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文档简介

关于蛋白质溶解度在一定的氢氧化钾溶液中溶解的蛋白质质量占试样中总蛋白质量的百分数。通常采用氮溶解指数（NSI）和蛋白质分散指数（(PDI)来表示。

第2页,共12页，星期六，2024年，5月

原理用一定浓度的氢氧化钾溶液提取试样中的可溶性蛋白质，在催化剂作用下用浓硫酸将提取液中可溶性蛋白质的氮转化为硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用盐酸滴定测出试样中可溶性蛋白质含量；同时，测定原始试样中粗蛋白质含量，计算出试样的蛋白溶解度。第3页,共12页，星期六，2024年，5月试剂a)

氢氧化钾（分析纯），无水硫酸钾、五水硫酸铜、氢氧化钠、硼酸、甲基红、溴甲酚绿、硫酸铵；

b)

浓硫酸、盐酸（分析纯）、95%乙醇、蒸馏水。

第4页,共12页，星期六，2024年，5月

仪器和设备

a)

感量为0.0001g分析天平；

b)

磁力搅拌器；

c)

离心机；

d)

样品粉碎机；

e)

60目分析筛；

f)

电炉；

g)

100mL或250mL凯氏烧瓶；

h)

凯氏蒸馏装置；

i)

250mL锥形瓶；

j)

1000mL容量瓶；

k)

微量滴定管。第5页,共12页，星期六，2024年，5月分析步骤1

0.042M氢氧化钾溶液

称取2.360g氢氧化钾，加水溶解后，转移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。

2

混合催化剂

称取6g硫酸钾和0.4g硫酸铜，磨碎混匀。

3

氢氧化钠溶液

称取400g氢氧化钠，加水溶解后，转移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。

4

硼酸溶液

称取20g硼酸，加水溶解后，转移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。

5

0.1M盐酸标准溶液

量取8.3mL浓盐酸，注入1000mL水中混匀，按GB601-88要求进行标定即可。

6

混合指示剂

称取1g甲基红和5g溴甲酚绿，加入乙醇溶解后，转移至1000mL容量瓶中，用乙醇定容至刻度。

第6页,共12页，星期六，2024年，5月

试样处理称取试样1.5g（准确至0.0002g）置于250mL烧杯中，准确移入0.042M氢氧化钾溶液75mL，磁力搅拌20min，然后将试样转移至离心管中，以2700r/min的速度离心10min。第7页,共12页，星期六，2024年，5月

测定吸取上清液15mL,放入消化管中,按照GB/T6432-1994凯氏定氮法测定试样中可溶性蛋白质的含量。同时，按照GB/T6432-1994凯氏定氮法测定试样中粗蛋白质的含量。第8页,共12页，星期六，2024年，5月分析结果计算15/75=x/1.5g=0.3gx

ps%=0.3g原样中粗蛋白含量/原样中粗蛋白含量×100%

第9页,共12页，星期六，2024年，5月注意事项

不同样品的粒度应相同。

不同样品在氢氧化钾溶液中的搅拌时间应一致。第10页,共12页，星期六，2024年，5月Over

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