【浅谈微生物实验室培养基的质量保证体系3700字】

浅谈微生物实验室培养基的质量保证体系目录TOC\o"1-2"\h\u9590浅谈微生物实验室培养基的质量保证体系 19424关键词：培养基质量优劣；微生物检验；培养基验收；质量保证体系 1305321培养基质量保证的重要性 2244652培养基的分类 2215363培养基质量控制的相关标准 2186224培养基的质量管理 392044.1培养基的采购与验收 359754.2培养基的称重、溶解与分装 4239494.3培养基的灭菌 4234164.4培养基PH监测 46910结语 528618参考文献 5摘要：在实验阶段，微生物检验结果的准确性通常都会受到培养基质量、保存方式、使用方式的影响。所以在检验过程中确保严格按照培养基使用注意事项以及在验收时把好质量关尤为重要。笔者将根据相关文献的理论以及自身多年工作经验相结合，来谈谈微生物实验室使用培养基的时的质量保证体系。也就是要根据实验室实际工作需要来选择适合的培养基质量，对这些质量标准和微生物指标进行确定，以确定质量验收标准。与此同时，监测培养基的重量、溶解与分装、灭菌及PH值，按标准数值控制培养基质量，这些都是保障最终检验结果准确性的手段。关键词：培养基质量优劣；微生物检验；培养基验收；质量保证体系现代微生物检验技术已经有了长足的发展，免疫学、分子生物学等新检验技术为微生物检验带来了新的检验方向，这些新技术的应用已经将鉴定时间尽可能的缩短，还大大提高了鉴定的准确度和能力。可是，在常规的微生物检验法中还是需要使用到培养基，培养基仍然还是现代微生物检验的基础材料。培养基有液体、半固体、固体三种形态，可提取自天然环境下，也可采取合成形式，顾名思义是为微生物繁殖、保存生存活力、鉴定提供环境支持的一种物质[1]。由于微生物检验结果的准确性通常都会受培养基质量、保存方式、使用方式的影响。因此，笔者将根据相关文献的理论以及自身多年工作经验相结合，来谈谈微生物实验室使用培养基的时的质量保证体系。1培养基质量保证的重要性生物科技是目前我国科技发展工作的重中之重。微生物检验工作又切实的影响着国家的科技发展进程，因此关注微生物检验工作是为了提高科技发展的效率。特别是当今社会，食品药品安全问题社会关注度越来越高，而生产食品药品的各个环节都容易受到微生物影响，产生产品质量问题[2]。因此微生物检验对于保障食药品卫生安全尤为重要，随着国家以及民众对食药品安全问题的重视，各大相关企业也非常重视微生物检验。目前国家对相关食药品行业均有国家检验标准，可是，由于食药品的特殊性质，往往在实际生活中，这些检验结果常常出现偏差，使得食药企业的生产环节没有得到准确监督。因此笔者认为，我们应当关注微生物生物检验培养基质量保证体系的研究工作，如此才能制定出对食药品卫生安全有意义的标准体系。培养基的质量形态保证了微生物繁殖的物质基础，因此如何制备使用培养基是微生物实验室在进行生物检验前的重中之重。可以说，微生物鉴定结果完全取决于培养基质量优劣。从培养基的种类上来细分，按使用用途分为运输型、增菌型、鉴别型等等；按合成方式分为纯化学型、非纯化学型；按制作方法分为即用型、实验室制作型等等[3]。由于培养基的种类繁多，来源不同，制备方法不同，因此有关培养基的质量控制标准和方法都不相同。而有关培养基的质量监管却比较薄弱，因此这就需要微生物实验室在验收时应采用技术性验收标准，把控好培养基的质量优劣。2培养基的分类在国家规定的微生物检验标准中，涉及到的培养基[4],通常分为三大类型。第一类为现场配制现场使用的培养基，这种类型的培养基大多可见为VRBA/SC/BS/XLD等，只需要加热溶解后或煮沸后就可使用的；第二类是无需额外添加剂的培养基，这种只需要执行称重、溶解、灭菌三个程序后就可以直接使用，常见于PCA/LST/NA等等；第三类是需要添加某种添加剂的培养基，这类又分为2种，一种是可以灭菌后直接添加添加剂，属于基础培养基，如血平板；第二种是添加剂也需要灭菌，两者都灭菌后方可配合在一起使用的培养基，如李斯特氏菌显色培养基等。3培养基质量控制的相关标准培养基质量优劣直接影响着检验结果，因此我国现行使用的培养基质控标准主要为GB4789.28-2013《微生物学检验培养基和试剂的质量要求》[1],也有行业标准SN/T1538.1-2016《培养基制备指南第1部分:实验室培养基制备质量保证通则》[5]和SN/T1538.2-2016《培养基制备指南第2部分:培养基性能测试实用指南》[6]。国外标准主要为ISO11133-2014《Microbiologyoffood,animalfeedandwater-Preparation,production,storageandperformancetestingofculturemedia》[7]。具体使用何种培养基质控标准，则是实验室根据实际微生物实验需要来选择的。4培养基的质量管理4.1培养基的采购与验收目前，大多数的微生物实验都会选用市面上制成的商业化合成培养基，既方便又快捷，但某些特殊实验过程则根据需要自行采购特殊培养基。那么商业化培养基有哪些优缺点呢？先看看优点：①商业化合成培养基无需配制，直接使用，节约了实验人员的时间；②在配制过程中容易受到污染，而商业化合成培养基无需配制，可以避免这一缺点；③操作误差较小。可是由于市场监管薄弱等问题导致了商业化合成培养基的质量参差不齐，实验结果差异较大。所以在采购时一定要注意生产厂家的质量管理体系认证、口碑、品牌、售后保障等细节，选购有质量保证的培养基，且验收时应该严格按照培养基验收标准来验收，才能确保实验结果的准确性。验收标准应该是通过技术性验收来确定的统一标准，也就是说必须由实验人员在实验室认真核验验收，并记录每一批次的培养基数量、名称、批号、有效日期等，对相关质检报告进行实验查验，确定每种培养基都能达到理想化指标及微生物性能测量指标，然后才可以入库保存。每一批次的培养基在正式使用前都需要进行理化指标测试和性能指标测试，以此来确保符合使用标准。（1）理化指标测试在这一测试环节中需要检测培养基的pH值、颜色、澄清度以及稳定性等，检测结果与厂家提供的质检标准相对比，如果没有问题，说明厂家在生产环节、生产工艺方面把握比较好。（2）性能指标测试微生物实验的基本生物培养物质就是培养基，培养基内不可以有除了实验对象以外的其他物质存活，才能确保最终实验结果的准确性。那么这就要求工作人员在正式使用该批次的培养基之前要检测培养基的生长率、选择性和特异性。生长率也就是实验对象的存活率，培养基对这种实验对象的促进生长率，要保障微生物在培养基中长期存活和繁殖以便日后的观察和进一步实验。可采取定量法、半定量法、定性法来控制培养基的质量。4.2培养基的称重、溶解与分装培养基溶解前需要混合定量的水，再对混合液加热溶解，这个过程中需要不停搅拌，以便培养基的分散溶解，以防培养基黏在容器底部。如果微生物实验中培养基含有琼脂，那么还需要将培养基在实验前浸泡一定时间。称量培养基时除了要使用专用容器和量勺，避免与其他物质发生交叉感染，还要再干燥场所进行，避免培养基受潮，包括容器与量勺也要保持洁净干燥。分装培养基时最好选择玻璃材质，避免金属容器释放金属离子对微生物产生影响，容器的容量要选择其自身体积5倍的容器盛装[8]。4.3培养基的灭菌培养基灭菌是质控工作的核心，通常采用干热灭菌和湿热灭菌两种方式。干热灭菌是将培养基仔细包装后放入电烘箱，设置温度为160-170°C，灭菌时长为1-2小时，该灭菌原理是通过干燥高温空气对微生物细菌进行彻底灭杀。湿热灭菌法是使用沸水煮灭菌，或者水蒸汽进行灭菌，通常是把培养基置于高温高压的水蒸气之中进行活菌灭杀。两种方法相对来说，湿热灭菌法的穿透灭菌效果比干热灭菌法效果更好，因此更多的是采用湿热灭菌法来对培养基灭菌，那么在完成灭菌环节后，还需要使用灭菌指示卡来检测灭菌效果[9]。4.4培养基PH监测微生物生长繁殖都需要适宜的pH值，因此在灭菌环节之后还要对培养基内的pH值进行检测，调整合适的pH值环境，方法是在灭菌后采用水浴锅保温，水位高于培养基液面，要使培养基迅速冷却到适宜温度，防止培养基营养成分流失，然后取出培养基自然降温到40度左右。然后在培养基冷却到47度左右时加入补充物质，这时的补充物质可能是有毒物质，应当提前预防配置溶液。某些环境下，抗生素需要冷冻保存，解冻后再冷冻就会降低活性，这时就需要补充活性物质。如果是在平板器皿中培养基，其厚度月2mm，平稳放置，使琼脂凝固。结语培养基质量的优劣影响着微生物鉴定结果、培养繁殖、分离等等。因此一定要确保培养基的质量符合质量保证体系标准。除了生产环节，合适的制备方法、储存方式也是保障这一标准的前提条件。因此，微生物实验室应当在日常采购验收过程中，严格遵循实验室培养基质量保证体系，加强质量控制环节的监督，规范日常使用过程，可持续的提升培养基质控水平。参考文献[1]GB4789.28-2013食药品安全国家标准微生物学检验培养基和试剂的质量要求[S].GB4789.28-2013Nationalfoodsafetystandard-Foodmicrobiologicalexamination-Qualityrequirementsofmediumandreagent[S].[2]吴鑫.10种中药饮片微生物限度检查方法的建立及污染的研究[D].浙江工业大学，2017.[3]张新秀.浅谈微生物检验培养基的质量控制方法[J].医学信息（上旬刊），2011，24（2）：864-865.[4]SN/T1538.1-2016培养基制备指南第1部分:实验室培养基制备质量保证通则[S].[5]SN/T1538.1-2016Guidelinesonpreparationandproductionofculturemedia-Part1:Generalguidelinesonqualityassuranceforthepreparationofculturemediainthelaboratory[S].[6]SN/T1538.2-2016食药品培养基制备指南第2部分:培养基性能测试实用指南[S].[7]SN/T1538.2-2016Guidelinesonprep