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文档简介
PAGE14-微生物的选择培育和计数【合格考全员做】(学业水平一、二)1.下列能选择出分解尿素的细菌的培育基是()A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、蒸馏水B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、蒸馏水C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、蒸馏水D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、蒸馏水2.探讨人员通过对大肠杆菌进行基因改造,可以使其不仅能以传统生物能源技术中运用的蔗糖为原料,还能以广泛存在于植物纤维中的半纤维素为原料,分解产生燃料物质。若要将这种大肠杆菌分别出来,应将它们接种在()A.不含氮源的培育基上B.含有蛋白胨的固体培育基上C.只含半纤维素而无其他碳源的选择培育基上D.不含养分要素的培育基上3.用纸片扩散法测定某病原菌对各种抗生素敏感性的试验,是在某病原菌匀称分布的平板上,铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培育。图示为培育的结果,其中抑菌圈是在纸片四周出现的透亮区域。下列分析正确的是()A.在图示固体培育基上可用平板划线法或稀释涂布平板法接种病原菌B.未出现抑菌圈可能是病原菌与抗生素接触后发生抗性变异C.形成的抑菌圈较小的缘由可能是微生物对药物较敏感D.不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对试验结果造成影响4.测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培育,而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释,其缘由是()A.细菌个体小,真菌个体大B.细菌易稀释,真菌不易稀释C.细菌在土壤中的数量比真菌多D.随机的,没有缘由5.下列关于产纤维素酶菌分别及运用的叙述,不合理的是()A.筛选培育基中应含有大量的葡萄糖或蔗糖B.可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌C.在分别平板上长出的菌落需进一步确定其产纤维素酶的实力D.用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆可提高其饲用价值6.下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分别与计数”试验的叙述,错误的是()A.该试验须要设置空白比照组,以检验培育基是否受到杂菌污染B.分解尿素的细菌能产生脲酶,脲酶能分解尿素产生氮气C.统计尿素分解菌的数目时,以菌落数为30~300的平板进行计数D.该试验所用培育基应以尿素作唯一氮源7.下图为从土壤中分别纯化尿素分解菌的过程。下列有关叙述错误的是()A.①②③④培育基都应以尿素为唯一氮源B.图中所用培育基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌C.①~③过程是梯度稀释,稀释溶剂是无菌水D.可用酚红染料鉴定,菌落四周是否出现红色圈8.若某一稀释度下,平板上生长的平均菌落数为90个,涂布平板时所用的稀释液体积为0.1mL,稀释液的稀释倍数为105,则每克样品中的活菌数约为()A.9×108个B.9×107个C.9×105个D.9×106个9.某生物爱好小组,进行土壤中尿素分解菌的分别和计数试验。请回答下列问题。(1)试验原理:尿素是一种重要的农业氮肥,但它并不能干脆被农作物汲取,须要转变成NH3,才能被汲取,这个转变依靠于土壤中能产生________的微生物的作用。(2)试验步骤。①配制培育基(成分:葡萄糖、Na2HPO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O、尿素、Y、H2O、琼脂),并制作无菌平板。②设置________________组和若干试验组,进行相关操作。③将各组平板置于恒温箱中培育一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。a.为了更好地鉴别出此类微生物,在培育基配方中加入了Y,Y是____________。b.为了对试验的结果进行进一步统计,须要用____________法进行接种。详细状况如下图所示。c.恒温培育48小时后,在稀释倍数为105下,平板上的菌落数目在30~300之间,小组成员进行统计,应留意统计四周为________菌落。统计三个平板上的菌落数目,分别为68、73、87,则每克土样中尿素分解菌的活菌数约为________。(3)试验结果分析。爱好小组的同学在统计菌落数目时,除了上述统计的菌落外,还发觉有些菌落四周的培育基没有改变,试分析这些菌落产生的可能缘由(答出一点即可)。________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。【等级考选学做】(学业水平三、四)10.漆酶属于木质降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分别、纯化和保存漆酶菌株的过程,下列相关叙述错误的是()A.生活污水中含有大量微生物,是分别产漆酶菌株的首选样品B.筛选培育基中须要加入漆酶的底物,通过菌落特征挑出产漆酶的菌落C.在涂布平板上长出的菌落,再通过划线进一步纯化D.在相宜温度下,接种后的斜面培育基上菌落长成后,可在低温下临时保存菌株11.有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期运用会污染环境。探讨发觉,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分别降解苯磺隆的菌株和探究其降解机制的试验过程如图甲、乙所示。下列说法正确的是()A.该试验所用的选择培育基可以用苯磺隆、蔗糖等作为碳源B.本试验的目的是探究能降解苯磺隆的物质是否为该菌种所产生的蛋白质C.在微生物的接种试验中,用95%的酒精对试验者的双手和超净工作台进行消毒D.该试验中,采集的土壤样品经高温灭菌后,可以用于制取土壤稀释液12.(多选)勤洗手是预防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠状病毒期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果,探讨人员检测了用凝胶洗手前后手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程见下图。下列叙述错误的是()A.统计洗手前手部细菌的数量,选择的接种方法是平板划线法B.除图中操作外,还须要设置一组未接种的空白培育基进行培育C.培育基上的一个菌落只可能来源于样品稀释液中的一个活菌D.初步推断培育基上菌种的类型,须要用显微镜视察菌体的形态13.(多选)自然界存在着可以降解苯酚的微生物,探讨人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株,筛选的主要步骤如下图所示,①为土壤样品。下列相关叙述正确的是()A.运用平板划线法可以在⑥上获得单菌落B.假如要测定②中的活菌数,常采纳稀释涂布平板法C.图中②培育目的菌的选择培育基中应加入苯酚作为唯一碳源D.微生物培育前,需对培育基和培育皿进行灭菌处理14.尿素是一种重要的农业肥料,经微生物分解后能更好地被植物利用。某生物爱好小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计试验并胜利筛选到能高效分解尿素的细菌(目的菌)。培育基成分如下表所示,将表中物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL。成分KH2PO4NaHPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素琼脂含量/g1.42.10.210115试验过程如下图所示。回答下列问题。(1)该培育基能筛选出目的菌的缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)图中将细菌转到固体培育基上接种时,采纳的方法是________________。初步筛选出来的菌种还须要进一步的鉴定:在培育基中加入________指示剂,接种并培育初步筛选的菌种,若指示剂变成________色,则可说明该菌种能够分解尿素。(3)在试验中,下列材料或用具须要灭菌的是________,须要消毒的是________(填序号)。①培育细菌的培育基与培育皿②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管③试验操作者的双手(4)试验结束后,运用过的培育基应当进行________处理后,才能倒掉。15.某种广泛运用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期运用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度肯定,该除草剂的培育基不透亮,培育皿中会残留少量无菌空气)。(1)制备土壤浸出液时,为避开菌体浓度过高,需将浸出液进行________处理。(2)要从长期运用该除草剂的土壤中分别目的菌,从物理性质、养分成分的角度要求上述培育基具备的特点是________________________________。若须要调整培育基pH,应当在各种成分都溶化后且分装________(填“前”或“后”)进行。对培育基进行灭菌,常采纳的方法是________________。(3)图中形成的菌落中,无透亮带菌落利用的氮源可能是________,有透亮带菌落利用的氮源主要是该除草剂,据此可筛选出目的菌。(4)若对活菌进行计数,常用的接种方法为________________。为了计数微生物的数量,一位同学在4个平板培育基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1mL,培育后菌落数目分别为155、160、176、149,则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量为__________。【素养养成练】16.土壤中含有能将难溶性磷酸盐转变成植物可以汲取利用的可溶性磷的优良解磷菌株Q。下图1表示制备固体培育基过程中的某操作,图2是科研人员从土壤中分别出菌株Q的部分过程示意图。(1)图1所示操作后,待培育基冷却凝固,然后________________,防止____________________________________。(2)图2所示接种方法是________________。在3个平板上分别接入0.1mL稀释液,经适当培育后,3个平板上菌落数分别是38、42、40个,则1g土壤中的活菌数约为________个。(3)固体培育基中难溶性磷酸盐在菌株Q的作用下溶解,会在菌落四周形成透亮圈(如图),透亮圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解难溶性磷酸盐的实力大小。下表是初步筛选出的三种优良解磷菌株。菌株透亮直径(D)菌落直径(d)M-3-0118.812.3B3-5-620.78.0T-4-019.16.5依据试验结果分析,溶解难溶性磷酸盐实力最强的菌株是________。课后分层检测案3微生物的选择培育和计数1.解析:在A项的培育基中既有尿素作为唯一氮源,又有其他各种成分,可以选择出分解尿素的细菌,而B项中无尿素作氮源,C项中缺少碳源,D项中有牛肉膏可供应氮源。答案:A2.解析:分析题干可知,改造后的大肠杆菌“能以广泛存在于植物纤维中的半纤维素为原料,分解产生燃料物质”,因此若要将这种大肠杆菌分别出来,应将它们接种在只含半纤维素而无其他碳源的选择培育基上。答案:C3.解析:图示固体培育基上采纳的接种方法应是稀释涂布平板法,A错误;病原菌发生抗性变异在与抗生素接触之前,B错误;微生物对药物较敏感形成的抑菌圈应较大,C错误;纸片所含的药物吸取平板中的水分溶解后,便不断向纸片四周区域扩散,不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对试验结果造成影响,D正确。答案:D4.解析:土壤中的微生物大约70%~90%是细菌,真菌的数量要比细菌少;样品的稀释度越高,在平板上生成的菌落数目就越少;在实际操作中,通常选用肯定稀释范围的样品液进行培育,以保证获得菌落数为30~300的适于计数的平板,所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。答案:C5.解析:应当用以纤维素为唯一碳源的培育基筛选纤维素分解菌,A错误;木材、秸秆中富含纤维素,故可以从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌,B正确;用以纤维素为唯一碳源的培育基筛选纤维素分解菌后,为了确定得到的是纤维素分解菌,还须要进行发酵产纤维素酶的试验,C正确;用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆,可以把纤维素分解成葡萄糖,提高饲用价值,D正确。答案:A6.解析:该试验须要设置空白比照组,以检验培育基是否受到杂菌污染,A正确;分解尿素的细菌能产生脲酶,将尿素分解为NH3,B错误;统计尿素分解菌的数目时,以菌落数为30~300的平板进行计数,求其平均值,C正确;以尿素为唯一氮源的培育基分别尿素分解菌,D正确。答案:B7.解析:尿素分解菌可以合成脲酶将尿素分解,因此要分别纯化尿素分解菌,培育基都应以尿素为唯一氮源,A正确;对培育基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法,B正确;①~③过程是选择培育,该过程用来选择培育尿素分解菌,因此培育基应当是以尿素为唯一氮源的培育基,而不是无菌水,C错误;分解尿素的菌能将尿素分解成NH3,使培育基碱性增加,pH上升,酚红指示剂会变红,因此可用酚红染料鉴定尿素分解菌,视察菌落四周是否出现红色圈,D正确。答案:C8.解析:每克样品中的菌落数=(90÷0.1)×105=9×107(个),即每克样品中的活菌数约为9×107个。答案:B9.解析:(1)尿素分解菌能产生脲酶将尿素分解成NH3,土壤中的尿素只有被分解成NH3后才能被植物汲取利用,因此可用以尿素为唯一氮源的培育基来分别尿素分解菌。(2)②为检验培育基是否受到杂菌污染,须要设置空白比照组。③a.细菌合成的脲酶将尿素分解成了NH3,NH3会使培育基的碱性增加,pH上升,因此可以通过检查培育基的pH改变来鉴别尿素分解菌的存在,在培育基配方中加入的Y可以是酚红指示剂。b.分析图示试验过程可知,该试验采纳了稀释涂布平板法进行接种,用于计数土壤稀释液中尿素分解菌的数量。c.当尿素分解菌产生的脲酶将尿素分解为NH3后,培育基pH上升,酚红指示剂会变红,因此应留意统计四周为红色的菌落。在稀释倍数为105下,三个平板的菌落数目分别为68、73、87个,因此每克土样中尿素分解菌的活菌数约为(68+73+87)÷3÷0.1×105=7.6×107(个)。(3)有些菌落四周的培育基没有改变,说明这些细菌不能产生脲酶,不能利用尿素作为氮源,而氮源为微生物生长所必需的,因此可推想可能存在固氮微生物,它们能利用空气中的氮气作为氮源,不能将培育基中的尿素分解成氨(不与指示剂作用),所以看到有些菌落产生而菌落四周的培育基没有改变。答案:(1)脲酶(2)②空白比照③a.酚红指示剂b.稀释涂布平板c.红色的7.6×107个(3)可能存在固氮微生物,它们能利用空气中的氮气作为氮源,不能将培育基中的尿素分解成氨(不与指示剂作用),所以看到有些菌落产生而菌落四周的培育基没有改变10.解析:生活污水中含有大量微生物,但不肯定含有产漆酶的菌株,A错误;筛选培育基中须要加入漆酶的底物,只有产漆酶的微生物才能在该培育基上生长,进而通过菌落特征挑出产漆酶的菌落,B正确;由图可知,在涂布平板上长出的菌落,再通过划线进一步纯化,C正确;在相宜温度下,接种后的斜面培育基上菌落长成后,可在低温下临时保存菌株,D正确。答案:A11.解析:选择培育基只允许特定种类的微生物生长,同时要抑制或阻挡其他种类微生物生长,因而必需以苯磺隆为唯一碳源只让目的菌生存繁殖,A错误;图乙上清液中加入的蛋白酶溶液是用于水解上清液中的某蛋白质的,由此可判定试验目的是探究目的菌是否通过分泌某种蛋白质来降解苯磺隆,B正确;在微生物接种时,需用70%的酒精对试验者的双手和超净工作台进行消毒,C错误;在分别土壤中目的菌的试验中,采集的土样经高温灭菌后,土样中的微生物被杀死,再制取土壤稀释液接种并培育,不会得到菌落,D错误。答案:B12.解析:平板划线无法得知稀释倍数,不能用于活菌计数,故统计洗手前手部细菌的数量,选择的接种方法是稀释涂布平板法,A错误;除图中操作外,还须要设置一组未接种的空白培育基进行培育,验证培育基是否被杂菌污染,B正确;由于当两个或多个细胞连在一起时,平板上视察到的只是一个菌落,故培育基上的一个菌落可能来源于样品稀释液中的一个或者几个活菌,C错误;由于菌落肉眼可见,故初步推断培育基上菌种的类型,可用肉眼视察菌落特征,D错误。答案:ACD13.解析:平板划线法可分别微生物,获得单菌落,A项正确;利用稀释涂布平板法可统计样品中的活菌数,B项正确;要筛选只能降解利用苯酚的细菌菌株,图中②培育目的菌的选择培育基中应加入苯酚作为唯一碳源,C项正确;微生物培育前,需对培育基和培育器皿进行灭菌处理,D项正确。答案:ABCD14.解析:(1)该培育基中不加其他氮素,只以尿素作为唯一氮源,在此培育基上只有能够产生脲酶将尿素分解的细菌(目的菌)才能获得氮源,而不能分解尿素的细菌将因缺少氮源无法生长繁殖,故能从众多微生物中筛选出能分解尿素的目的菌。(2)题图中采纳稀释涂布平板法将细菌接种到固体培育基上,以便于获得单菌落接着培育。分解尿素的细菌能合成脲酶,脲酶能将尿素分解成NH3,NH3会使培育基的碱性增加,因此在以尿素为唯一氮源的培育基中加入酚红指示剂培育细菌,若指示剂变红,可确定该种细菌能够分解尿素。(3)微生物培育试验中,须要对培育细菌用的培育基与培育皿,玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管进行灭菌处理;对试验操作者的双手进行消毒。故须要灭菌的是①②,须要消毒的是③。(4)试验结束后,运用过的培育基进行灭菌处理后,才能倒掉,避开污染环境。答案:(1)该选择培育基中的唯一氮源是尿素,只有能利用尿素的微生物才能生长(2)稀释涂布平板法酚红红(3)①②③(4)灭菌15.解析:(1)制备土壤浸出液时
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