DB6109T 2.5-2024镇坪乌鸡养殖技术规程 第5部分：白血病净化

CCS65.020.30B432024-07-10发布2024-08-12安康市市场监督管理局发布DB6109/T2.5-2024前言 Ⅱ 12规范性引用文件 13术语和定义 13.1鸡白血病 13.1鸡白血病净化 14雏鸡胎粪检测与淘汰 14.1样品采集 14.2样品处理 14.3样品检测 14.4淘汰 15育成期检测与淘汰 15.1样品采集 15.2样品检测 25.3淘汰 26开产初期检测与淘汰 26.1样品采集 26.2样品处理 26.3样品检测 26.4淘汰 27留种前检测与淘汰 28种蛋选留与孵化 28.1种蛋选留 28.2种蛋孵化 29净化周期与终止 39.1净化周期确定 39.2净化效果评估 39.3达到净化鸡群的检测比例调整 310净化状态维持措施 310.1禽白血病净化维持监测 310.2疫苗使用 3DB6109/T2.5-2024本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起本文件是DB6109/T2《镇坪乌鸡养殖技术规程》的第5部分。DB6109/T2《镇坪乌鸡养殖技术规程》已发布了以下部分：——第1部分：种鸡饲养；——第2部分：种蛋孵化；——第3部分：人工授精；——第4部分：生态养殖；请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由镇坪县农业农村和水利局提出。本文件由安康市农业农村局归口。本文件起草单位：镇坪县畜牧兽医中心、西北农林科技大学。本文件主要起草人：任远明、梁小军、陈勇、郭金彩、米登菊、周鹏来、李万富、何安奎、李奎、谭余辉、袁胜海、冯艳、陈远红、张红霞、刘松、杨红玲、陈凤、敖显配、陈贵攀、杨少鹏、王文凯、王丹、周玚。联系信息如下：单位：镇坪县畜牧兽医中心电话址：陕西省安康市镇坪县城关镇上新街佳华大厦3楼邮编：7256991DB6109/T2.5-2024镇坪乌鸡养殖技术规程第5部分：白血病净化本文件规定了镇坪乌鸡种鸡场鸡白血病雏鸡胎粪检测与淘汰、育成期检测与淘汰、开产初期检测与淘汰、留种前检测与淘汰、净化周期与终止、净化状态维持措施等阶段的技术要求。本文件适用于有禽白血病净化需求的镇坪乌鸡种鸡场，其他类型鸡群也可参照执行。所列禽白血病净化状态维持技术适用于已实现禽白血病净化的鸡群。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T26436禽白血病诊断技术NY/T680禽白血病病毒p27抗原酶联免疫吸附试验方法中国兽药典（2020年版）3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1鸡白血病由禽白血病病毒引起的慢性传染性肿瘤病，也叫做鸡淋巴细胞白血病，俗称“大肝病”。3.2鸡白血病净化指通过检测鸡胎粪、血液、蛋清等样品中禽白血病病毒，通过检测淘汰带毒鸡而达到清除鸡群中禽白血病病毒的技术，通过本技术的应用推广，可以极大的提高种鸡群和商品鸡的成活率、降低死淘率。4雏鸡胎粪检测与淘汰4.1样品采集将每只母鸡的种蛋作好标记，孵化至18d，转移至专用出雏器中出雏，胚蛋置于独立盒中出雏，作好标记，并单独收集雏鸡胎粪。4.2样品处理4.2.1离心管中预先加入0.6mL样品稀释液，将雏鸡胎粪挤压于其中，充分震荡混匀。4.2.2放入液氮中快速冷冻后取出，放入25℃~37℃水浴中融化，反复冻融三次。4.2.3离心，取上清液。4.3样品检测按照NY/T680的规定执行；或采用等效的商品化酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测；或采用针对禽白血病病毒p27抗原的单克隆抗体建立的胶体金试纸条检测。4.4淘汰4.4.1抗原阳性雏鸡与同母雏鸡淘汰。2DB6109/T2.5-20244.4.2每只公鸡受精2只以上母鸡的后代为阳性，该公鸡所有后代淘汰。4.4.3上述4.4.1和4.4.2涉及到公鸡母鸡一同淘汰。4.4.4经上述淘汰后留下的阴性雏鸡，维持小群隔离饲养。5育成期检测与淘汰5.1样品采集无菌采集血清0.5mL；或静脉血1mL（加入肝素钠抗凝）。5.2样品检测血清按照PCR-HRM方法检测；全血按照GB/T26436规定执行。5.3淘汰阳性立即淘汰。6开产初期检测与淘汰6.1样品采集6.1.1母鸡分别取初产蛋2个～3个，每个鸡蛋分别采集稀蛋清1mL；或采集静脉血1mL（加入肝素钠抗凝）；或采集血清0.5mL。6.1.2公鸡采集静脉血1mL（加入肝素钠抗凝）；或采集血清0.5mL；或采集精液0.1mL。6.2样品处理蛋清反复冻融三次；静脉血12h内用血浆分别接种DF-1细胞,培养7d～9d后取细胞培养上清液。6.3样品检测6.3.1母鸡蛋清、静脉血按照NY/T680规定检测；血清用PCR-HRM方法检测。6.3.2公鸡血清或精液用PCR-HRM方法检测；静脉血按照按照GB/T26436规定执行。6.4淘汰阳性立即淘汰。7留种前检测与淘汰采样、检测方法同5.1、5.2；阳性立即淘汰；组建家系，收集种蛋入孵。8种蛋选留与孵化8.1种蛋选留按照第4、第5、第6章规定检测阴性留种；每只公鸡固定相应母鸡进行人工授精；收集的种蛋作好标记。8.2种蛋孵化按照DB6109／T2.2-2024《镇坪乌鸡养殖技术规程第2部分：种蛋孵化》执行。DB6109/T2.5-20249净化周期与终止9.1净化周期确定9.1.1根据种鸡所处育种时期，对照本文件第4、第5、第6章的任何一个环节启动净化程序。9.1.2不同种鸡场可根据其技术条件分别选择本文件第4、第5、第6章的任何一个环节进行检测。9.1.3经一个净化周期检测阴性鸡群的后代作为净化后下一个世代鸡，继续按照本文件第4、第5、第6章规定的程序实施下一世代的检测和净化。9.2净化效果评估按照《动物疫病净化示范场评估标准（试行）》（2021版）要求执行。9.3达到净化鸡群的检测比例调整9.3.1评估达标的原种场，无需进行普遍性检测，按照不低于10%的比例进行抽样监测。9.3.2评估不达标的原种场，按照本文件第4、第5、第6章的要求，重新进入检测净化程序。10净