黑龙江省大兴安岭漠河县一中2025届高考生物四模试卷含解析

黑龙江省大兴安岭漠河县一中2025届高考生物四模试卷请考生注意：1．请用2B铅笔将选择题答案涂填在答题纸相应位置上，请用0．5毫米及以上黑色字迹的钢笔或签字笔将主观题的答案写在答题纸相应的答题区内。写在试题卷、草稿纸上均无效。2．答题前，认真阅读答题纸上的《注意事项》，按规定答题。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下列描述中对绿藻和蓝藻都符合的是（）A．类囊体膜上的叶绿素能够吸收光能B．在细胞核中以脱氧核苷酸为原料合成DNAC．能够在DNA分子水平上产生可遗传变异D．在线粒体和拟核中和NADH反应生成2．如图为用分光光度计测定叶片中两类色素A和B吸收不同光波的曲线图，请判定A和B分别为（）A．叶绿素a、类胡萝卜素 B．类胡萝卜素、叶绿素bC．叶黄素、叶绿素a D．叶绿素a、叶绿素b3．下图为蜜蜂（2N=32）的性别决定及发育过程简图，交配后，蜂王可产下受精卵或未受精卵，未受精卵直接发育成雄蜂，雄蜂产生的配子与其体细胞染色体组成相同，不考虑基因突变和染色体结构变异，下列说法不正确的是（）A．雄蜂的体细胞中含有本物种配子染色体数，属于单倍体B．该图可说明生物的表现型是基因型与环境共同作用的结果C．工蜂承担了保育、筑巢和采蜜等工作，体现了物种间的互利共生D．若蜂王的基因型为AaBb，则子代雄蜂基因型可为AB、Ab、aB、ab4．植物生长调节剂广泛应用到农业生产上，并产生了一些人们原来没有预料到的影响，下列相关叙述，正确的是（）A．天然状态下的凤梨开花结果时期参差不齐，可利用乙烯利促进其果实的发育，做到有计划上市B．利用高浓度的2，4-D作除草剂，可抑制麦田中的双子叶杂草C．利用生长素类似物培育成的无子西瓜与多倍体育种培育成的无子西瓜都属于不可遗传的变异D．赤霉素能促进细胞分裂、种子萌发等，可利用赤霉素溶液处理大麦使之产生更多的α-淀粉酶5．下列与细胞中“膜”有关的叙述，正确的是（）A．原核细胞和真核细胞都存在生物膜及生物膜系统B．膜结构中含磷元素，无膜细胞器不含磷元素C．细胞膜中糖类含量很少，细胞膜的功能与糖类无关D．磷脂双分子层构成膜的基本支架，与膜的选择透过性有关6．下列关于细胞结构及细胞生命活动的叙述，正确的是（）A．高温破坏蛋白质中的肽键使蛋白质的空间结构变得松散B．真核细胞的细胞核是遗传信息转录和翻译的场所C．细胞分裂间期既有DNA的复制又有蛋白质的合成D．细胞凋亡只发生在胚胎发育的过程中二、综合题：本大题共4小题7．（9分）下图是人体某组织细胞部分结构及生理过程的示意图。请据图回答：（1）科学家发现囊泡能将物质准确运输到目的位置并“卸货”，是由于囊泡膜表面有特殊的“识别代码”，能识别相应受体。这种“识别代码”的化学本质是____________________。（2）溶酶体中的多种水解酶是在结构[2]____________________上合成的，水解酶从合成到进入溶酶体的途径是：2→_____→_______→溶酶体(用数字和箭头表示)。（3）图中过程⑥→⑨说明溶酶体具有____________________的功能，溶酶体的功能说明其膜的结构特点是_______________________________。图中的某种细胞器，动植物细胞普遍存在但是功能不完全相同，该细胞器是________(填序号)。（4）若图示细胞表示乳腺细胞，用同位素标记一定量的氨基酸培养乳腺细胞，测得与合成和分泌乳蛋白相关的一些细胞器上放射性强度的变化曲线如图甲所示，以及在此过程中有关的生物膜面积的变化曲线如图乙所示。图中曲线所指代的细胞结构相同的是____________A．c和f

B．c和d

C．a和e

D．a和d（5）若图示细胞表示口腔上皮细胞，现提取口腔上皮细胞的膜成分中的磷脂，将其铺在空气一水界面上，测得磷脂占据面积为S，请预测：口腔上皮细胞膜表面积的值（填“＞”，“＝”或“＜”）____________S/2。（6）核仁的体积与代谢强度密度相关，代谢活跃的细胞中核仁体积___________。（7）图中含有尿嘧啶的细胞器有____________。（填写图中1-5数字）8．（10分）β-葡萄糖苷酶是一种存在于微生物中的可水解纤维素的酶，可用于生产燃料乙醇，也可作为洗涤剂的有效成分。某科研小组进行了β-葡萄糖苷酶高产菌株的分离、鉴定、提纯产物等研究。已知七叶灵能在β-葡萄糖苷酶的作用下水解，其水解产物七叶苷原能和Fe3+作用呈现棕黑色。请回答：（1）为筛选出β-葡萄糖苷酶高产菌株，应到_____________环境中取样，取样后要在液体培养基中进行选择培养，其目的是_________________。（2）选择培养后要初步分离鉴定出目的菌株，请写出实验思路：___________________。（3）用接种针挑取棕黑色的菌落用_____________法进一步纯化，进而筛选出高产菌株。（4）将高产菌株扩大培养，获得发酵液，用___________法去除发酵液中分子量小的杂质，再用_________法进一步纯化，最终获得纯度较高的β-葡萄糖苷酶。（5）生产中为降低成本，β-葡萄糖苷酶最好采用________法固定，以便重复使用。9．（10分）双子叶植物女娄菜（2N=24)为雌雄异株，性别决定为XY型，其叶型有宽叶和窄叶两种类型，宽叶由显性基因B控制，窄叶由隐性基因b控制，B和b均位于X染色体上，含有基因b的花粉粒致死，请回答下列问题：（1）如果对女娄菜的基因组进行测序，需要测___________条染色体。（2）若将窄叶雄株的花粉粒进行花药离体培养，再将幼苗用秋水仙素处理，所得植株的染色体组成为______________。（3）宽叶和窄叶的基因型共有______种，分别是_____________________________。（4）现以杂合宽叶雌株和宽叶雄株为亲本进行杂交得F1，F1自由授粉得到的F2表现型及比例是_______________________________________，若对上述F1雌株进行测交，则子代表现型及比例是________________________________。10．（10分）回答下列（一）、（二）小题：（一）开发山楂果醋恰好让山楂中的有机酸丰富了果醋的酸味，同时也弥补生食山楂酸味大的缺陷，具体酿制山楂果醋分为以下三个阶段，请将具体过程补充完整。（1）制备山楂果原汁：选成熟的山楂果，在清水冲洗山楂果_______（填“之前”或“之后”）去梗。将山楂果切片并去籽，再添加_______，酶解适宜时间后压榨取果汁。（2）乙醇发酵：由于山楂果原汁_______，故发酵液中添加适量蔗糖，以获得酒精含量较高的果酒。果汁中加入活化的________后，在适宜环境下发酵一段时间，当发酵液中停止_______，发酵完毕待过滤，或发酵至_______，上清液即为果酒，用虹吸法取出。（3）醋酸发酵：将醋化醋杆菌进行扩大培养后，经检查菌体生长正常并无杂菌污染后接种于山楂酒-水中进行发酵，整个发酵过程需要通入_______。在发酵后期加入1．3~1．4%的食盐，其目的是调味和_______，以防止果醋被发酵分解。（二）下图为转基因抗虫烟草的培育流程，①②③④表示过程，其中②表示利用农杆菌转入受体细胞。回答下列相关问题：（1）在①过程构建重组质粒时，若用同一种限制性核酸内切酶处理Ti质粒和含目的基因的DNA片段，使两者形成粘性末端用于拼接，这种方法的明显缺点是目的基因和质粒________（答出2点即可）。另外，影响拼接效率的主要因素，除以上缺点和盐离子浓度、渗透压、温度等环境因素外，还有_______（答出2点即可）。（2）在②过程中，将图示重组Ti质粒导入农杆菌时可用______处理农杆菌，以提高转化效率。操作之后，需要特定的培养基对农杆菌进行筛选，其原因是_______，最终筛选到的对象在相应选择培养基上的存活情况是________。（3）在③过程常通过调节_______的适当配比，从愈伤组织诱导出芽和根的_____，并由此再生出新植株。获得转基因烟草后，再通过[④]_______过程实现多个世代组织培养。11．（15分）γ-氨基丁酸和某种局部麻醉药在神经兴奋传递过程中的作用机理如下图所示。此种局麻药单独使用时不能通过细胞膜，如与辣椒素同时注射才会发生如图所示效果。据图回答下列问题：（1）由图1可知，γ-氨基丁酸是一种_____________可作用于突触后膜，引起_____________，抑制了下一个神经元的兴奋。（2）γ-氨基丁酸发挥完作用后，会立即被_____________，是一种可逆的神经抑制效应。（3）局麻药和γ-氨基丁酸的作用效果___________（填“相似”或“相反”）。据图分析该局部麻醉药的机理是___________________________________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、C【解析】

绿藻为真核生物，蓝藻为原核生物。真核细胞与原核细胞的本质区别是有无以核膜为界限的细胞核。原核生物的细胞器只有核糖体。【详解】A、绿藻类囊体膜上的叶绿素能够吸收光能；蓝藻无叶绿体，因其细胞内含有藻蓝素和叶绿素，能进行光合作用，A错误；B、绿藻在细胞核中以脱氧核苷酸为原料合成DNA，蓝藻无细胞核，B错误；C、绿藻和蓝藻都以DNA为遗传物质，能够在DNA分子水平上产生可遗传变异，C正确；D、绿藻在线粒体和NADH反应生成，而蓝藻细胞中不含线粒体，D错误。故选C。2、A【解析】

叶绿体中色素有类胡萝卜素和叶绿素两大类，类胡萝卜素包括胡萝卜素（橙黄色）和叶黄素（黄色），主要吸收蓝紫光；叶绿素包括叶绿素a（蓝绿色）和叶绿素b（黄绿色），主要吸收红光和蓝紫光。【详解】据图分析，色素A吸收波峰为红光和蓝紫光，则色素A表示叶绿素；色素B吸收波峰只有蓝紫光，则色素B代表类胡萝卜素，故选A。【点睛】本题考查叶绿体中色素吸收光的种类，意在考查学生的识图能力和判断能力，难度不大，属于常考知识点。3、C【解析】

单倍体，体细胞中含有本物种配子染色体数目的个体称为单倍体。生物的表现型有基因型和环境共同决定，基因型是内因，环境因素是外因。【详解】A、雄蜂是由未受精的卵细胞发育的，其体细胞中含有本物种配子染色体数，属于单倍体，A正确；B、该图中显示同样是受精卵发育的个体，最终因为食物的不同而导致性状上的差别，据此可说明生物的表现型是基因型与环境共同作用的结果，B正确；C、工蜂、蜂王和雄蜂是同一物种，工蜂承担了保育、筑巢和采蜜等工作，蜂王和雄蜂承担了繁育后代的工作，这是种内互助的表现，C错误；D、若蜂王的基因型为AaBb，则产生的卵细胞的基因型为AB、Ab、aB、ab，由于雄蜂是未受精的卵细胞发育的，故子代雄蜂基因型可为AB、Ab、aB、ab，D正确。故选C。4、B【解析】

植物激素包括生长素、赤霉素、细胞分裂素、乙烯、脱落酸等，生长素具有促进植物生长、促进插条生根和促进子房发育成果实等作用；赤霉素具有促进植物生长、抑制种子休眠、促进种子萌发的作用；细胞分裂素的作用是促进细胞分裂；乙烯的作用是促进果实成熟；脱落酸的作用是促进果实、叶片等器官的衰老和脱落。【详解】A、乙烯促进果实成熟而不是发育，A错误；B、利用高浓度的2，4-D作除草剂，可抑制麦田中的双子叶杂草，B正确；C、利用生长素类似物培育成的无子西瓜属于不可遗传变异，而多倍体育种培育成的无子西瓜的原理是染色体变异，属于可遗传变异，C错误；D、赤霉素能促进解除种子休眠，促进种子萌发，但是不能促进细胞分裂，D错误。故选B。5、D【解析】

1、脂质：构成细胞膜的主要成分是磷脂，磷脂双分子层构成膜的基本骨架。2、蛋白质：膜的功能主要由蛋白质承担，功能越复杂的细胞膜，其蛋白质的含量越高，种类越多。①蛋白质的位置：有三种。镶在磷脂双分子层表面；嵌入磷脂双分子层；贡穿于磷脂双分子层。②种类：a、有的与糖类结合，形成糖被，有识别、保护、润滑等作用。b、有的起载体作用，参与主动运输过程，控制物质进出细胞。c、有的是酶，起催化化学反应的作用。3、特殊结构--糖被：①位置：细胞膜的外表。②本质：细胞膜上的蛋白质与糖类结合形成的糖蛋白。③作用：与细胞表面的识别有关；在消化道和呼吸道上皮细胞表面的还有保护和润滑作用。4、细胞膜的功能：①将细胞与外界环境分开；②控制物质进出细胞；③进行细胞间的物质交流。【详解】A、原核细胞存在生物膜，不存在生物膜系统；真核细胞存在生物膜及生物膜系统，A错误；B、膜结构中含磷元素，无膜细胞器也可能含磷元素，如核糖体的主要成分是蛋白质和RNA，RNA中含有磷元素，B错误；C、细胞膜表面的糖类和蛋白质结合形成糖蛋白，糖蛋白具有细胞识别、免疫、信息交流等功能，因此细胞膜的功能与糖类有关，C错误；D、磷脂双分子层构成膜的基本支架，与膜的选择透过性有关，D正确。故选D。6、C【解析】

真核细胞的细胞核是遗传信息转录和复制的主要场所，细胞分裂间期主要完成DNA的复制和相关蛋白质的合成，细胞凋亡是由基因决定的细胞编程序死亡的过程。细胞凋亡是生物体正常的生命历程，对生物体是有利的，而且细胞凋亡贯穿于整个生命历程。【详解】A、高温破坏蛋白质的空间结构使其变得松散，但没有破坏肽键，A错误；B、真核细胞的细胞核是遗传信息转录和复制的主要场所，翻译在核糖体上进行，B错误；C、细胞分裂间期主要完成DNA的复制和相关蛋白质的合成，C正确；D、细胞凋亡贯穿于生物个体整个生命历程中，D错误。故选C。二、综合题：本大题共4小题7、糖蛋白(或蛋白质)附着在内质网上的核糖体（核糖体）14分解衰老、损伤的细胞器具有一定的流动性4A小于增大235【解析】分析：图中1是内质网，2、3是核糖体，4是高尔基体，5是线粒体。溶酶体内含有许多种水解酶，能够分解很多种物质以及衰老、损伤的细胞器，被比喻为细胞内的“酶仓库”“消化系统”。核仁与某些RNA的合成以及核糖体的形成有关；核仁的大小与细胞合成蛋白质的多少有关．蛋白质合成旺盛的细胞核糖体多，核仁大。（1）细胞膜上的糖蛋白具有识别作用；（2）由图可知，溶酶体起源于高尔基体；高尔基体参与分泌蛋白的加工、转运和分泌，而分泌蛋白是在附着在内质网上的核糖体上合成的，因此溶酶体中的酶主要是在附着在内质网上的的核糖体上合成的，水解酶从合成到进入溶酶体的途径是：2核糖体→1内质网→4高尔基体→溶酶体；（3）图中过程⑥→⑨说明溶酶体具有分解衰老、损伤的细胞器的功能，溶酶体的功能说明其膜的结构特点是具有一定的流动性。高尔基体存在于动植物细胞中，动物细胞的高尔基体与分泌功能有关，植物细胞的高尔基体与细胞壁的形成有关，因此动、植物细胞都有，但是功能不同的是高尔基体，即图中4；（4）分析甲图可知，用35S标记一定量的氨基酸，来培养乳腺细胞，放射性强度最先出现在a，然后出现在b，最后出现在c，由于分泌蛋白首先在内质网上的核糖体上经翻译过程形成，然后先后进入内质网和高尔基体上进行加工，因此a、b、c分别是核糖体、内质网、高尔基体；分析乙曲线可知，在分泌蛋白的形成过程中，由于内质网不断“出芽”形成囊泡，因此内质网的膜面积减少；高尔基体不断与内质网上的囊泡融合，然后再“出芽”形成囊泡，因此高尔基体膜面积不变；而细胞膜不断与高尔基体上形成的囊泡融合，因此细胞膜的膜面积增加，说明d是内质网，e是细胞膜，f是高尔基体。故选A。（5）由于细胞中含有细胞膜、核膜和细胞器膜，细胞膜的基本骨架是磷脂双分子层，则口腔上皮细胞表面积的值小于S/2；（6）核仁的体积与代谢强度密度相关，代谢活跃的细胞中核仁体积增大；（7）尿嘧啶存在于RNA中，图中含有RNA的细胞器有核糖体和线粒体，故答案是2、3、5。8、富含纤维素增加产β-葡萄糖苷酶菌株的浓度配制含基本成分的培养基，加入七叶灵、Fe3+，用稀释涂布平板法接种并在适宜条件下培养，粽黑色圈大的菌落即为目标菌落平板划线透析法凝胶色谱法化学结合或物理吸附【解析】

1.寻找目的菌株的原理是需要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。2.固定化酶和固定化细胞技术是指利用物理或化学方法，将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。3.凝胶色谱法也称为分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动的速度较慢，而相对分子质量较大的蛋白质，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动的速度较快，相对分子质量不同的蛋白质分子得以分离。【详解】（1）实验目的是要筛选出β-葡萄糖苷酶高产菌株，而β-葡萄糖苷酶是一种存在于微生物中的可水解纤维素的酶，据此可知要找到目的菌需要到富含纤维素的环境中取样，取样后，为了增加产β-葡萄糖苷酶菌株的浓度，要将样品菌在液体培养基中进行选择培养。（2）题意显示七叶灵能在β-葡萄糖苷酶的作用下水解，其水解产物七叶苷原能和Fe3+作用呈现棕黑色，若要初步分离鉴定出目的菌株，需要在鉴定培养基中加入七叶灵（能在β-葡萄糖苷酶作用下分解）、Fe3+（与七叶灵的水解产物发生颜色反应），为得到单菌落需用稀释涂布平板法接种，然后置于适宜条件下培养，在该培养基中呈现棕黑色的菌落即为目的菌。（3）用接种针挑取棕黑色的菌落，然后用平板划线法接种，置于适宜条件下进一步纯化培养，进而筛选出高产菌株。（4）将高产菌株扩大培养，获得发酵液，因为透析袋允许小分子自由出入，而不能让大分子透过，故用透析法处理之后，发酵液中分子量小的杂质就能够被除去，再用凝胶色谱法进一步纯化，最终获得纯度较高的β-葡萄糖苷酶。（5）生产中为降低成本，β-葡萄糖苷酶最好采用化学结合或物理吸附法固定，以便重复使用，同时也能与产物有效的分离。【点睛】熟知相关的基础知识是解答本题的关键！能够从题目中找到关键信息解答本题中筛选目的菌的原理是解答本题的另一关键！9、1322+YY4XBXBXBXbXBYXbY宽叶雌株：宽叶雄株：窄叶雄株=2：3：1宽叶雄株：窄叶雄株=3：1【解析】

不同类型的生物基因组测序的计算方法有差异，没有性染色体的生物，测序的染色体条数=染色体总数×1/2；有性染色体的生物，测序的染色体条数=常染色体总数×1/2+两条异型的性染色体。【详解】（1）根据题意，女娄菜（2N=24）为XY型性别决定植物，如果对女娄菜的基因组进行测序，需要测（24-2）×1/2+X+Y共13条染色体。（2）窄叶雄株基因型为XbY，含有基因b的花粉粒致死，故窄叶雄株只产生性染色体为Y染色体的花粉粒，进行花药离体培养，再将幼苗用秋水仙素处理，所得植株的染色体组成为22+YY。（3）含有基因b的花粉粒致死，故不存在XbXb的个体，宽叶和窄叶的基因型共有4种，分别是XBXB、XBXb、XBY和XbY。（4）现以杂合宽叶雌株XBXb和宽叶雄株XBY为亲本进行杂交得F1，F1基因型为XBXB、XBXb、XBY、XbY，含有基因b的花粉粒致死，故F1产生的卵细胞XB：Xb=3：1，产生的精子XB：Y=1：2，故自由授粉得到的F2表现型及比例是宽叶雌株：宽叶雄株：窄叶雄株=2：3：1，若对上述F1雌株进行测交，则子代表现型及比例是宽叶雄株：窄叶雄株=3：1。【点睛】本题考查基因组测序、伴性遗传相关知识点，掌握相关知识结合题意答题。10、之后果胶酶（和果胶甲酯酶）含糖量较低干酵母（悬液）出现气泡酵母下沉无菌空气/氧气抑制杂菌反向拼接/倒接、（自身）环化且的基因的浓度、质粒的浓度、反应时间氯化钙CaCl2不是所有的农杆菌都接纳了重组质粒在含四环素培养基上存活，在含青霉素培养基上死亡营养物质和生长调节剂/植物激素项端分生组织继代培养【解析】

1.酿酒和制醋是最古老的生物技术。与酒和醋的生产有关的微生物分别是酵母菌和醋杆菌，它们各有不同的菌种。菌种的不同，所产生的酒和醋的风味也不同。本实验的内容是制作果酒和果醋，所用的原料是葡萄或其他果汁。葡萄酒是酵母利用葡萄糖进行酒精发酵(乙醇发酵)的产物。酵母菌只有在无氧条件下才能进行酒精发酵，即将葡萄糖氧化成乙醇，而且当培养液中乙醇的浓度超过16%时，酵母菌就会死亡。葡萄糖氧化成乙醇的反应式如下。醋杆菌在有氧条件下才能将乙醇氧化为醋酸，醋杆菌所产生的醋酸可使培养液中醋酸的含量高达13%。2.基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．【详解】（一）（1）制备山楂果原汁通常选成熟的山楂果，为了避免杂菌污染，通常在用清水冲洗山楂果之后去梗。将山楂果切片并去籽，为了提高出汁率和澄清度，通常需要添加果胶酶（和果胶甲酯酶）处理，酶解适宜时间后压榨取果汁。（2）乙醇发酵时通常需要在发酵液中添加适量蔗糖，以弥补山楂果原汁含糖量较低的不足，同时也是为了满足酵母菌发酵需要的底物量，从而获得酒精含量较高的果酒。然后在果汁中加入活化的干酵母（悬液）后，置于适宜环境下进行发酵，由于酵母菌无氧呼吸的产物是酒精和二氧化碳，所以在发酵过程中会有气泡产生，当发酵液中不再出现气泡时，意味着发酵完成，然后过滤获得果酒；也可发酵至酵母下沉后，用虹吸法取出上清液即为果酒。（3）醋酸发酵中，由于醋化醋杆菌在有氧气的条件下将酒精变为为乙醛，进而变为乙醇，所以整个发酵过程需要通入无菌空气/氧气。在发酵后期加入1．3~1．4%的食盐，食盐起到了调味和抑制杂菌的作用，进而防止果醋被其他微生物发酵分解。（二）（1）①为构建基因表达载体的过程，若用同一种限制性核酸内切酶处理Ti质粒和含目的基因的DNA片段，则两者会出现相同的粘性末端从而使得拼接变得容易，但这种方法存在明显的缺点是在拼接时会出现反向拼接/倒接、（自身）环化等情况。影响拼接效率的因素主要有盐离子