去单链DNA,只有能表达的单拷贝DNA以DNA-RNA杂合体的形式留下来。克隆这一DNA并进行测序(现在可采用EST法,从细胞总RNA中制备表达序列的cDNA,进行测序)。

列举一个已知的DNA序列编码一种以上蛋白质的三种方法。--类型:简答题

--答案:答:给定的一段DNA序列可以以下述方式编码两种或两种以上的蛋白质:(1)可读框中在核糖体结合位点之后含有多重起始位点;(2)以一两个碱基的移码方式出现重叠的可读框;(3)不同的剪接方式,例如,选择不同的外显子组合成不同的mRNA。

氨甲喋吟对哺乳动物细胞有何作用?细胞是如何对这种药物产生抗性的?其中稳定和不稳定抗性有什么不同?--类型:简答题

--答案:答:氨甲喋呤是一个阻断叶酸新陈代谢的药物,提高DHFR基因的拷贝数可以使细胞产生对这种药物的抗性。在稳定扩增的细胞中,基因在它们正常所处的染色体位置上扩增。在不稳定的细胞系中,扩增基因形成称为双微染色体的额外染色体元件。去除氨甲喋呤之后双微染色体就会消失。

什么证据表明活性基因带有DNaseI的超敏位点?--类型:分析题

--答案:答:有人用不同浓度的DNaseI对成熟细胞中的成体β球蛋白基因和胚胎β球蛋白进行检测,发现:成体β球蛋白基因对低浓度的DNaseI敏感(在0.05mg/m1的DNaseI的作用下成体β球蛋白基因的带大部分消失);而在成熟细胞中没有活性的胚胎β球蛋白基因只有当DNaseI的浓度达到0.5mg/ml时才能被消化,因此,活性的基因对DNaseI超敏感。

表面抗原的变异和哺乳动物免疫多样性都是DNA重排的结果。锥虫通过DNA重排选择表达所携带的一千多个不同的VSG基因中的一个。而哺乳动物细胞则通过DNA重排产生成百上千个不同的抗体,包括与VSG蛋白反应的抗体,尽管抗体在数量上的优势,锥虫仍然能够成功地逃避宿主的免疫系统,为什么?--类型:分析题

--答案:答:锥虫因为细胞分裂周期短而取胜。当锥虫感染哺乳动物时,它在血流中以快速的倍增时间复制。在感染开始后不久,识别锥虫VSG的B细胞从休眠状态被激活并开始膨大,而哺乳动物细胞的分裂比锥虫慢得多。当B细胞膨大到足以杀死锥虫时,一些锥虫的VSG已经发生了改变,使B细胞不再能识别它。这样就起始了新一轮的感染,直到免疫系统能识别它时就已改变成能逃得过免疫系统的变体,于是又开始了新的循环。

请解释酵母的交配型系统为什么可以作为DNA重组、染色质结构对基因表达的调控、染色体结构域的保持、转录元件间的蛋白互作、基因表达的细胞类型特异性以及信号传递激活基因的例子。--类型:分析题

--答案:答:交配型体系通过DNA重排把交配型基因从沉默基因座(HMT和HML)转移到表达基因座(MAT)。沉默基因座由HMT和HML的染色体结构控制而没有转录活性。E和I沉默子区域是产生不活动染色体结构的分界。一些转录因子的活性受到蛋白—蛋白相互作用的调节,如PRTF转录因子。PRTF能单独激活“α-特异基因,与α-蛋白结合时能激活。α-特异基因。当α2出现时,它抑制α-特异基因。细胞类型特异表达基因的表达以HO基因为例,它具有一个复杂的启动子,该启动子只在单倍体细胞中有活性,在双倍体细胞中没有活性。HO启动子还受到细胞周期的调节,它只在G1期的后期有活性。最后,交配型体系还采用一种信号传递级联作用来控制基因的表达。交配型外激素与细胞表面受体的结合激活了一系列将信号传递到核内并改变基因表达的蛋白激酶。

为什么在DNA中通常只发现A—T和C—G碱基配对?--类型:简答题

--答案:31.答:(1)C—A配对过于庞大而不能存在于双螺旋中;G—T碱基对则太小,核苷酸间的空隙太大无法形成氢键。(2)A和T通常有两个氢键,而C和G有三个。正常情况下,可形成两个氢键的碱基不能与可形成三个氢键的碱基配对。

列出最先证实是DNA(或RNA)而不是蛋白质是遗传物质的一些证据。--类型:简答题

--答案:32答:(1)在20世纪40年代,0swaldAvery和他的同事发现来自于肺炎球菌光滑型毒株(被一层多糖荚膜包被着)的DNA可被无毒的粗糙菌株(无荚膜)吸附,并将一些这种细胞转化为光滑型毒株。如果提取出的DNA首先用DNase处理,将其降解,转化则不会发生。(2)1956年,HeinzFraenkel—Conrat重建了烟草花叶病毒(TMV),将一种病毒株的衣壳蛋白和另一种病毒株的RNA构成杂合病毒(注意TMV的遗传物质是单链RNA分子)用这些杂合体感染烟草时,发现:①产生的损伤与RNA供体植株相同;②从损伤处得到的子代病毒具有与提供RNA的亲本株系一致的RNA和蛋白衣壳。(3)当噬菌体感染细菌时,只有核酸进入被感染细胞(虽然有时可能也有微量的结合蛋白进入),而这已足以编码完整的新噬菌体。(4)可特异性改变DNA结构的化学物质能够诱导产生可遗传的变化或突变。(5)在任何种属中,DNA的量在各个细胞中是稳定的,除了单倍体配子中只含有该数值的一半。如果认为DNA是遗传物质,这是意料之中的。此外,在细胞的其他成分中没有发现这种稳定性的联系。

为什么只有DNA适合作为遗传物质?--类型:简答题

--答案:33.答:DNA是由磷酸二酯键连接的简单核苷酸多聚体,其双链结构(二级结构)保证了依赖于模板合成的准确性。DNA以遗传密码的形式编码多肽和蛋白质,其编码形式的多样性和复杂性是令人难以想像的。

什么是连锁群?举一个属于连锁基因座的例子。--类型:简答题

--答案:34答:连锁群是指通过共同遗传分离的一组遗传基因座。通常这些基因座在同一染色体上,相互靠得很近,而且在这区域重组率低。最常见的例子是X染色体连锁群,该连锁群只在雄性后代中出现遗传型和表型的明显分离(例如果蝇中的白眼突变体)。

什么是顺反子?用“互补”和“等位基因”说明“基因”这个概念。--类型:简答题

--答案:35.答:等位基因是指同一基因的不同状态,通常是位于不同个体的同源染色体上。在遗传作图(RFLP或突变体表型分析)中,染色体上的基因(遗传单元)与基因座等价。这些遗传学术语必须与分子生物学术语相结合才能反映遗传信息的利用及基因表达。基因表达的单位即转录单位,在原核生物中一般由多个可翻译成蛋白质的片段组成;而在真核生物中则不然,仅含有一个翻译单位的转录单位称为一个顺反子。顺反子可以通过互补分析得以鉴定:若两个突变单位不能通过反式互补实验使功能得以恢复,则说明这两个突变单位位于同一转录单位。

假定你在25℃条件下用如下浓度的DNaseI:0,0.1,1.0及10.0mg/ml,对鸡红细胞细胞核的染色质进行酶切20分钟。将这些样品与分子量标记一起上样于6%变性聚丙烯酰胺凝胶,下图是凝胶电泳的结果。但由于你混淆了样品,因此弄不清每个泳道对应的样品是什么。惟一可以确信的是分子量标记上样于左边的泳道,但忘记了各带对应的分子量大小(图1.1)。(1)请回忆起在各泳道分别使用的是哪一浓度的DNaseI?(2)请指出分子量标记泳道(用M表示)各带的大约分子量。(3)描述各泳道所显示的染色质结构特征,证实所记忆的数字是正确的。--类型:分析题

--答案:(1)和(2)的答案示如图A1.1。(3)在没有DNaseI加入时,染色质没有被消化,可以看到一条高分子量的带。在低浓度下(O.1mg/ml),DNaseI切割核小体之间的连接DNA产生一个单核小体带(200nt的带)、双核小体带(400nt的带)等等。增加核酸酶的浓度到1.0mg/ml,这时所有的多核小体带都被切割成单核小体的带。在非常高的浓度下,包围组蛋白八聚体的DNA也会被切割。只有当一条链处于双螺旋之外时,它才可能有敏感性。消化后,产生了与DNA的周期性结构相关的相间10个核苷酸的条带。由此可说明记忆的数字是正确的。

假定你从一新发现的病毒中提取了核苷酸,请用最简单的方法确定:(1)它是DNA还是RNA?(2)它是单链还是双链?--类型:分析题

--答案:确定碱基比率。如果有胸腺嘧啶,为DNA,如果有尿嘧啶,则为RNA。如果为双链分子,那么A与T(或U)的量以及G与C的量应相等。

RNA是由核糖核酸通过()键连接而成的一种()。几乎所有的RNA都是由()DNA()而来,因此,序列和其中一条链()。--类型:填空题

--答案:磷酸二酯;多聚体;模板;转录;互补

多数类型的RNA是由加工()产生的,真核生物前体tRNA的()包括()的切除和()的拼接。随着()和()端的序列切除,3’端加上了序列()。在四膜虫中,前体TRNA的切除和()的拼接是通过()机制进行的。--类型:填空题

--答案:前体分子;加工;内含子;外显子;5’;3’;CCA;内含子;外显子;自动催化

RnaseP是一种(),含有()作为它的活性部位,这种酶在()序列的()切割()。--类型:填空题

--答案:内切核酸酶;RNA;tRNA;5’

假定摆动假说是正确的,那么最少需要()种TRNA来翻译61种氨基酸密码子。--类型:填空题

--答案:32

写出两种合成后不被切割或拼接的RNA:()和()。--类型:填空题

--答案:真核生物中的5SrRNA;原核生物中的mRNA

原核细胞信使RNA含有几个其功能所必需的特征区段,它们是:()--类型:选择题--选择:(a)启动子,SD序列,起始密码子,终止密码子,茎环结构(b)启动子,转录起始位点,前导序列,由顺反子间区序列隔开的SD序列和ORF尾部序列,茎环结构(c)转录起始位点,尾部序列,由顺反子间区序列隔开的SD序列和0RF,茎环结构(d)转录起始位点,前导序列,由顺反子间区序列隔开的SD序列和0RF,局部序列

--答案:d

tRNA参与的反应有:()--类型:选择题--选择:(a)转录(b)反转录(c)翻译(d)前体mRNA的剪接(e)复制

--答案:a

氨酰tRNA的作用由()决定.--类型:选择题--选择:(a)其氨基酸(b)其反密码子(c)其固定的碱基区(d)氨基酸与反密码子的距离,越近越好(e)氨酰tRNA合成酶的活性

--答案:c,d

I型内含子能利用多种形式的鸟嘌吟,如:()--类型:选择题--选择:(a)GMP(b)GDP(c)GTP(d)dGDP(e)ddGMP(2’,3’–双脱氧GMP)

--答案:c,d

I型内含子折叠成的复杂二级结构:()--类型:选择题--选择:(a)有长9bp的核苦酸配对(b)对突变有很大的耐受性(c)形成可结合外来G和金属离子的“口袋”(d)使内含子的所有末端都在一起(e)在剪接过程中发生构象重组(f)利用P1和P9螺旋产生催化中心

--答案:a,c,e

RNaseP:()--类型:选择题--选择:(a)其外切核酸酶活性催化产生tRNA成熟的5’末端(b)含有RNA和蛋白组分(c)体内切割需要两个组分(d)体外切割需要两个组分(e)采用复杂的二级与三级结构形成催化位点

--答案:a,b,c,e

锤头型核酶:()--类型:选择题--选择:(a)是一种具有催化活性的小RNA(b)需要仅含有17个保守核苦酸的二级结构(c)不需要Mg2+协助(d)可用两个独立的RNA创建锤头型核酶

--答案:a,b,d

I型剪接需要()--类型:问答题--选择:(a)单价阳离子(b)二价阳离子(c)四价阳离子(d)U1SnRNP(e)一个腺苷酸分支点(f)一个鸟嘌吟核苷酸作为辅助因子

--答案:a,b,f

在I型剪接的过程中,()--类型:选择题--选择:(a)游离的G被共价加到内含子的5’端(b)GTP被水解(c)内含子形成套马索结构(d)在第一步,G的结合位点被外来的G占据,而在第二步时,被3’剪接位点的G所取代(e)被切除的内含子继续发生反应,包括两个环化反应

--答案:a,d,e

对于所有具有催化能力的内含子,金属离子很重要;请举例说明金属离子是如何作用的。--类型:简答题

--答案:锤头型核酶在活性位点上结合一个Mg2+离子。这个Mg2+离子通过去掉一个质子并攻击切割位点而直接参与切割反应。

列出真核生物mRNA与原核生物mRNA的区别。--类型:简答题

--答案:原核生物和真核生物mRNA的差别在于可翻译顺反子的数目,真核生物的mRNA是单个顺反子。而且,真核生物的mRNA在其3’末端有多聚腺嘌呤尾巴(po1yA),而5’末端有7—甲基鸟嘌呤帽子。真核生物的mRNA尾部区域有时会携带特定的去稳定因子。

列出各种tRNA所有相同的反应及个别tRNA的特有反应。--类型:简答题

--答案:(1)相同反应:与核糖体结合;除了起始tRNA以外,其他均与延长因子相互作用。(2)特殊反应:起始氨酰tRNA的甲酰化作用;起始氨酰tRNA同起始因子的相互作用;密码子与反密码子的碱基配对;由氨酰tRNA合成酶催化氨酰化。

在体内,rRNA和tRNA都具有代谢的稳定性,而mRNA的寿命却很短,原因何在?--类型:简答题

--答案:在不同的营养状态或细胞分化期间,mRNA的(种类和数量)变化很大;rRNA和tRNA则无此特性。

为什么真核生物核糖体RNA基因具有很多拷贝?--类型:简答题

--答案:因为rRNA需要的量很大,并且没有翻译扩增作用。

为什么说信使RNA的命名源自对真核基因表达的研究,比说源自对原核基因表达的研究更为恰当?--类型:简答题

--答案:真核基因表达过程是被区室化的。mRNA的合成与成熟是在细胞核中完成的,翻译则发生在细胞质中,转录“信息”被传递到细胞核外的核糖体中。由于真核细胞mRNA的半衰期比原核细胞mRNA长而且可以通过多种实验方法干扰转录“信息”的传递,因此可分离出真核细胞的mRNA。

说明为什么mRNA仅占细胞RNA总量的一小部分(3%一5%)。--类型:简答题

--答案:mRNA只占总RNA的3%一5%,这主要是有以下两个原因:①由于需要大量的核糖体和稳定的tRNA群,因此mRNA合成量比其他RNA的量要少;②由于对内切酶与外切核酸酶敏感,mRNA容易自发地降解,所以在原核细胞中mRNA的半衰期只有2一15分钟,真核细胞中也只有4—24小时。

为何rRNA和tRNA分子比mRNA稳定?--类型:简答题

--答案mRNA游离存在于细胞之中,并且被特异的单链RNA核酸酶所降解。tRNA和rRNA是部分双链的,所以能够免遭核酸酶的攻击。另外,rRNA不是游离存在的,通常同蛋白质结合形成核糖体。

起始tRNA具有哪两种与其他跟tRNA不同的特性?--类型:简答题

--答案:(1)带有一个甲酰化的氨基酸(N—甲酰甲硫氨酸);(2)它是惟一一种同30S核糖体亚基—mRNA复合物内的密码子(AUG)起反应的tRNA

区别tRNA和mRNA在翻译中的作用。--类型:简答题

--答案:mRNA是氨基酸装配成多肽的模板。tRNA一方面是识别特异氨基酸的接头分子,另一方面又可以识别特异的mRNA密码子。

氨基酸分子如何与正确的tRNA分子连接?--类型:简答题

--答案:对于每一种氨基酸都有一种特殊的氨酰tRNA合成酶,这种酶可以识别自己的氨基酸和相应的空载tRNA在ATP存在的情况下,它把氨基酸的羧基同tRNA3’端的CCA连接起来。

简要说明证明信使的存在及其本质为RNA的证据。--类型:简答题

--答案:(1)科学家观察到生物,尤其是真核生物中,染色体DNA只存在于核中,而蛋白质合成则完全在细胞质中进行。因此,提出一定存在某种化合物(信使)在核与细胞质之间传递遗传信息。1957年,E11iotVolkin和LazlrusAstrachan注意到用噬菌体T2感染E.coli细胞后细菌的RNA和蛋白质合成迅速停止,而T2的RNA和蛋白质迅速合成。此外,这一RNA的碱基比例与T2DNA碱基比例一致,而不是细菌DNA.他们的发现第一次证明了信使为RNA。(2)1961年BernardHall和So1Spiegelman用杂交实验更令人信服地证明了mRNA假说。他们用噬菌体T2感染E.coli后,马上分离出现的RNA(假定为信使),再将E.coli和噬菌体T2DNA温热变性,成为单链DNA,把RNA和单链DNA混合后缓慢冷,发现:①双链DNA分子重新形成;②当单链的DNA和RNA的碱基互补时,形成DNA-RNA杂合双链分子。他们发现噬菌体T2感染后出现的RNA不能与E.coli的DNA杂交,但至少能与T2双链DNA中的一条链互补。

列举4种天然存在的具有催化活性的RNA。--类型:简答题

--答案:I型内含子、II型内含子、RnaseP、锤头型核酶。

I型内含子发生改变后,可以产生其他酶的活性吗?如果可以,是哪些活性?这意味着I型内含子的催化中心有什么特点?--类型:简答题

--答案:可以。这些活性包括:RNA聚合酶、内切核酸酶、磷酸酶、连接酶的活性。将I型内含子转变成这些酶的能力表明它能结合于RNA的糖—磷酸骨架并能催化在它前后的几个不同反应。例如,连接是剪切的相反反应。

某些自剪接的内含子具有可读框,它们编码何种蛋白?这与内含子的移动有什么关系?--类型:简答题

--答案:编码的蛋白有:反转录酶、内切核酸酶、成熟酶。这些蛋白产生内含子的一个DNA拷贝并在染色体一个新位点上打开双链以便插入内含子。

有一个被认为是mRNA的核苦酸序列,长300个碱基,你怎样才能:(1)证明此RNA是mRNA而不是tRNA或rRNA。(2)确定它是真核还是原核mRNA。--类型:分析题

--答案:根据序列组成进行判断:(1)此序列太长不可能是tRNA。如果它是rRNA,应该含有许多特殊元件,如:假尿嘧啶和5—甲基胞嘧啶;同时应具有可以形成发夹环的反向重复序列。如果是mRNA则应有AUG起始密码子、一段相应的氨基酸密码子和一个相应的终止密码子构成的可读框。(2)所有的真核生物mRNA在5’端都含有一个7—甲基鸟苷,而且大多数还在3’端有一个长的po1yA尾巴。这些都是原核生物mRNA所不具有的,但是原核生物mRNA靠近5’端有l—个核糖体结合序列(SD序列)。

如果两个RNA分子具有适当的序列以及配对恰当,就可以利用它们构建锤头型核酶。其中,“底物链”必须含有5’—GUN—3’(N代表任一种核苷酸)序列,而“酶链”则必须具有核酶催化中心的序列,同时与底物链配对。这样,酶链在N核昔酸的3’端对底物链进行切割。提供适当的酶链,可以降解细胞中不能被锤头型核酶切割的RNA,这为把酶链作为阻断某些基因表达的治疗试剂提供了可能。例如,一些研究小组正在设计可以切割HIVRNA的酶链,将如何设计这种核酶的酶链?如何选择HIVRNA中的靶序列?该酶链应具有什么特点?另外,以RNA作为药物,将会碰到什么问题?--类型:分析题

--答案:首先,目标RNA必须具有5’-GUN-3’序列。这一序列不能位于参与形成其他RNA结构(比如说茎—环结构)的区域中,因为这些结构会妨碍RNA与起核酶作用的RNA链的配对。酶链必须与目标RNA配对,但不能与其它细胞内任何RNA配对,否则RNA会被不正确切除。在目前来说将一种RNA送到目标细胞中还是一件困难的事,但可以通过加上一个编码酶链的基因并将基因送进细胞中,让胞内的RNA聚合酶制造出RNA,或者以化学方法合成酶链并导人细胞中。

在DNA合成中负责复制和修复的酶是()。--类型:填空题

--答案:DNA聚合酶

染色体中参与复制的活性区呈Y型结构,称为()。--类型:填空题

--答案:DNA复制叉

在DNA复制和修复过程中修补DNA螺旋上缺口的酶称为().--类型:填空题

--答案:DNA连接酶

在DNA复制过程中,连续合成的子链称(),另一条非连续合成的子链称为()。--类型:填空题

--答案:先导链;后随链

如果DNA聚合酶把一个不正确的核苦酸加到3’末端,一个含3’→5’活性的独立催化区会将这个错配碱基切去。这个催化区称分()酶。--类型:填空题

--答案:校正外切核酸

DNA后随链合成的起始要一段短的(),它是由()以核糖核苷酸为底物合成的。--类型:填空题

--答案:75.RNA引物;DNA引发酶

复制叉上DNA双螺旋的解旋作用由(),催化的,它利用来源于ATP水解产生的能量沿DNA链单向移动。--类型:填空题

--答案:76.DNA解旋酶

帮助DNA解旋的()与单链DNA结合,使碱基仍可参与模板反应。--类型:填空题

--答案:77.单链DNA结合蛋白(SSB)

DNA引发酶分子与DNA解旋酶直接结合形成一个()单位,它可在复制叉上沿后随链下移,随着后随链的延伸合成RNA引物。--类型:填空题

--答案:78.引发体

如果DNA聚合酶出现错误,会产生一对错配碱基,这种错误可以被一个通过甲基化作用来区别新链和旧链的特别()系统进行校正。--类型:填空题

--答案:79.错配校正(配错修复)

对酵母、细菌以及几种生活在真核生物细胞中的病毒来说,都可在DNA独特序列()处观察到复制泡的形成。--类型:填空题

--答案:80.复制起点

()可被看成一种可形成暂时单链缺口(Ⅰ型)或暂时双链缺口(Ⅱ型)的可逆核酸酶。--类型:填空题

--答案:81.DNA拓扑酶

DNA的复制:()--类型:选择题--选择:(a)包括一个双螺旋中两条子链的合成(b)遵循新的子链与其亲本链相配对的原则(c)依赖于物种特异的遗传密码(d)是碱基错配最主要的来源(e)是一个描述基因表达的过程

--答案:b,d

一个复制子是:()--类型:选择题--选择:(a)细胞分裂期间复制产物被分离之后的DNA片段(b)复制的DNA片段和在此过程中所需的酶和蛋白(c)任何自发复制的DNA序列(它与复制起始点相连)(d)任何给定的复制机制的产物(A如:单环)(e)复制起点和复制叉之间的DNA片段,

--答案:c

真核生物复制子有下列特征,它们:()--类型:选择题--选择:(a)比原核生物复制子短得多,因为有末端序列的存在(b)比原核生物复制子长得多,因为有较大的基因组(c)通常是双向复制且能融合(d)全部立即启动,以确保染色体在S期完成复制(e)不是全部立即启动,在任何给定的时间只有大约15%是有活性的

--答案:c

下述特征是所有(原核生物、真核生物和病毒)复制起始位点都共有的是:()--类型:选择题--选择:(a)起始位点是包括多个短重复序列的独特DNA片段(b)起始位点是形成稳定二级结构的回文序(c)多聚体DNA结合蛋白专一性识别这些短的重复序列(d)起始位点旁侧序列是A—T丰富的,能使DNA螺旋解开(e)起始位点旁侧序列是G—C丰富的,能稳定起始复合物.

--答案:a,c,d

5.下列关于DNA复制的说法是正确的有:()--类型:选择题--选择:(a)按全保留机制进行(b)按3’→5’方向进行(c)需要4种dNMP的参与(d)需要DNA连接酶的作用(e)涉及RNA引物的形成(f)需要DNA聚合酶I

--答案:d,e,f

滚环复制:()--类型:选择题--选择:(a)是细菌DNA的主要复制方式(b)可以使复制子大量扩增(c)产生的复制子总是双链环状拷贝(d)是噬菌体DNA在细菌中最通常的一种复制方式(e)复制子中编码切口蛋白的基因的表达是自动调节的

--答案:b,d,e

标出下列所有正确的答案:()--类型:问答题--选择:(a)转录是以半保留的方式获得两条相同的DNA链的过程(b)DNA依赖的DNA聚合酶是负责DNA复制的多亚基酶(c)细菌转录物(mRNA)是多基因的(d)σ因子指导真核生物,的hnRNA到mRNA的转录后修饰(e)促旋酶(拓扑异构酶B)决定靠切开模板链而进行的复制的起始和终止

--答案:b,c

哺乳动物线粒体和植物叶绿体基因组是靠D环复制的。下面哪一种叙述准确地描述了这个过程?()--类型:选择题--选择:(a)两条链都是从oriD开始复制的,这是一个独特的二级结构,由DNA聚合酶复合体识别(b)两条链的复制都是从两个独立的起点同时起始的(c)两条链的复制都是从两个独立的起点先后起始的(d)复制的起始是由一条或两条(链)替代环促使的(e)ter基因座延迟一条链的复制完成直到两个复制过程同步

--答案:c,d

DNA多聚体的形成要求有模板和一个自由3’-0H端的存在。这个末端的形成是靠:()--类型:选择题--选择:(a)在起点或冈崎片段起始位点(3’-GTC)上的一个RNA引发体的合成(b)随着链替换切开双链DNA的一条链(c)自由的脱氧核糖核苦酸和模板一起随机按Watson-Crick原则进行配对(d)靠在3’末端形成环(自我引发)(e)一种末端核昔酸结合蛋白结合到模板的3’末端

--答案:a,b,d,e

对于一个特定的起点,引发体的组成包括:()--类型:选择题--选择:(a)在起始位点与DnaG引发酶相互作用的一个寡聚酶(b)一个防止DNA降解的单链结合蛋白(c)DnaB解旋酶和附加的DnaC,DnaT,PriA等蛋白(d)DnaB单链结合蛋白,DnaC,DnaT,PriA蛋白和DnaG引发酶(e)DnaB解旋酶,DnaG引发酶和DNA聚合酶Ⅲ

--答案:a,c

在原核生物复制子中以下哪种酶除去RNA引发体并加入脱氧核糖核昔酸?()--类型:选择题--选择:(a)DNA聚合酶Ⅲ(b)DNA聚合酶Ⅱ(c)DNA聚合酶Ⅰ(d)外切核酸酶MFl(e)DNA连接酶

--答案:c

大肠杆菌中,复制叉以每秒500个碱基对的速度向前移动,复制叉前的DNA以大约3000r/min的速度旋转。--类型:判断题

--答案:93.正确。(如果复制叉以500核苷酸/秒的速度向前移动,那么它前面的DNA必须以500/10.5=48周/秒的速度旋转,即2880周/分)。

所印谓半保留复制就是以DNA亲本链作为合成新子链DNA的模板,这样产生的新的双链DNA分子由一条旧链和一条新链组成。--类型:判断题

--答案:94.正确。

3.“模板”或“反义”DNA链可定义为:模板链是被RNA聚合酶识别并合成1个互补的mRNA,这一mRNA队是蛋白质合成的模板。--类型:判断题

--答案:3、正确。

在DNA复制中,假定都从5’→3’、同样方向读序时,新合成DNA链中的苷酸序列同模板链一样。--类型:判断题

--答案:96.错误。尽管子链与亲本链因为碱基互补配对联系起来,但子链上核苷酸序列与亲链有很大不同。

DNA的5’→3’合成意味着当在裸露3-OH的基团中添加dNTP时,除去无机焦磷酸DNA链就会伸长。--类型:判断题

--答案:97.正确

在先导链上DNA沿5’→3’方向合成,在后随链上则沿3’→5’方向合成。--类型:判断题

--答案:98.错误。所有DNA合成均沿5’→3’方向,后随链上的DNA以片段合成然后连接起来,所以滞后链沿3’→5’方向增长。

如果DNA沿3’→5’合成,那它则需以5’三磷酸或3’脱氧核苦三磷酸为末端的链作为前体。--类型:选择题

--答案:99.正确。

大肠杆菌DNA聚合酶缺失3’→5’校正外切核酶活性时会降低DNA的合成速率但不影响它的可靠性。--类型:判断题

--答案:100.错误。缺乏3’→5’的校正外切核酸酶活性,DNA合成将更易出错。

DNA的复制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶。--类型:判断题

--答案:101.正确。

复制叉上的单链结合蛋白通过覆盖碱基使DNA的两条单链分开,这样就避免了碱基配对。--类型:判断题

--答案:102.错误。单链结合蛋白通过与磷酸骨架结合使DNA单链相互分开,它们离开暴露的碱基,所以那些碱基可以作为DNA合成的模板。

只要子链和亲本链,其中的一条或两条被甲基化,大肠杆菌中的错配校正系统就可以把它们区别开来,但如果两条链都没有甲基化则不行。--类型:判断题

--答案:103.错误。依靠甲基化的修复系统依赖亲本链上的甲基,这些甲基在子链上是缺失的,以便识别两条链.

大肠杆菌、酵母和真核生物病毒DNA的新一轮复制是在一个特定的位点起始的,这个位点由几个短的序列构成,可用于结合起始蛋白复合体。--类型:判断题

--答案:104.正确。

拓扑异构酶I之所以不需要ATP来断裂和重接DNA链,是因为磷酸二酯键的能量被暂时贮存在酶活性位点的磷酸酪氨酸连接处。--类型:判断题

--答案:105.正确。

酵母中的拓扑异构酶Ⅱ突变体能够进行DNA复制,但是在有丝分裂过程中它们的染色体不能分开。--类型:判断题

--答案:106.正确。

靠依赖于DNA的DNA聚合酶所进行的DNA复制要求有作为一个引发物的游离3’—0H的存在。游离的3’—0H可以通过以下三种途径获得:合成一个RNA引物、DNA我引发的或者一个末端蛋白通过磷酸二酯键共价结合到一个核苷酸。--类型:判断题

--答案:107.正确。

当DNA两条链的复制同时发生时,它是由一个酶复合物:DNA聚合酶Ⅲ负责的,真核生物的复制利用3个独立作用的DNA聚合酶,Polδ的一个拷贝(为了起始)和Polδ的两个拷贝(DNA多聚体化,当MFl将RNA引发体移去之后填入).--类型:判断题

--答案:108.正确。

从oriλ开始的噬菌体复制的起始是被两个噬菌体蛋白O和P所控制功,在大肠杆菌E.coli中O和P是DnaA和DnaC蛋白的类似物。基于这种比较,O蛋白代表一个解旋酶而P蛋白调节解旋酶和引发酶结合。--类型:判断题

--答案:109.错误。

描述Meselson-Stahl试验,说明这一实验加深我们对遗传理解的重要性。--类型:简答题

--答案:110.答:在1958年,Meselson—Stahl实验证实了复制是半保留的。事实上,这一实验证实了两种假说:①复制需要两条DNA链的分离(即解链,变性);②通过以亲本作为模板,新合成的DNA链存在于两个复制体中。采用密度梯度离心可以区分碳13和氮15标记的DNA链(重链)与碳12和氮14标记的DNA链(轻链)。第一代合成的DNA分子的密度都介于重链与轻链之间。这一发现证实了复制忠实性的机制,对于认识遗传的本质是相当重要的。

请列举可以在线性染色体的末端建立线性复制的三种方式。--类型:简答题

--答案:111.答:通过以下方式可以在线性染色体的末端建立线性复制:(1)染色体末端的短重复序列使RNA聚合酶(端粒酶)引发非精确复制;(2)末端蛋白与模板链的5’末端共价结合提供核苷酸游离的3’末端。(3)通常,通过滚环复制,DNA双链发生环化后被切开,产生可被延伸的游离3’-0H末端。

为什么一些细菌完成分裂的时间比细菌基因组的复制所需的时间要少?为什么在选择营养条件下,E.coli中可以存在多叉的染色体或多达4个以上的开环染色体拷贝,而正常情况下染色体是单拷贝的?--类型:简答题

--答案:112.答:单拷贝复制是由每个细胞中复制起点的浓度控制的。在适宜的营养条件下,细胞呈现快速生长,这样会稀释起始阻遏物的浓度,使复制连续进行。这使细胞在分裂周期结束之前起动复制。

在DNA聚合酶Ⅲ催化新链合成以前发生了什么反应?--类型:简答题--选择:

--答案:113答:DnaA(与每9个碱基重复结合,然后使13个碱基解链)、DnaB(解旋酶)和DnaC先于聚合酶Ⅲ与原核复制起点相互作用。由于复制是半保留的,后随链复制需要由引发体完成的多重复制起始,引发体由DnaG引发酶与依赖该系统的多种蛋白因子组成。

DNA复制起始过程如何受DNA甲基化状态影响?--类型:简答题

--答案:114.答:亲本DNA通常发生种属特异的甲基化。在复制之后,两个模板—复制体双链体是半甲基化的。因为半甲基化DNA对膜结合受体比对DnaA有更高的亲和力,半甲基化DNA不能复制,从而防止了成熟前复制(prematurereplication)。

请指出在oriC或фX型起点起始的DNA复制之间存在的重要差异.--类型:简答题

--答案:115.答:从体型起点开始复制需要额外的蛋白——Pri蛋白的参与,Pri蛋白指导在引物合成位点(即引发体装配位点——pas)合成引发体。oriC型起点的引发体只含有DnaG引发酶。

大肠杆菌被T2噬菌体感染,当它的DNA复制开始后提取噬菌体的DNA,发现一些RNA与DNA紧紧结合在一起,为什么?--类型:简答题

--答案:116.答:该DNA为双链并且正在进行复制。这些RNA片段是后随链复制的短引物序列。

DNA连接酶对于DNA的复制是很重要的,但RNA的合成一般却不需要连接酶。解释这个现象的原因。--类型:简答题

--答案:117.答:在DNA复制时,连接酶对于后随链的合成是重要的,因为它能将冈崎片段的5’端与它前面的另一条链的3’端连接起来。RNA的合成既能以DNA为模板(RNA聚合酶活性),又能以RNA为模板(RNA复制酶活性);相应的,先导链的合成沿着5’→3’方向进行,不需要连接酶。

曾经认为DNA的复制是全保留复制,每个双螺旋分子都作为新的子代双螺旋分子的模板。如果真是这样,在Meselso立和Stahl的实验中他们将得到什么结果?--类型:简答题

--答案:118.答:复制一代后一半为“重链”,一半为“轻链”。两代后,四分之一为“重链”,四分之三为“轻链”(图A3.1):

--答案图片:picture--a3.1.jpg

描述Matthew和Franklin所做的证明DNA半保留复制的实验.--类型:简答题

--答案:119.答:实验结果示于图A3.2(1)将大肠杆菌在氮15培养基中经多代培养,得到的DNA两条链都被标记形成“重链”。(2)细胞移到氮14中,这样新产生的链都被标记为“轻链”。(3)选择不同时间,从氮14培养基中取出细胞,提取DNA。(4)将DNA溶解在氯化铯溶液中,100000g离心。这就是现在的密度梯度离心。(5)经过若干小时的离心,达到平衡,此时扩散力恰好与离心力平衡。这样,DNA在离心管聚集成带,每条带的密度均与该点的氯化铯溶液的密度相同。(6)照相决定每条带的位置和所含的DNA量。他们发现:①经氮15培养基培养,所有的DNA都聚集在一条重带。②在14氮培养基中培养一代后,所有的DNA形成一条中间密度的带,位于纯氮14一DNA和纯氮15—DNA形成的带之间。如果认为复制是半保留的,每一个子代分子中含有一条旧的重带和一条新的轻带,那么与这个实验结果相符。②在14氮中继续培养一代,子代DNA中的一半是中间密度,另一条则是轻带,该结果又可由DNA的半保留复制预测到。在以后的样品中,中间密度的DNA的比例恰如预期一样逐渐减少。④最后,他们有力地证明第一代的分子是双链且为半保留复制。他们成功地用加热来自第一代杂交DNA的方法使分子变性,分成两条单链后离心,发现有一条“重”’带和一条“轻”带。

--答案图片:picture--a3.2.jpg

解释在DNA复制过程中,后随链是怎样合成的.--类型:简答题

--答案:120.答:因为DNA聚合酶只能朝着5’→3’的方向合成DNA,后随链不能象前导链那样总是朝着同一方向合成,滞后链是以大量独立片段的形式(冈崎片段)合成的,每个片段都是以5’→3’方向合成,这些片段最后连在一起形成一连续的多核苷酸链。每个片段都独立地被引发,聚合和连接(图A3.3)

--答案图片:picture--a3.3.jpg

描述滚环复制过程及其特征.--类型:简答题

--答案:121.答:仅是特定的环状DNA分子能以滚环方式进行复制,这个过程存在于某些噬菌体(包括λ噬菌体)的营养复制过程和接合质粒的转移复制过程中。滚环复制的发生如A3.4所示。

--答案图片:picture--a3.4.jpg

E.coliOH157生长得特别快。在正常(较差的环境)条件下,这些菌60一70分钟后分裂表明复制和细胞的分裂是连续的过程,一个仅在另一个完成后才起始。假如有机会生长在一个多汁的暖和的牛肉饼上,加倍的时间接近20分钟,这比复制过程所需的标准时间快l倍。请解释原因。详细描述原核生物中DNA的复制过程(如:结构和功能特征及一系列过程)。涉及多基因组拷贝的复制却没有发生碰撞,其复制机制如何?--类型:分析题

--答案:122.答:这种情况在现有循环完成之前需要新一轮的复制起始,产生多个相互连接的复制子。这将缩短二分裂到胞质分裂所需的时间。像大肠杆菌这样的细胞,该过程大约需要20分钟(复制需要40分钟)。在恶劣条件下,二分裂需要60—70分钟。多个基因组拷贝复制不会发生碰撞的主要原因在于复制过程是从5’→3’进行,大肠杆菌是环状基因组。DNA修饰和聚合的方向对于防止复制、转录和翻译机制之间的相互碰撞同样也很关键。

图3.1中的DNA片段两端为双链,中间为单链,上面一条链的极性已标出。(1)下面一条链中所示的磷酸所连的是片段的5'端还是3'端?(2)能设想在细胞中这个缺口怎样在DNA修复过程中被修复的?(3)如果缺口在含有脱氧核苷三磷酸和DNA聚合酶的无细胞系统中被修复,那么底部那条链将包括几个片段?--类型:分析题

--答案:123.答:(1)所示磷酸(P)是在它所连片段的5’末端。(2)切口会通过连续DNA修复合成填上,从底部链所示的—OH开始,沿5’→3’方向进行,直到到达相邻片段的磷酸基团部位。(3)在缺少DNA连接酶时,缺口填上后,底部链中的两个片段仍不能相连。

--题目图片:picture--p3.1.jpg

除了聚合作用外,DNA聚合酶I还具有3’→5’校正核酸外切酶的活性,在把错配碱基从新合成DNA链末端切去的校正过程中发挥作用。为了鉴定这种活性,你制备了人工合成的po1yA链和po1yT链作为底物,其中po1yT链上含一段磷32标记的dT残基同时其3’端还连了几个3H标记的dC残基,如图3.2所示。分别统计在没有任何dTTP存在,DNA不可能合成以及有dTTP存在,DNA可以合成的两种情况下,标记dT和dC残基的

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