人教版选修1-专题2-课题2-土壤中分解尿素的细菌的分离与计数-作业

专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数[学生用书P71(单独成册)]一、选择题1．土壤中的尿素分解菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成()A．尿素酶 B．脲酶C．蛋白酶 D．肽酶解析：选B。土壤中的尿素分解菌体内能够产生脲酶，脲酶能够将土壤中的尿素分解为氨。2．三个培养皿中分别加入10mL不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。培养36小时后，计算菌落数，结果如下表。下列选项不正确的是()培养皿培养基成分菌落数Ⅰ琼脂、葡萄糖35Ⅱ琼脂、葡萄糖、生长因子250Ⅲ琼脂、生长因子0A．该实验采用的是固体培养基B．该实验采用稀释涂布平板法接种C．Ⅰ和Ⅱ对照，说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D．Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要糖类解析：选C。Ⅰ与Ⅱ对照，Ⅰ缺少生长因子，菌落数少于Ⅱ，说明大肠杆菌的生长需要生长因子。3．(2019·山西太原高二期末)用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是()A．未接种的选择培养基B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D．接种了的选择培养基解析：选C。取稀释相同倍数的菌液，分别接种在牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基上，则前者生长的菌落数目应明显多于后者生长的菌落数目，因此，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基即为所需要的对照。设置对照实验应遵循单一变量原则，所以应与选择培养基一样进行接种、培养。4．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是()①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦解析：选C。分解尿素的细菌是异养微生物，因此培养基中应该加入有机碳源，如葡萄糖；分离分解尿素的细菌的培养基从功能上分属于选择培养基，应该以尿素为唯一氮源；从物理性质上分属于固体培养基，因此应加入凝固剂琼脂。5．(2019·四川彭州中学期中)苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。下列相关叙述错误的是()A．图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源B．如果要测定②中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法C．若图中④为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一碳源D．使用平板划线法可以在⑥上获得单菌落答案：C6．下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是()A．微生物培养前，需对培养基进行消毒B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源解析：选A。微生物培养前，需对培养基进行灭菌，而不是消毒；测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法；分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度以便能从中选择出菌落数在30～300间的平板进行计数；分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源。7．(2019·湖北沙市中学高二月考)下列需要在火焰旁操作的有()①土壤取样②称取土壤③稀释土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培养A．①②③④⑤ B．②③④⑤C．③④⑤ D．②③④答案：D8．(2019·海南中学期末)下列关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述，正确的是()A．培养基应以尿素为唯一氮源，该细菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B．选择菌落数在30～300间的所有平板进行计数，以平均数为实验结果C．要用所有的稀释液涂布平板，以便选择出菌落数在30～300间的平板D．应该设置对照以排除非测试因素对实验结果的干扰，提高可信度解析：选D。土壤中分解尿素的细菌为异养菌，硝化细菌是自养菌，其碳源为二氧化碳，故二者利用的碳源不同，A错误；同一稀释度下，选择菌落数在30～300间的平板进行计数，舍去数据相差较大的数据，以平均数为实验结果，B错误；取0.1mL稀释液涂布平板，选择菌落数在30～300间的平板进行计数，C错误；分离微生物时，需要设置不接种的培养基与实验组一起培养做空白对照，设置对照的目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的干扰，D正确。9．(2019·河北波峰中学高二月考)下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验中样品稀释示意图。据图分析下列叙述正确的是()A．3号试管的稀释倍数为103倍B．4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰好为5号试管的10倍C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数约为1.7×109个D．该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高答案：C二、非选择题10．(2019·甘肃兰州诊断)食品安全一直是世界各国最关注的话题之一，日前席卷全球的非洲猪瘟疫情还未降温，2月8日世界动物卫生组织(OIE)又报告称，以色列发生了山羊分歧杆菌疫情。某研究机构检测了导致山羊致病的微生物，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：(1)微生物接种最常用的两种方法是________________和________________。所用的培养基是________(填“固体”或“液体”)培养基，对培养基灭菌的方法是______________。(2)在5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品0.1mL，培养一段时间后，平板上的菌落数分别为48、50、54、56、430，则每升原菌液样品中细菌数为________个。如果用显微镜直接计数法对细菌进行计数时，所统计的细菌数通常会比稀释涂布平板法统计数目偏________，原因是________________________________________________________。(3)如果采用平板划线法分离细菌。操作时，划线四次一共需要灼烧接种环________次。第二次划线之前要灼烧接种环，目的是________________________的菌种。答案：(1)平板划线法稀释涂布平板法固体高压蒸汽灭菌法(2)5.2×108大显微镜直接计数法将活菌和死菌均计数在内(3)5杀死上次划线后接种环上残留(或杀死接种环上)11．(2019·广东云浮高二质检)在肉牛产业中，常在饲料中加入一定量的尿素，因其有瘤胃，在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物以尿素作为唯一氮源。某同学设计了如下实验，对能分解尿素的细菌进行分离和计数。分析并回答下列问题：(1)图中弧线箭头上“？”的具体操作是_____________________________________。(2)纯化菌种时为了得到单一菌落，常采用的接种方法是_______________________。(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________，培养后，若出现________色，说明其中含有能够分解尿素的细菌。(4)在实验中，当菌落数目稳定时，应选取________方法计数；研究者每隔24小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止__________________________________。答案：(1)挑出菌落(2)平板划线法、稀释涂布平板法(3)酚红指示剂红(4)平板计数因培养时间不足导致遗漏细菌菌落数目12．日前微博传言手机细菌比马桶多。如图，央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题：(1)该实验需制备________(填“固体”或“液体”)培养基，在液体培养基中加入________可配制成固体培养基。(2)据图，两电视台均采用______________法接种，接种前需要采用______________法对培养基进行灭菌。(3)通过观察菌落的________________以初步鉴定手机屏幕和马桶按钮上的生物类群。两电台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，你认为原因是：________________________________________________________________________。(4)按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为100倍的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为98、100、102，则该手机屏幕的细菌数为________个/cm2。该实验对照组要取培养基涂布________________进行培养。答案：(1)固体琼脂(2)稀释涂布平板高压蒸汽灭菌(3)形状、大小、隆起程度和颜色等手机的取样和马桶的取样都不相同(4)4×1040.1mL无菌水13．(2019·四川成都七中高二期中)下表为培养某种微生物的培养基配方，请回答下列有关问题：KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素蒸馏水1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g定容至1000mL(1)该培养基只允许分解尿素的细菌生长，这种培养基称为________培养基。(2)若要通过统计培养基中菌落数来估计样品中的细菌数，上述培养基中还需要添加的成分是________，接种时应采用________法。(3)从土壤中分离出分解尿素的细菌后，要对其做进一步的鉴定，即在上述培养基中加入________指示剂，培养该菌后，如果指示剂变________，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。解析：(1)该培养基以尿素为唯一氮源，只允许分解尿素的细菌生长，故这种培养基称为选择培养基。(2)若要通过统计培养基中菌落数来估计样品中的细菌数，需用固体培养基，故上述培养基中还需要添加的成分是琼脂，接种时应采用稀释涂布平板法。(3)由于细菌分解尿素的过程中产生了氨，氨能使培养基的pH升高，故从土壤中分离出分解尿素的细菌后，要对其做进一步的鉴定，即在培养基中加入酚红指示剂，培养该菌后，如果指示剂变红，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。答案：(1)选择(2)琼脂稀释涂布平板(3)酚红红14．(2017·高考江苏卷)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题：(1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有____________。(2)将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐________，以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步________，以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加________。(3)下图为连续划线法示意图，在图中________(填图中序号)区域更易获得单菌落。(4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别为____________。管号123456苯酚浓度(mg/L)1如果废水为50mg/L苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，则需将残留液稀释________(填序号：①5②10③20)倍后，再进行比色。解析：(1)富集培养基中蛋白胨、苯酚都是含碳的有机物，可作为碳源。(2)欲富集酚降解菌，需随转接次数增加逐渐增加培养基中苯酚的含量；若接种培养后平板上菌落过于密集，则应进一步稀释后再进行涂布，以降低平板上菌落密度，便于菌落计数与分离；平板培养基是固体培养基，除含有水、营养物质(碳源、氮源、无机盐等)外，还需添加琼脂作为凝固剂。(3)利用