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PAGEPAGE17专题24微生物的利用探考情悟真题【考情探究】考点考向要求5年考情预料热度考题示例素养要素难度1微生物的培育培育基与纯化培育试验与探究2024课标全国Ⅱ,37,15分科学探究、社会责任中★★★2微生物的分别与计数微生物的分别与计数2024课标全国Ⅰ,37,15分中★★★分析解读本专题包括微生物的培育,特定微生物的纯化、计数等内容。试题情境贴近生活、生产,考查利用所学生物学问解决实际问题的实力,如利用选择培育基筛选目标微生物,以制备特定产品、治理污染等。也有与传统发酵技术内容融合考查,试题难度适中。复习时应留意:熟记微生物培育、纯化基础学问,通过剖析典型例题,构建微生物培育、筛选、计数题型的解题模板。
【真题探秘】破考点练考向考点一微生物的培育【考点集训】考向培育基与纯化培育1.(2025届甘肃天水一中月考,37,15分)炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者,可依据噬菌体的宿主专一性,通过试验确诊。(1)细菌培育:采集疑似患者的样本,分别培育,获得可疑菌落。(2)细菌鉴定:试验流程如图所示。①对配制的液体培育基等需实行法进行灭菌;试验所用液体培育基的碳源为(选填“无机碳”或“有机碳”)。
②选择可疑菌落制片后,用视察,可看到呈竹节状排列的杆菌。
③接种可疑菌后,35℃培育24小时,液体培育基变浑浊,缘由是。比照组试管中应加入,与试验组同时培育6小时后,若试验组液体培育基的浑浊度比比照组(选填“高”或“低”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则解除。
④对解除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有。
答案(2)①高压蒸汽灭菌有机碳②显微镜③细菌大量繁殖等量生理盐水低④吞噬细胞、效应B细胞(或浆细胞)2.(2024新疆乌鲁木齐质检,37,7分)有机物M是一种难降解的有害污染物。科研人员利用有机物M、磷酸盐、镁盐以及一些微量元素配制的培育基,胜利筛选出了能有效降解有机物M的细菌。试验的流程如图所示。请分析回答问题:(1)培育基中加入有机物M的目的是筛选,这种培育基属于培育基。
(2)目的菌生长所须要的碳源来自培育基中的,试验中须要振荡培育,由此推想该菌的细胞呼吸类型是。
(3)培育一段时间后,应选择培育液中有机物M含量的培育瓶,将其中的细菌转为固体培育,图中采纳了法接种,培育后可获得单个菌落。
(4)试验结束后,运用过的培育基应当进行处理后才能倒掉。
答案(1)能降解有机物M的细菌选择(2)有机物M好氧型(或需氧型)(3)最少平板划线(4)灭菌(或无害化)考点二微生物的分别与计数【考点集训】考向微生物的分别与计数1.(2025届河北、安徽名校联盟联考,36,15分)黄曲霉素是由黄曲霉和寄生曲霉等产生的代谢产物,具有极强的毒性和致癌性,主要污染粮油及其制品,科研人员用黄曲霉素B1(AFB1)的结构类似物——香豆素(C9H6O2)筛选出能高效降解AFB1的菌株。请回答下列问题:(1)为了筛选到AFB1降解菌,常从霉烂的花生、玉米和棉花中采样,缘由可能是
。
(2)筛选AFB1降解菌时,培育基中唯一的碳源是,加入琼脂的目的是。接种后,培育基中AFB1降解菌的数量会渐渐。
(3)菌体对有机物的降解途径有胞外分泌物降解和菌体吸附降解两种,试验小组对降解菌的发酵液进行离心,分别用上清液和沉淀物制成的菌悬液降解AFB1,发觉上清液中AFB1的残留率明显低于菌悬液。①分析以上信息可知,菌体降解AFB1的途径主要是。
②经检测发觉上清液中存在多种蛋白质,请设计试验验证蛋白质K是降解AFB1的有效成分,要求简要写出试验思路和预期结果(试验材料:培育过降解菌的上清液、蛋白质K水解酶、含AFB1的培育液)。答案(1)霉烂的花生、玉米和棉花中富含AFB1,可能含有较多的AFB1降解菌(2)香豆素作为凝固剂,制备固体培育基增多(3)①胞外分泌物降解②试验思路:取两试管编号甲、乙,分别加入等量的培育过降解菌的上清液,甲组加入适量的蛋白质K水解酶,乙组不作处理,一段时间后将甲、乙组培育液分别加入含AFB1的培育液中,一段时间后检测AFB1含量(说明:写出试验组和比照组)预期结果:甲组的AFB1未被降解,乙组的AFB1被降解(或甲组AFB1的降解率小于乙组)2.(2025届四省八校联考,37,15分)某探讨小组对自来水和污染河水水样中的大肠杆菌含量进行了测定。回答下列问题。(1)检测自来水中大肠杆菌的数量,可选用伊红美蓝培育基。该培育基除了为大肠杆菌的生长、繁殖供应水和氮源外,还要供应两类基本养分成分;制备该培育基时应在灭菌之(填“前”或“后”)调整pH至7.6,以满意大肠杆菌生长的要求;该培育基中加入伊红美蓝的作用是。
(2)探讨小组运用“滤膜法”对污染严峻的河流水体进行大肠杆菌活菌数的测定,需将水样进行适当稀释,如取水样1mL加入mL无菌水制备稀释倍数为10倍的稀释液,并照此依次制备更高倍数的稀释液。取每个稀释倍数的菌液5mL进行过滤,然后将滤膜放置在伊红美蓝培育基上培育。假如经过培育后,稀释倍数为103倍对应的4个平板上菌落数分别为43、47、42、48个,那么每升河水约含大肠杆菌个。
(3)用上述方法统计样本中菌落数时须要设置比照组。若在调查中,某一试验组平板上菌落数平均数为46个/平板,而空白比照组的一个平板上出现了6个菌落,请分析说明空白比照组出现菌落的可能缘由:(答出三点即可)。若将40(即46-6)个/平板作为试验组菌落数的平均值进行计算,则该做法(填“正确”或“不正确”)。
答案(1)碳源和无机盐(答不全不得分)前使大肠杆菌的菌落呈现黑色,便于对大肠杆菌计数(2)99×106(3)培育基灭菌不合格、倒平板过程被污染、培育皿灭菌不合格等不正确【五年高考】A组统一命题·课标卷题组1.(2024课标全国Ⅰ,37,15分)已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解,会造成环境污染。某小组用三种培育基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。Ⅰ号培育基:在牛肉膏蛋白胨培育基中加入X(5g/L)。Ⅱ号培育基:氯化钠(5g/L),硝酸铵(3g/L),其他无机盐(适量),X(15g/L)。Ⅲ号培育基:氯化钠(5g/L),硝酸铵(3g/L),其他无机盐(适量),X(45g/L)。回答下列问题。(1)在Ⅰ号培育基中,为微生物供应氮源的是。Ⅱ、Ⅲ号培育基中为微生物供应碳源的有机物是。
(2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培育基中,培育一段时间后,不能降解X的细菌比例会,其缘由是。
(3)Ⅱ号培育基加入琼脂后可以制成固体培育基,若要以该固体培育基培育目标菌并对菌落进行计数,接种时,应采纳的方法是。
(4)假设从Ⅲ号培育基中得到了能高效降解X的细菌,且该菌能将X代谢为丙酮酸,则在有氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长供应和。
答案(1)牛肉膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的细菌能够增殖(3)稀释涂布平板法(4)能量合成其他物质的原料2.(2024课标全国Ⅱ,37,15分)物质W是一种含氮有机物,会污染土壤。W在培育基中达到肯定量时培育基表现为不透亮。某探讨小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌(目标菌)。回答下列问题。(1)要从土壤中分别目标菌,所用选择培育基中的氮源应当是。
(2)在从土壤中分别目标菌的过程中,发觉培育基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落(如图所示)。假如要得到目标菌,应当选择菌落进一步纯化,选择的依据是。
(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计试验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源,请简要写出试验思路、预期结果和结论,即。
(4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌,使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。为了比较酶E与自然酶降解W实力的差异,该小组拟进行如下试验,请完善相关内容。①在含有肯定浓度W的固体培育基上,A处滴加含有酶E的缓冲液,B处滴加含有相同浓度自然酶的缓冲液,C处滴加,三处滴加量相同。
②一段时间后,测量透亮圈的直径。若C处没有出现透亮圈,说明;若A、B处形成的透亮圈直径大小相近,说明。
答案(1)W(2)乙乙菌落四周出现透亮圈,说明乙菌能降解W(3)将甲、乙菌分别接种在无氮源培育基上,若细菌能生长,则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源(4)①缓冲液②缓冲液不能降解W酶E与自然酶降解W的实力相近3.(2024课标全国Ⅲ,37,15分)回答下列与细菌培育相关的问题。(1)在细菌培育时,培育基中能同时供应碳源、氮源的成分是(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常,制备培育基时要依据所培育细菌的不同来调整培育基的pH,其缘由是。硝化细菌在没有碳源的培育基上(填“能够”或“不能”)生长,缘由是。
(2)用平板培育细菌时一般须要将平板(填“倒置”或“正置”)。
(3)单个细菌在平板上会形成菌落,探讨人员通常可依据菌落的形态、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,缘由是。
(4)有些运用后的培育基在丢弃前须要经过处理,这种处理可以杀死丢弃物中全部的微生物。
答案(1)蛋白胨不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同能够硝化细菌可以利用空气中的CO2作为碳源(2)倒置(3)在肯定的培育条件下,不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征(4)灭菌4.(2024课标全国Ⅰ,37,15分)将马铃薯去皮切块,加水煮沸肯定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入肯定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培育基。回答下列问题:(1)M培育基若用于真菌的筛选,则培育基中应加入链霉素以抑制的生长,加入了链霉素的培育基属于培育基。
(2)M培育基中的马铃薯浸出液为微生物生长供应了多种养分物质,养分物质类型除氮源外还有(答出两点即可)。氮源进入细胞后,可参加合成的生物大分子有(答出两点即可)。
(3)若在M培育基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培育,平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是,该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是
。
(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其缘由是
。
答案(1)细菌选择(2)碳源、无机盐蛋白质、核酸(3)碘液淀粉遇碘液显蓝色,产淀粉酶的菌落四周淀粉被水解,形成透亮圈(4)乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,结果的重复性差5.(2024课标全国Ⅱ,37,15分)在生产、生活和科研实践中,常常通过消毒和灭菌来避开杂菌的污染。回答下列问题:(1)在试验室中,玻璃和金属材质的试验器具(填“可以”或“不行以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
(2)牛奶的消毒常采纳巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是。
(3)密闭空间内的空气可采纳紫外线照耀消毒,其缘由是紫外线能。在照耀前,适量喷洒,可强化消毒效果。
(4)水厂供应的自来水通常是经过(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。
(5)某同学在运用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的缘由是。
答案(1)可以(2)在达到消毒目的的同时,养分物质损失较少(3)破坏DNA结构消毒液(4)氯气(5)未将锅内冷空气排尽6.(2024课标全国Ⅲ,37,15分)回答下列与酵母菌有关的问题:(1)分别培育酵母菌通常运用(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培育基,该培育基应采纳灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培育一段时间后可视察到菌落,菌落的含义是。
(2)酵母菌液体培育时,若通入氧气,可促进(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”);若进行厌氧培育,可促进(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)。
(3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加肯定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的缘由是。
答案(1)麦芽汁琼脂高压蒸汽由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体(2)菌体快速增殖乙醇产生(3)酵母菌分解葡萄糖会产生CO2,CO2使面包松软7.(2024课标全国Ⅰ,37,15分)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物汲取和利用。回答下列问题:(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,缘由是前者能产生。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,缘由是。但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是(答出两点即可)。
(2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培育基时,应选择(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的缘由是。
(3)用来筛选分解尿素细菌的培育基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有(答出两点即可)。
答案(1)脲酶分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动供应能量,为其他有机物的合成供应原料(2)尿素其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用(3)为细菌生长供应无机养分,作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定8.(2024课标全国Ⅲ,39,15分,0.24)某同学用簇新的泡菜滤液为试验材料分别纯化乳酸菌。分别纯化所用固体培育基中因含有碳酸钙而不透亮,乳酸菌产生的乳酸能溶解培育基中的碳酸钙。回答下列问题:(1)分别纯化乳酸菌时,首先须要用对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是。(2)推想在分别纯化所用的培育基中加入碳酸钙的作用有和。分别纯化时应选择出的菌落作为候选菌。
(3)乳酸菌在-20℃长期保存时,菌液中常须要加入肯定量的(填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”)。
答案(1)无菌水(2分)泡菜滤液中菌的浓度高,干脆培育很难分别得到单菌落(3分)(2)鉴别乳酸菌中和产生的乳酸(或酸)(每空3分,共6分)具有透亮圈(2分)(3)甘油(2分)9.(2024课标全国Ⅰ,39,15分,0.6127)已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题:(1)显微视察时,微生物A菌体中的油脂通常可用染色。微生物A产生的油脂不易挥发,可选用(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。
(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以为碳源的固体培育基进行培育。
(3)若要测定培育液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用干脆计数;若要测定其活菌数量,可选用法进行计数。
(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg,则上述三个温度中,℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕℃设计后续试验。
答案(1)苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)萃取法(每空2分,共4分)(2)油脂(3分)(3)血细胞计数板稀释涂布平板(每空2分,共4分)(4)4540(每空2分,共4分)老师用书专用10.(2024课标全国Ⅰ,39,15分)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将分解成。
(2)在含纤维素的培育基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成色复合物。用含有CR的该种培育基培育纤维素分解菌时,培育基上会出现以该菌的菌落为中心的。
(3)为从富含纤维素的土壤中分别获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培育基(成分见下表):酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培育基甲++++-++培育基乙+++-+++注:“+”表示有,“-”表示无。据表推断,培育基甲(填“能”或“不能”)用于分别和鉴别纤维素分解菌,缘由是;培育基乙(填“能”或“不能”)用于分别和鉴别纤维素分解菌,缘由是。
答案(1)纤维二糖葡萄糖(2)红透亮圈(3)不能液体培育基不能用于分别单菌落不能培育基中没有纤维素,不会形成CR—纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌11.(2024课标全国Ⅱ,39,15分,0.5527)为了调查某河流的水质状况,某探讨小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分别等工作。回答下列问题:(1)该小组采纳稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培育了一段时间,这样做的目的是;
然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培育后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为。
(2)该小组采纳平板划线法分别水样中的细菌。操作时,接种环通过灭菌,在其次次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端起先划线。这样做的目的是。
(3)示意图A和B中,表示的是用稀释涂布平板法接种培育后得到的结果。
(4)该小组将得到的菌株接种到液体培育基中并混匀,一部分进行静置培育,另一部分进行振荡培育。结果发觉:振荡培育的细菌比静置培育的细菌生长速度快。分析其缘由是:振荡培育能提高培育液中的含量,同时可使菌体与培育液充分接触,提高的利用率。
答案(15分)(1)检测培育基平板灭菌是否合格3.8×107(每空2分,共4分)(2)灼烧(2分)将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3分)(3)B(2分)(4)溶解氧养分物质(每空2分,共4分)12.(2013课标全国Ⅱ,39,15分,0.5633)临床运用抗生素前,有时须要做细菌耐药试验。试验时,首先要从病人身上获得少量样本,然后依据肯定的试验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题:(1)为了从样本中获得致病菌单菌落,可用法或法将样本接种于固体培育基表面,经过选择培育、鉴别等步骤获得。
(2)取该单菌落适当稀释,用法接种于固体培育基表面,在37℃培育箱中培育24h,使其匀称生长,布满平板。
(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片匀称置于该平板上的不同位置,培育一段时间后,含A的滤纸片四周出现透亮圈,说明该致病菌对抗生素A;含B的滤纸片四周没有出现透亮圈,说明该致病菌对抗生素B;含C的滤纸片四周的透亮圈比含A的小,说明;
含D的滤纸片四周的透亮圈也比含A的小,且透亮圈中出现了一个菌落,在解除杂菌污染的状况下,此菌落很可能是抗生素D的。
(4)依据上述试验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素。
答案(15分)(1)划线稀释涂布(或涂布)(每空2分,共4分)(2)涂布(1分)(3)敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A的弱耐药菌(每空2分,共8分)(4)A(2分)13.(2011课标,39,15分)有些细菌可分解原油,从而消退由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培育基上。从功能上讲,该培育基属于培育基。
(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采纳的接种方法有两种,即和。
(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落四周分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解实力。
(4)通常状况下,在微生物培育过程中,试验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。无菌技术要求试验操作应在酒精灯旁边进行,以避开四周环境中微生物的污染。
答案(1)原油选择(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰14.(2009全国Ⅱ,33,10分)利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆,具有广袤的应用前景。但现有野生菌株对淀粉的转化效率低,某同学尝试对其进行改造,以获得高效菌株。(1)试验步骤:①配制(固体、半固体、液体)培育基,该培育基的碳源应为。
②将接入已灭菌的培育基平板上。
③马上用适当剂量的紫外照耀,其目的是。
④菌落形成后,加入碘液,视察菌落四周培育基的颜色改变和改变范围的大小,四周出现现象的菌落即为初选菌落。经分别、纯化后即可达到试验目的。
(2)若已得到二株变异菌株Ⅰ和Ⅱ,其淀粉转化率较高。经测定菌株Ⅰ淀粉酶的催化活性高,菌株Ⅱ的淀粉酶蛋白含量高。经进一步探讨发觉,突变发生在淀粉酶基因的编码区或非编码区,可推想出菌株Ⅰ的突变发生在区,菌株Ⅱ的突变发生在区。
答案(1)①固体玉米淀粉②野生菌株③对野生菌株进行诱变④浅色范围大(2)编码非编码B组自主命题·省(区、市)卷题组1.(2024江苏单科,31,8分)酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培育,这样既可削减污染又可降低生产成本。探讨人员拟从土壤样品中分别该类酵母,并进行大量培育。下图所示为操作流程,请回答下列问题:(1)配制培育基时,依据培育基配方精确称量各组分,将其溶解、定容后,调整培育基的,刚好对培育基进行分装,并进行灭菌。
(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培育皿中,在步骤③中将温度约(在25℃、50℃或80℃中选择)的培育基倒入培育皿混匀,冷凝后倒置培育。
(3)挑取分别平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有。
a.为保证无菌操作,接种针、接种环运用前都必需灭菌b.划线时应避开划破培育基表面,以免不能形成正常菌落c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量d.可以通过逐步提高培育基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株(4)步骤⑤中,为使酵母数量快速增加,培育过程中需保证足够的养分和供应。为监测酵母的活细胞密度,将发酵液稀释1000倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数,理论上色细胞的个数应不少于,才能达到每毫升3×109个活细胞的预期密度。
答案(8分)(1)pH高压蒸汽(湿热)(2)50℃(3)a、b、d(4)氧气无302.(2024江苏单科,31,7分)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严峻危害。小明同学打算依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分别筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题:(1)酚降解菌富集培育基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有。
(2)将采集到的样品接种培育,苯酚用量应随转接次数增加而渐渐,以达到富集酚降解菌的目的。若如图平板中菌落过于密集,应进一步,以便于菌落计数与分别。制备平板培育基时除了须要水、养分物质外,还必需添加。
(3)如图为连续划线法示意图,在图中(填图中序号)区域更易获得单菌落。
(4)采纳比色测定法(运用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为。
管号123456苯酚浓度(mg/L)1假如废水为50mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释(填序号:①5②10③20)倍后,再进行比色。
答案(7分)(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀释涂布凝固剂(3)③(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8③【三年模拟】时间:30分钟分值:70分非选择题(共70分)1.(2025届河南中原名校二联,1)(10分)纤维素酶是一种重要的酶产品,目前关于常温柔高温纤维素酶菌株探讨较多,但有些地方气温低,须要产低温纤维素酶菌株。某试验小组通过试验室微生物筛选方法,筛选到了低温纤维素分解菌,请回答下列问题:(1)纤维素分解菌是能产生纤维素酶的微生物,纤维素酶是复合酶,至少包括和葡萄糖苷酶。纤维素分解菌也能以葡萄糖为碳源,但是试验室中培育纤维素分解菌的培育基一般选用纤维素而不选用葡萄糖为碳源,培育基不选用葡萄糖作为碳源的缘由是。
(2)自然界中很多真菌能产生胞外纤维素分解酶,其分解纤维素的实力远远高于细菌,真菌与细菌相比结构上的显著特点是。若要分别出低温条件下能分解纤维素的真菌,为了防止其他微生物的繁殖,可实行的措施是(至少答出两点)。
(3)为便利鉴定、筛选和计数,将菌液接种到培育基上的一般方法为。
答案(10分,除注明外,每空2分)(1)C1酶、CX酶(1分)微生物普遍可利用葡萄糖作为碳源,用葡萄糖作为碳源,其他微生物也可大量繁殖,易造成杂菌污染(2)具有以核膜为界限的细胞核在低温环境下培育,培育基以纤维素为唯一碳源,培育基中加入肯定量的抗生素(4分,回答出两项即可)(3)稀释涂布平板法(1分)2.(2025届西南名校联盟联考,37)(15分)微生物连续培育时,一部分旧的培育基以肯定的速度流出,同时不断有等量的簇新培育基流入以保证微生物对养分物质的须要。探讨人员将JA122大肠杆菌接种到葡萄糖含量受到限制的培育基中,连续培育多代,然后取样分析培育基中存在的新菌株。请回答下列问题:(1)用于连续培育JA122大肠杆菌的培育基从物理性质看属于培育基,大肠杆菌与酵母菌在结构上的主要区分是大肠杆菌。
(2)样品中共发觉CV101、CV103、CV116三种新菌株,产生新菌株的缘由是JA122大肠杆菌发生了。
(3)对三种菌株的代谢差异进行分析发觉,CV103对葡萄糖汲取率最高,代谢终产物是醋酸盐。进一步探讨表明,CV101可以在培育过CV103的培育基过滤液中生长,据此作出推想:CV101菌株能以CV103菌株产生的醋酸盐为碳源。请设计并完成下列试验步骤,来验证以上观点。①配制的固体培育基(A组)和不含碳源的固体培育基(B组);
②将等量的适量稀释的CV101菌液分别接种到A、B培育基中培育一段时间,并视察记录菌株的生长状况。试验过程应在条件下进行。
③预期试验结果:。
答案(15分)(1)液体(2分)无以核膜为界限的细胞核(2分)(2)基因突变(2分)(3)①以醋酸盐为唯一碳源(3分)②无菌(3分)③A组菌株生长(形成菌落),B组菌株不能生长(无菌落)(3分)3.(2024陕西榆林二模,37)(15分)请回答有关微生物培育、应用和保存以及物质提取的问题:(1)微生
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