GB∕T 39665-2020 含植物提取物类化妆品中55种禁用农药残留量的测定

CCSY42中华人民共和国国家标准含植物提取物类化妆品中55种禁用农药残留量的测定2020-12-14发布2021-07-01实施国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会ⅠGB／T39665—2020本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由全国质量监管重点产品检验方法标准化技术委员会(SAC/TC374)提出并归口。本文件起草单位：上海市质量监督检验技术研究院、中检华纳（北京）质量技术中心有限公司、通标标准技术服务（上海）有限公司、华纳通标（北京）认证有限公司、御家汇股份有限公司、无限极（中国）有限公司、欧诗漫生物股份有限公司、广东丸美生物技术股份有限公司、广州锦同生物科技有限公司、东莞市容大生物科技有限公司、谱尼测试集团股份有限公司。1GB／T39665—2020含植物提取物类化妆品中55种禁用农药残留量的测定本文件规定了含植物提取物类化妆品中55种禁用农药残留量的液相色谱-串联质谱(20种）和气相色谱-质谱(35种）测定方法。本文件适用于含植物提取物的化妆水、乳液、膏霜和面膜类化妆品。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。试样经乙腈涡旋振荡，超声提取，用凝胶渗透色谱净化，采用液相色谱-串联质谱仪和气相色谱-质谱仪测定，外标法定量。5试剂和材料除非另有规定，仅使用色谱纯试剂。5.1水，GB/T6682,一级。5.6氯化钠：分析纯，使用前于140℃±10℃烘烤4h,贮于干燥器中，冷却备用。5.10环己烷／乙酸乙酯溶液：按环己烷＋乙酸乙酯=1+1（体积比）混合配制成的溶液。5.11乙腈溶液：按乙腈＋水=3+2（体积比）混合配制成的溶液。5.12甲酸溶液，0.1%：移取1mL甲酸(5.7)于1L容量瓶中，用水稀释并定容至刻度。2GB／T39665—20205.13标准品：纯度大于或等于95%,见附录A。标准储备溶液准确称取精确至标准品(容量瓶中，用丙酮(5.3)或甲醇(5.8)溶解并定容至刻度。标准储备溶液避光-18℃保存，有效期为6个月。5.15混合标准溶液：移取适量标准储备溶液(5.14)于100mL容量瓶中，用丙酮(5.3)或甲醇(5.8)稀释并定容至刻度。55种农药混合标准溶液浓度参见附录B。混合标准溶液避光-18℃保存，有效期为5.16标准工作曲线溶液：精确吸取一定量的混合标准溶液(5.15),用乙腈溶液(5.11)或正己烷(5.9)稀释成不同浓度的标准工作曲线溶液（标准工作曲线溶液浓度参见附录B)。标准工作曲线溶液应现用现配。5.17空白样品基质溶液：分别称取1g（精确至0.001g)化妆水、乳液、膏霜和面膜类空白样品，按照7.1和7.2进行样品前处理，操作到7.2.2中“合并至平底烧溶液。5.18基质混合标准工作溶液：空白样品基质溶液(5.17)氮气吹干，加入0.5mL的标准工作曲线溶液(5.16)复溶，经有机相滤膜(5.19)过滤，得到基质混合标准工作溶液。基质混合标准工作溶液应现用现配。有机相滤膜孔径6仪器和设备6.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源(ESI)。6.2气相色谱-质谱仪：配有电子轰击源(EI)。6.3凝胶渗透色谱仪。6.4旋转蒸发仪。分析天平感量为6.6超声振荡器。离心机转速6.8涡旋振荡器。6.9氮气浓缩装置。7分析步骤称取1g试样（精确至0.001g)于50mL具塞离心管中，加入10mL乙腈(5.2)（对于膏霜类等黏稠状样品建议先加入5mL水分散混匀后再加入乙腈用涡旋振荡器涡旋混合1min后，放入超声振荡器超声加入涡旋后离心将上层清液移入新的50mL具塞离心管中，残渣再用10mL乙腈(5.2)重复提取一次后，上层清液合并于同一离心管中，在40℃±2℃水浴温度下，用氮气浓缩装置浓缩至近干，待净化。凝胶渗透洗脱条件如下：3GB／T39665—2020a)洗脱溶剂：环己烷／乙酸乙酯溶液(5.10);流速向离心管内加入约10mL环己烷／乙酸乙酯溶液(5.10)溶解残留物，然后转移至10mL容量瓶中并定容，经有机相滤膜过滤于凝胶渗透色谱仪进样瓶中。按照7.2.1凝胶渗透色谱条件净化，收集于凝胶渗透色谱仪收集瓶中，转移收集液于250mL平底烧瓶中，收集瓶用10mL~20mL的环己烷／乙酸乙酯溶液(5.10)清洗两次，合并至平底烧瓶中，在40℃±2℃水浴温度下，用旋转蒸发仪蒸发近干。用液相色谱-串联质谱仪分析时，加入0.5mL乙腈溶液(5.11)溶解残渣，混匀，经有机相滤膜(5.19)过滤，供液相色谱-串联质谱测定；用气相色谱-质谱仪分析时，加入0.5mL正己烷(5.9)溶解残渣，混匀，经有机相滤膜(5.19)过滤，供气相色谱-质谱测定。7.3.1液相色谱-串联质谱法仪器条件由于仪器设备的多样性，因此不可能给出测试条件的普遍参数，采用下列测试条件已被证明对检测是合适的：色谱柱粒径或相当者；b)流动相：A相为0.1%甲酸水溶液(5.12),B相为乙腈(5.2),梯度洗脱条件见表1;流速e)进样量：2μL。表1流动相梯度洗脱条件时间流速流动相A流动相BminmL/min%%00352003580030030003010350035由于仪器设备的多样性，因此不可能给出测试条件的普遍参数，采用下列测试条件已被证明对检测4GB／T39665—2020是合适的：a)离子源：ESI;电喷雾电压和d)辅助加热气压力：414kPa;g)检测方式：多反应监测(MRM);h)母离子、子离子、扫描方式参见附录C的表C.1。7.3.2气相色谱-质谱法仪器条件由于仪器设备的多样性，因此不可能给出测试条件的普遍参数，采用下列测试条件已被证明对检测是合适的：a)色谱柱：5%苯基-甲基聚硅氧烷，30m×250μm（膜厚0.25μm),或相当者；色谱柱升温程序保持升至升至升至保持载气氦气纯度流速f)进样方式：无分流进样，1.5min后打开分流阀和隔垫吹扫阀。由于仪器设备的多样性，因此不可能给出测试条件的普遍参数，采用下列测试条件已被证明对检测是合适的：接口温度d)扫描方式：特征选择离子监测(SIM);e)采集参数参见附录C的表C.2。在上述仪器条件下进行样品测定时，如果试样待测液和标准品的选择离子色谱峰在相同保留时间处出现，并且对应质谱碎片离子的质荷比与标准品一致，其丰度比与标准品相比应符合表2的规定，则判断样品中存在这种农药。表2定性离子相对丰度的最大允许偏差相对离子丰度允许的相对偏差（液相色谱-串联质谱法）允许的相对偏差（气相色谱-质谱法）>50%±20%±10%且±25%±15%且±30%±20%≤10%±50%±50%5GB／T39665—2020本文件采用外标校准曲线法定量测定。以各农药的基质混合标准工作溶液(5.18)浓度为横坐标，各自的定量离子的峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，并且保证所测样品中农药的响应值均在仪器的线性范围内，超过线性范围则应适当稀释后重新测定。液相色谱-串联质谱法20种农药的多反应监测(MRM)色谱图见参见附录D的图D.1,气相色谱-质谱法35种农药的特征选择离子色谱图参见附录D按照7.1~7.3的步骤对同一试样进行平行试验测定。除不称取试样外，按照7.1~7.3的步骤进行空白操作。7.6检出限和定量限本文件所述方法按7.3测试条件检出限和定量限参见附录E。8结果计算试样中农药残留量的计算按式(1)进行：xi式中：xi—试样中被测组分含量，单位为毫克每千克(mg/kg);i—从标准工作曲线得到的试样溶液中被测组分的质量浓度，单位为微克每升(μg/L);V—试样溶液最终定容体积，单位为毫升(mL);m—样品称样量，单位为克(g);10—净化液定容体积，单位为毫升(mL);1000—换算系数；5—凝胶渗透色谱仪进样体积，单位为毫升(mL)。计算结果应扣除空白值，保留三位有效数字。6GB／T39665—2020附录A（规范性）55种农药标准物质信息表液相色谱-串联质谱法测定的20种农药标准物质信息表见表A.1,气相色谱-质谱法测定的35种农药标准物质信息表见表A.2。表A.1液相色谱-串联质谱法测定的20种农药标准物质信息表序号中文名称英文名称CAS号1甲萘威63-25-22多菌灵Carbendazim10605-21-73丁变敌（燕麦敌）Di-allate2303-16-44特乐酚（地乐硝酚）Dinoterb1420-07-15敌草隆Diuron330-54-16氟环唑Epoxiconazole106325-08-07丁苯吗啉Fenpropimorph67306-03-08精吡氟禾草灵79241-46-69丙炔氟草胺（氟噁嗪酮）Flumioxazin103361-09-7碘苯腈Ioxynil1689-83-4异菌脲（异丙二酮）Iprodione36734-19-7异恶唑草酮（异恶氟草）Isoxaflutole141112-29-0苯氧菊酯（亚胺菌）Kresoxim-methyl143390-89-0利谷隆Linuron330-55-2禾草敌Molinate2212-67-1久效磷6923-22-4炔螨特（克螨特）Propargite2312-35-8扑灭津（丙唑嗪）Propazine139-40-2西玛津Simazine122-34-9十三吗啉（克林菌）Tridemorph24602-86-6表A.2气相色谱-质谱法测定的35种农药标准物质信息表序号中文名称英文名称CAS号1甲草胺Alachlor15972-60-82艾氏剂Aldrin309-00-23六六六319-84-64六六六319-85-77GB／T39665—2020表A.2（续）序号中文名称英文名称CAS号5六六六γ-BHC58-89-96六六六319-86-87敌菌丹2425-6-18氯丹Chlordane57-74-99百菌清Chlorothalonil1897-45-6克氯得（乙菌利）Chlozolinate84332-86-5滴滴滴53-19-0滴滴滴72-54-8滴滴伊3424-82-6滴滴伊72-55-9滴滴涕789-02-6滴滴涕50-29-3对二氯苯106-46-7三氯杀螨醇Dicofol(kelthane)115-32-2狄氏剂Dieldrin60-57-1二苯胺Diphenylamine122-39-4959-98-833213-65-9硫丹硫酸酯Endosulfansulfate1031-07-8异狄氏剂Endrin72-20-8氯苯嘧啶醇（异嘧菌醇）Fenarimol60168-88-9倍硫磷Fenthion55-38-9氟硅唑Flusilazole85509-19-9七氯Heptachlor76-44-8e环氧七氯Heptachloroepoxide1024-57-3e六氯苯Hexachlorobenzene118-74-1异艾氏剂Isodrin72-20-8腈菌唑Myclobutanid88671-89-0磷胺Phosphamidon13171-21-6炔苯酰草胺Propyzamide23950-58-5乙烯菌核利（烯菌酮）Vinclozoline50471-44-88GB／T39665—2020附录B（资料性）55种农药的混合标准溶液浓度和标准工作曲线溶液浓度液相色谱-串联质谱法测定的20种农药混合标准溶液浓度和标准工作曲线溶液浓度见表B.1,气相色谱-质谱法测定的35种农药混合标准溶液浓度和标准工作曲线溶液浓度见表B.2。表B.1液相色谱-串联质谱法测定的20种农药混合标准溶液浓度和标准工作曲线溶液浓度序号化合物名称混合标准溶液浓度标准工作曲线溶液浓度溶剂1甲萘威甲醇2多菌灵甲醇3丁变敌（燕麦敌）甲醇4特乐酚（地乐硝酚）甲醇5敌草隆甲醇6氟环唑甲醇7丁苯吗啉甲醇8精吡氟禾草灵甲醇9丙炔氟草胺（氟噁嗪酮）甲醇碘苯腈甲醇异菌脲（异丙二酮）甲醇异恶唑草酮（异恶氟草）甲醇苯氧菊酯（亚胺菌）甲醇利谷隆甲醇禾草敌甲醇久效磷甲醇炔螨特（克螨特）甲醇扑灭津（丙唑嗪）甲醇西玛津甲醇十三吗啉（克林菌）甲醇表B.2气相色谱-质谱法测定的35种农药混合标准溶液浓度和标准工作曲线溶液浓度序号化合物名称混合标准溶液浓度标准工作曲线溶液浓度溶剂1甲草胺丙酮2艾氏剂丙酮9GB／T39665—2020序号化合物名称混合标准溶液浓度标准工作曲线溶液浓度溶剂3六六六丙酮4六六六丙酮5六六六丙酮6六六六丙酮7敌菌丹丙酮8氯丹丙酮9百菌清丙酮克氯得（乙菌利）丙酮滴滴滴丙酮滴滴滴丙酮滴滴伊丙酮滴滴伊丙酮滴滴涕丙酮滴滴涕丙酮对二氯苯丙酮三氯杀螨醇丙酮狄氏剂丙酮二苯胺丙酮丙酮丙酮硫丹硫酸酯丙酮异狄氏剂丙酮氯苯嘧啶醇（异嘧菌醇）丙酮倍硫磷丙酮氟硅唑丙酮七氯丙酮e环氧七氯丙酮e六氯苯丙酮异艾氏剂丙酮腈菌唑丙酮磷胺丙酮炔苯酰草胺丙酮乙烯菌核利（烯菌酮）丙酮GB／T39665—2020（资料性）55种农药标准物质质谱采集参数液相色谱-串联质谱法测定的20种农药标准物质定量及定性离子对、去簇电压(DP)、碰撞能量(CE)以及扫描方式见表C.1,气相色谱-质谱法测定的35种农药标准物参考保留时间、定量离子、定性离子及定量离子与定性离子的比值见表C.2。液相色谱-串联质谱法测定的20种农药标准物质定量及定性离子对、以及扫描方式序号化合物中文名去簇电压DPV碰撞能量CEeV扫描方式1甲萘威202/145a+202/1272多菌灵192/160a+3丁变敌（燕麦敌）+270/1094特乐酚（地乐硝酚）-70-32--70-485敌草隆233/72a+233/1606氟环唑+7丁苯吗啉+304/1178精吡氟禾草灵384/282a+384/3289丙炔氟草胺（氟噁嗪酮）+碘苯腈-65-36--65-26异菌脲（异丙二酮）+异恶唑草酮（异恶氟草）+GB／T39665—2020续）序号化合物中文名去簇电压DPV碰撞能量CEeV扫描方式苯氧菊酯（亚胺菌）314/206a+314/267利谷隆249/160a+249/182禾草敌+久效磷224/127a+224/98炔螨特（克螨特）+扑灭津（丙唑嗪）+西玛津+十三吗啉（克林菌）+a为定量离子对。气相色谱-质谱法测定的35种农药标准物参考保留时间、定量离子、定性离子及定量离子与定性离子的比值序号化合物名称参考保留时间min定量离子定性离子1定性离子2定性离子31甲草胺188(100)160(114)237(100)146(40)2艾氏剂263(100)265(65)261(66)293(40)3六六六219(100)183(120)181(115)217(83)4六六六219(100)183(106)181(108)217(80)5六六六219(100)183(95)181(97)217(81)6六六六219(100)183(101)181(110)217(77)7敌菌丹79(100)151(8)80(31)77(21)8氯丹373(100)375(96)377(51)371(43)9百菌清266(100)264(77)268(49) 克氯得（乙菌利）259(100)188(115)186(91)261(65)GB／T39665—2020续）序号化合物名称参考保留时间min定量离子定性离子1定性离子2定性离子3滴滴滴235(100)237(65)165(39)199(16)滴滴滴235(100)237(64)165(46)199(12)滴滴伊246(100)248(64)318(34)316(26)滴滴伊318(100)316(80)246(139)248(73)滴滴涕235(100)237(63)165(37)199(12)滴滴涕235(100)237(65)165(41)199(12)对二氯苯146(100)148(65)111(35)75(22)三氯杀螨醇139(100)141(31)250(23)111(35)狄氏剂277(100)79(700)263(150)279(96)二苯胺169(100)168(59)167(29)170(13)241(100)265(66)339(46)195(106)241(100)265(66)339(46)195(140)硫丹硫酸酯272(100)387(45)389(30)229(62)异狄氏剂263(100)265(60)317(30)345(48)氯苯嘧啶醇（异嘧菌醇）139(100)219(62)330(28)251(52)倍硫磷278(100)125(43)109(27)169(25)氟硅唑233(100)206(33)315(9)234(19)七氯272(100)274(80)237(40)337(20)e环氧七氯353(100)355(79)351(52)357(35)e六氯苯284(100)286(81)282(51)288(33)异艾氏剂193(100)195(83)263(46)147(30)腈菌唑179(100)181(31)150(56)206(26)磷胺127(100)264(43)138(22)109(20)炔苯酰草胺173(100)175(62)255(22)145(29)乙烯菌核利（烯菌酮）285(100)212(130)198(122)187(96)GB／T39665—2020附录D（资料性）55种农药标准物质色谱图液相色谱-串联质谱法测定的20种农药多反应监测(MRM)色谱图见图D.1,气相色谱-质谱法测定的35种农药标准物质特征选择离子监测(SIM)色谱图见图D.2。a）甲萘威d）特乐酚g）丁苯吗啉j）碘苯腈m）苯氧菊酯b）多菌灵e）敌草隆h）精吡氟禾草灵k）异菌脲n）利谷隆c）丁变敌f）氟环唑i）丙炔氟草胺l）异恶唑草酮图D.1液相色谱-串联质谱法测定的20种农药多反应监测（MRM）色谱图GB／T39665—2020炔螨特