JJF(沪苏浙皖)-液相色谱仪用自动进样器校准规范报批稿

(皖)安徽省地方计量技术规范JJF（皖）XXXX—XXXX液相色谱仪用自动进样器校准规范CalibrationSpecificationforAutosamplerforLiquidChromatography（报批稿）XXXX—XX—XX发布XXXX—XX—XX实施安徽省市场监督管理局发布JJF（皖）××××—××××JJF（皖）XXJJF（皖）XXXX—XXXX液相色谱仪用自动进样器校准规范CalibrationSpecificationforAutosamplerforLiquidChromatography归口单位：安徽省化学计量技术委员会主要起草单位：合肥市计量测试中心安徽省计量科学研究院参加起草单位：国检测试控股集团计量检测有限公司本规范委托安徽省化学计量技术委员会负责解释本规范主要起草人：方文莉（合肥市计量测试中心）严璐（合肥市计量测试中心）章敏风（合肥市计量测试中心）裴维周（安徽省计量科学研究院）万为（合肥市计量测试中心）参加起草人：王海燕(安徽皖仪科技股份有限公司)张阳阳（国检测试控股集团计量测试有限公司）刘在青(岛津企业管理(中国)有限公司)JJF（皖）××××—××××PAGEI目录目录 I引言 Ⅱ1范围 12引用文件 13概述 14计量特性 14.1取样体积误差 14.2进样重复性 24.3线性 24.4样品残留 25校准条件 25.1环境条件 25.2测量标准及其他设备 25.3其他要求 26校准项目和校准方法 26.1取样体积误差 26.2进样重复性 36.3线性 46.4样品残留 47校准结果表达 48复校时间间隔 5附录A 6附录B 8附录C 11附录D 13

引言JJF1001－2011《通用计量术语及定义》、JJF1059.1－2012《测量不确定度评定与表示》、JJF1071－2010《国家计量校准规范编写规则》共同构成支撑本校准规范制定的基础性系列规范。本规范在制定中参照了JJG705-2014《液相色谱仪》、GB/T26792-2019《高效液相色谱仪》、GB/T38125-2019《液相色谱仪用自动进样器》等文件的基本要求和方法。本规范为首次发布。JJF（皖）××××—××××PAGE1液相色谱仪用自动进样器校准规范1范围本规范适用于液相色谱仪用自动进样器的校准，其他类型仪器液相部分的自动进样器校准参照执行。2引用文件本规范引用了下列文件：JJG705-2014液相色谱仪JJF1059.1-2012测量不确定度评定与表示JJF1071-2010国家计量校准规范编写规则GB/T26792-2019高效液相色谱仪GB/T38125-2019液相色谱仪用自动进样器凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本规范；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本规范。3概述液相色谱仪用自动进样器（以下简称“仪器”）的原理是将样品通过进样针头输送到样品泵中，调节样品泵的流速和进样量，然后将样品经过进样阀送入色谱柱中。仪器一般包括进样臂、进样针、样品盘、清洗系统、驱动系统以及控制系统等部分组成，各个部分之间紧密合作，共同带动着自动进样器的正常运行。此外，液相色谱仪用自动进样器还可以与质谱检测器、原子荧光检测器、ICP、ICP-MS等进行联用。4计量特性4.1取样体积误差取样体积误差应符合表1要求。表1取样体积及误差取样体积设定值/μL最大允许误差10±5%20±3%100±2%4.2进样重复性重复性应不大于0.5%。4.3线性线性相关系数r应不小于0.999。4.4样品残留样品残留应不大于0.01%。注：以上计量特性要求不用于合格性判定，仅供参考。5校准条件5.1环境条件5.1.1室温（5~35）℃，室内相对湿度20%~80%。室内应避免易燃、易爆和强腐蚀性气体。周围无强烈的震动、电磁干扰和空气对流等，且通风良好。5.1.2电源电压（220±22）V，频率（50±0.5）Hz。5.2测量标准及其他设备5.2.1温度计：温度范围（0～50）℃，分辨力不大于0.1℃，最大允许误差±0.3℃。5.2.2电子天平：分度值0.001mg，准确度等级eq\o\ac(○,Ⅰ)级。5.2.3有证标准物质：萘-甲醇溶液标准物质：认定值为1.00×10-4g/mL，相对扩展不确定度不大于4%，k=2；萘-甲醇溶液标准物质：认定值为1.00×10-5g/mL，相对扩展不确定度不大于4%，k=2；甲醇中胆固醇溶液标准物质：认定值为200μg/mL，相对扩展不确定度不大于4%，k=2；甲醇中胆固醇溶液标准物质：认定值为5μg/mL，相对扩展不确定度不大于4%，k=2。5.2.4其他要求校准用试剂：色谱级甲醇，纯水。色谱柱：符合GB/T30433的C18色谱柱，理论塔板数每米不小于50000。6校准项目和校准方法6.1取样体积误差启动进样器，排除管路气泡，清洗进样针，取2mL的样品瓶，加入一定量的纯水，用电子天平称重，记为m1。按表2执行取样，每次取样结束后，均对样品瓶进行称重，记为m2。每个取样体积重复操作3次。用温度计测量纯水温度，按式（2）计算取样体积，按式（3）计算取样体积误差SS。表2取样方法取样体积设定值/μL1020100每次取样遍数1051重复取样次数333Vm=SS式中：Vm——取样体积，μL；m1——样品瓶+总水质量，g；m2——样品瓶+取样后水质量，g；ρ——试验温度下纯水密度，kg/m3；n——取样遍数；SS——取样体积误差，%；VmV0——取样体积设定值，μL。注：不同温度下水密度参考值参见附录A。6.2进样重复性将进样器连入测试用高效液相色谱系统中，用C18色谱柱连接进样器出口与检测器入口，以纯甲醇为流动相，流量设定为1.0mL/min，运行并平衡系统。启动进样器，排除管路气泡，清洗进样针，在样品瓶加入一定量的1.0×10-4g/mL的萘-甲醇溶液或200μg/mL的甲醇中胆固醇溶液标准物质，放入自动进样器托盘指定位置。待系统完全稳定后，进样体积为10μL，连续进样11次，采集结束后保存色谱图。按式(4)计算萘峰面积相对标准偏差RSD，作为进样重复性。RSD=式中：RSD——相对标准偏差；A——峰面积平均值；Ai——第in——进样次数，n=11。6.3线性仪器条件同6.2，进样体积根据定量环体积大小选取合适间隔9个点（最大体积应为定量环体积一半）。如定量环体积为100μL，依次设定进样体积为2μL、4μL、6μL、8μL、10μL、20μL、30μL、40μL、50μL，每个体积连续测量三次，记录色谱峰面积，取算术平均值作为峰面积测量值，与对应的取样体积按照最小二乘法进行线性拟合，计算线性相关系数r。校准过程中，可依据吸光度大小选择合适的标准物质。6.4样品残留校准前，对进样针进行清洗，确保无残留。仪器条件同6.2，进样体积为20μL，依次进样纯甲醇、1.0×10-4g/mL的萘-甲醇溶液标准物质或200μg/mL的甲醇中胆固醇溶液标准物质、纯甲醇。重复进样3次，分别记录萘或胆固醇色谱峰面积A样品和纯甲醇色谱峰面积A0，取算数平均值，按照式（5）计算样品残留。Cm式中：CmA0——进样纯甲醇时，与进样萘-甲醇标液或甲醇中胆固醇标液A样品7校准结果表达经校准的液相色谱仪用自动进样器出具校准证书。校准证书至少包括以下信息：标题“校准证书”；实验室名称和地址；进行校准的地点；证书或报告的唯一性标识（如编号），每页及总页数的标识；客户的名称和地址；被校对象的描述和明确标识；进行校准的日期，如果与校准结果的有效性和应用有关时，应说明被校对象的接收日期；如果与校准结果的有效性和应用有关时，应对被校样品的抽样程序进行说明；校准所依据的技术规范的标识，包括名称及代号；本次校准所用测量标准的溯源性及有效性说明；校准环境的描述；校准结果及其测量不确定度的说明；对校准规范的偏离的说明；校准证书或校准报告签发人的签名、职务或等效标识；校准结果仅对被校对象有效的声明；未经实验室书面批准，不得部分复制证书的声明。校准证书内容及内页格式见附录C。8复校时间间隔仪器复校时间间隔建议不超过一年。由于复校时间间隔的长短是由器具的使用情况、使用者、仪器本身质量等诸多因素所决定的，因此送校单位可根据实际使用情况自主决定复校时间间隔。更换重要部件、维修或对仪器性能有怀疑时，应随时校准。

附录A不同温度下纯水的密度不同温度下纯水的密度参考值见表A.1。表A.1（0～40）℃纯水的密度参考值30123456789

附录B取样体积示值误差校准结果的测量不确定度评定B.1概述启动进样器，排除管路气泡，清洗进样针，取2mL的样品瓶，加入一定量的纯水，用分析天平称重，记为m1。按表2执行取样，每次取样结束后，均对样品瓶进行称重，记为m2。计算取样体积和取样体积误差SS。B.2测量模型QUOTE

SS=Vm−V0V其中：V0——取样体积设定值，SS——取样体积误差，%；Vm——取样体积测得值，μL取样体积设定值V0可视为常数，则取样体积误差的标准不确定度可表示为：u(（B.2）在实际校准过程中，Vmu(（B.3）B.3各输入量的标准不确定度分量的评定取样体积的测得值Vm按照公式（B.4）计算。V（B.4）式中：Vm——取样体积测得值，m1m2ρ——纯水密度，kg/m3；n——取样遍数。则取样体积测得值的相对不确定度可表示为：uB.3.1电子天平称量引入的标准不确定度分量urel(∆m)QUOTE测量重复性引入的不确定度分量ur1重复性测量条件下，连续测量10次，得到测量列为：100.977mg，101.293mg，100.538mg，101.389mg，101.573mg，101.489mg，100.987mg，100.632mg，100.285mg，100.132mg。∆根据贝塞尔公式，得到标准偏差为：s取三次的质量差平均值为测得值，则u（2）天平称量分辨力引入的不确定度分量ur2天平最大允许误差为±0.005mg，QUOTEa=0.1°按均匀分布，单次称量引入的标准不确定度为：u前后称量2次，则u(∆m)=2×取样总体积为100μL，取样前后两次称量值为4150.712mg、4049.735mg，质量差为：∆m=100.977mg。则u综上，电子天平称量引入的不确定度为：uB.3.2纯水密度变化引入的不确定度分量纯水密度的不确定度主要源于纯水温度变化对密度的影响。进样前后，测量样品瓶中纯水的温度为24.5℃、24.6℃。根据附录A，24.5℃下纯水密度值997.170kg/m3，24.6℃下纯水密度值为997.145kg/m3，密度变化为0.025kg/m3。按照均匀分布计算，k=3，则密度引入的不确定度为：uB.4标准不确定度汇总见表B.2表B.2标准不确定度汇总表标准不确定度分量不确定度来源标准相对不确定度灵敏系数u电子天平称量引入0.293%10.293%u纯水密度变化引入0.002%10.002%B.5合成标准不确定度各不确定度分量不相关，因此合成标准不确定QUOTEuc(?α)的计算为：uB.6扩展不确定度取包含因子U=k×

附录C液相色谱仪用自动进样器校准记录记录编号： 委托单位：委托单位地址：仪器名称：生产厂家：型号规格：出厂编号：被校仪器状态(完好“√”)：校准前：校准后：