饲料中恩拉霉素的测定 液相色谱-串联质谱法 征求意见稿

1饲料中恩拉霉素的测定液相色谱-串联质谱法本文件描述了饲料中恩拉霉素的液相色谱-串联质本文件恩拉霉素A和恩拉霉素B的检出限均为0.05mg/kg，定量限均为0.10mg/kg。GB/T6682分析实验室用水规格GB/T20195动物饲料试试样中的恩拉霉素A和恩拉霉素B用盐酸甲醇溶液或甲酸甲醇溶液提取，固相萃取柱净化，液相色5.5盐酸溶液（0.1mol/L取浓盐酸4.2mL，用水稀释至500mL，混匀。5.85%氨水溶液：移取氨水5mL，用水稀释至100mL，混匀。5.11盐酸甲醇溶液（0.1mol/L移取盐酸1mL，用甲醇稀25.14标准储备溶液（1mg/mL准确称取恩拉霉素A（CAS：344）：），5.17标准系列溶液Ⅱ：精密量取适量混合标准工作液（55.18固相萃取柱A：200mg/3mL，填料为改性的苯乙烯-二乙烯按GB/T20195制备样品，至少约200g，粉碎使其全部通过0平行做两份试验。称取试样2g（精确至0.01g）于50mL离心管中，准确加入盐酸甲醇溶液（5.6）20mL，涡旋混匀，超声提取30min，涡旋振荡10min，10000r/min离心5min。准确移取1mL上清液，涡旋混匀，超声30min，涡旋振荡10min，10000r/min离心5min，上清液备用。3取空白试样，按8.1和8.2处理至氮气吹干，准确移取系列标准溶液Ⅰ（5.16）各1mL溶解残余物，制得浓度分别为2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/a）色谱柱：C18柱，柱长100mm，内径2.1mm，粒径1.8μm，或性能相当者；b）柱温：35℃;），），A相%%055a）电离方式：电喷雾电离，正离子模式（b）检测方式：多反应监测（MRM4表2多反应监测（MRM）离子对、锥孔m/zV在仪器的最佳条件下，分别取基质匹配标准系列溶液（8.3）和试样溶液（8.2）上机测定，恩拉霉素A和恩拉霉素B基质匹配标准溶液的定量离在相同试验条件下，试样溶液（8.2）与基质匹配标准之内。根据表2选择的定性离子对，比较试样谱图中待测物定性离子的相对离子丰度与质量浓度接近的%>50>20～50>10～20最大允许偏差围内，如超出线性范围，应用空白基质溶液稀释（f倍）后重新测定分析。单点校准定量时，试样溶液（8.2）中待测物的质量浓度与基质匹配标准溶液的质量浓度相9试验数据处理5w=×f…………………式中:ρ1i——由标准曲线得到的试样溶液中恩拉霉素A或恩拉霉素B的质量浓度，单位为纳克每毫升V——提取溶液的体积，单位为毫升（mLf——上机测定的试样溶液超出规定范围后，m1——试样的质量，单位为克（gw=×f……………A1i——试样溶液中恩拉霉素A或恩拉霉ρs1i——标准溶液中恩拉霉素A或恩拉霉素B的质量浓度，单位为纳克每毫升（ng/mLV——提取溶液的体积，单位为毫升（mLf——上机测定的试样溶液超出规定范围后，As1i——标准溶液中恩拉霉素A或恩拉霉素B的色谱m1——试样质量，单位为克（gw2i=×f…………………ρ2i——由标准曲线得到的试样溶液中恩拉霉素A或恩拉霉素B的质量浓度，单位为纳克每毫升f——上机测定的试样溶液超出线性范围后，进一步稀释的倍数。m2——试样的质量，单位为克（g6A2i——试样溶液中恩拉霉素A或恩拉霉素B色谱峰面Ρs2i——标准溶液中恩拉霉素A或恩拉霉素B的质量浓度，单位为纳克每毫升（ng/mLf——上机测定的试样溶液超出规定范围后，m2——试样质量，单位为克（g测定结果以平行测定的算术平均值表示，保留3试样中恩拉霉素的含量以质量分数w计，数值以毫克每千克（mg/kg）表示，按公式（5）计算：在重复性条件下，两次独立测定结果与其算术平均值的绝对差值不大于该算术平均值的20%。7恩拉霉素A和恩拉霉素B基质匹配标准溶液的定量离子色谱图见——恩拉霉