临床医学检验考试辅导《微生物检验》需氧或兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验讲义

需氧或兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验

棒状杆菌属（白喉棒状杆菌）、炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、产单核李斯特菌

生物学性状

临床意义

微生物学检查

【内容讲解】

需氧革兰阳性杆菌：

棒状杆菌属芽胞杆菌属李斯特菌属丹毒丝菌属加特纳菌属

形态棒状杆菌有芽胞短杆、链或丝状细杆或线状杆菌、多形性

触酶+++——

动力—++——

对氧需、兼需、兼兼T牛兼^性兼性

G+Cmol%51〜6532〜6036〜3835〜4042〜44

一、棒状杆菌属

G',杆菌，菌体粗细、长短不一，一端或两端膨大呈棒状。

着色不匀，有异染颗粒。无鞭毛、无荚膜、无芽胞。

需氧，营养要求较高。

引起人类致病的主要是白喉棒状杆菌,其他大多数为条件致病菌。

（-）白喉棒状杆菌

1.生物学性状

（1）形态与染色：

菌体细长微弯，一端或两端膨大的革三阳性杆菌。细菌排列呈散在L、V、Y字形及不规则栅栏状。

无荚膜、无芽胞、无鞭毛、无菌毛。

异染颗粒：Neisser（奈瑟）染色；Albert（阿培特）染色。

这是白喉棒状杆菌的形态学特征，对鉴别细菌有重要意义。

异染颗粒（浓染颗粒）

Neisser（奈瑟）染色：

菌体染成黄褐色，颗粒被染成紫黑色;

Albert（阿培特）染色:

菌体呈蓝绿色，异染颗粒蓝黑色。

(2)培养特性：

在普通培养基上生长不良，形态不典型。

1)血液琼脂平板：灰白色S型菌落，有狭窄的B溶血环。

2)吕氏(Loeffler)血清斜面培养基：生长迅速，形成灰白色、湿润、S型菌落。涂片染色形态典型,

异染颗粒明显。

3)亚确酸钾血琼脂：本菌能吸收亚碇酸盐，并使其还原为元素硫，使菌落呈黑色。

4)液体培养基。

(3)生化反应：

触酶试验阳性，氧化酶试验阴性。

分解葡萄糖、麦芽糖、果糖、半乳糖，产酸不产气。不分解乳糖，极少分解蔗糖。

能还原硝酸盐，不液化明胶，不产生口引噪，不分解尿素。

据亚碗酸钾血琼脂培养基、肉汤培养基的生长特点及生化反应，可将本菌分为轻、中、重三型。在我

国以轻型多见。

分型与所致疾病的严重程度无关，可用于流行病学调查。

2.致病性

致病物质：

白喉棒状杆菌引起白喉，多在秋冬季节流行。以咽白喉最常见，喉白喉及鼻白喉次之，偶亦引起眼结

膜、外耳道、阴道及皮肤的局部病变。

本菌一般不侵入血流，但其产生的大量外毒素可吸收入血，引起毒血症。毒素能与敏感的心肌、肝、

肾、肾上腺等组织细胞及外周神经，尤其与支配咽肌和腭肌的神经结合，引起细胞变性、坏死、内脏出血

和神经麻痹等严重损害，是白喉晚期死亡的正要原因.

免疫性：

白喉的免疫主要是抗毒素免疫，同时巨噬细胞吞噬消化能力也加强。

调查人群在感染或计划免疫后对白喉是否产生免疫力，可用锡克试验或致敏红细胞凝集试验。

3.微生物学检验

(1)标本采集：

无菌长棉拭子，从可疑的伪膜边缘采集分泌物，未见伪膜的疑似。

患者或带菌者可采集鼻咽部或扁桃体黏膜上的分泌物。

(2)检验方法及鉴定

标本

分离培养

革兰染色异染颗粒染色

吕氏血清斜面亚硫酸钾血琼脂平板

初步报告：

“检出形似白喉

棒状杆菌”生长情况

生长情况:

吕氏血清斜面培养基亚硫酸钾血琼脂平板报告

+++

++

+—可疑

———（72h后）-

(3)生化反应：

主要用于鉴别白喉棒状杆菌与类白喉棒状杆菌。

尿素分解试验：白喉棒状杆菌(-),类白喉棒状杆菌(+)。

(4)毒力试验：可作为鉴定致病菌株的重要依据。

体外法：Elek平板毒力测定、SPA协同凝集试验、对流免疫电泳。

体内法：可用豚鼠作毒素中和试验。

(5)临床意义：白喉杆菌的致病因素为白喉外毒素,抗原性强，毒性剧烈。K抗原(表面抗原)及索

状因子亦与其致病力有关。引起的白喉是一种急性呼吸道传染病。白喉的免疫主要是抗毒素免疫。白喉棒

状杆菌可引起人类白喉，白喉是一种急性呼吸道传染病，该病原菌存在于患者及带菌者的鼻咽腔中，随飞

沫或污染的物品传播。白喉棒状杆菌可致气管、支气管假膜，是白喉早期死亡的主要原因，其产生的外毒

素也经血液与易感组织结合，出现各种症状如心肌炎、软腭麻痹等，是白喉晚期死亡的主要原因。

(6)治疗原则：

用青霉素或红霉素等进行抗感染治疗，同时应尽早注射足量白喉抗毒素。

注射抗毒素前，应做皮试。

(二)其他棒状杆菌

棒状杆菌除白喉棒状杆菌外，其余统称为类白喉棒状杆菌。

一般无致病性或仅能与其他化脓细菌产生混合感染，有的可能为条件致病菌。

类白喉棒状杆菌常寄生于人类或动物鼻腔、咽喉、外耳道、眼结膜、外阴及皮肤表面等处。

二、芽胞杆菌属

有芽胞的革兰阳性大杆菌。大多数菌种在有氧环境下形成芽胞。有动力，非抗酸性。

需氧或兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好。

炭疽杆菌是人畜共患的重要致病菌，蜡样芽胞杆菌能致食物中毒。

(-)炭疽芽胞杆菌

人畜共患的急性传染病。

1.生物学特性

(1)形态与染色：

致病菌中最大的革兰阳性杆菌，两端齐平，呈竹节状。在组织内生长呈单个或短链，试管内可形成长

链。

无鞭毛，机体内或含血清培养基上可形成荚膜。人工培养或在外界环境中易产生芽胞，形状椭圆，位

于菌体中央，其直径小于菌体。

(2)培养特性：

专性需氧。

普通琼脂平板：形成灰白色、不透明、无光泽、边缘不整齐、大而扁平的粗糙型菌落,在低倍镜下观

察，呈卷发状。

血液琼脂平板：出现轻微溶血。

普通肉汤：管底有絮状卷绕成团的沉淀物生长，表面稍混但不形成菌膜，中层肉汤清亮。

碳酸氢钠琼脂平板：

有毒株-形成黏稠、有光泽的黏液型(M型)菌落，这是有荚膜的菌体构成的。

无毒株-粗糙型(R型)。

(3)生化反应：

分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，产酸不产气，不分解乳糖。

不产生靛基质及HzS。

能迟缓液化明胶，沿穿刺线向四周扩散，形如倒松树状。

(4)抗原构造：

①菌体多糖抗原；

②荚膜多肽抗原；

③芽胞抗原；

④炭疽毒素抗原。

(5)本菌芽胞体抵抗力很强，在干燥土壤或皮毛中常温下可存活数十年。一般对碘及氧化剂较敏感。

2.致病性：

毒力因子：荚膜和炭疽毒素。炭疽毒素是致死的主要因素。

所致疾病：皮肤炭疽、肺炭疽、肠炭疽，病死率很高。

免疫性：病后可获得持久性免疫力，再感染者少见。

3.微生物检验

标本

注意芽胞污染

*-分离培养

革兰染色英膜染色

I_______________I*

鉴定试验

I♦

有英膜的革兰阳一

性竹节状大杆菌、，重碳酸鑫毒力

I串珠试验生长试第(M)

初步诊断|_

最赢断

(二)蜡样芽胞杆菌

1.生物学性状

G'大杆菌，呈链状排列，芽胞位于菌体中心或次末端不突出菌体。

引起食物中毒的菌株多为周毛菌，不形成荚膜。

营养要求不高，菌落较大，表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状。

2.临床意义

大量的蜡样杆菌污染(10"〜10%)可致食物中毒，有腹泻型与呕吐型之分。

3.微生物检验

除作分离培养外，细菌计数对本菌所致食物中毒有诊断价值。

三、产单核李斯特菌

(-)生物学特性

1.形态染色：

菌体短小大小，常呈V字形或成对排列，偶呈丝状。

有鞭毛、无芽胞，20℃有动力,37C动力缓慢，一般不形成荚膜。

幼龄菌呈革兰阳性，陈旧培养物多转为革兰阴性。

2.培养特性：

需氧或兼性厌氧，营养要求不高。

血琼脂平板：形成小而透明的S型菌落，有狭窄的B溶血环。

因其能生长于4℃,故可进行冷增菌。

半固体培养基：出现倒伞形牛长。

3.生化反应

不发酵甘露醇和木糖，硝酸盐还原阴性，CAMP阳性。

可发酵多种糖类，触酶阳性，不形成哼I口朵，不分解尿素，能水解七叶首。

4.根据菌体及鞭毛抗原的不同，可分4个血清型。

5.本菌耐碱不耐酸。对热较为敏感，加热50℃10分钟可死亡。

(二)致病性

致病物质主要是溶血素和菌体表面成分。

由带菌动物或人粪便污染动物制品，而经口感染。通过胎盘或产道感染新生儿是本病的重要特点。宫

内感染常可导致流产、死胎及新生儿败血症，死亡率较高。

本菌常伴随EB病毒引起传染性单核细胞增多症，此外可引起脑膜炎。

机体主要靠细胞免疫功能清除本菌。

(三)微生物检验

1.标本采集根据感染部位不同而采取相应标本。

2.检验方法与鉴定

(1)分离培养：将标本接种两支脑心浸液培养基中。分别置37℃和4℃培养。转种血平板上。从血平

板上挑取8溶血环的菌落，做涂片染色镜检并进一步鉴定。

(2)鉴定：

在血琼脂上有狭窄的P溶血环，25℃动力最强，在半固体培养基上呈伞状生长，可在4℃冷增菌生长,

木糖、甘露醇和H2s阴性。CAMP(与金黄色葡萄球菌协同溶血)阳性。触酶阳性。

四、丹毒丝菌属

红斑丹毒丝菌为革兰阳性杆菌，单个存在或形成短链。

无芽胞、无鞭毛、无荚膜。

厌氧或微需氧菌，初次分离要在厌氧环境中培养。

血琼脂平板形成两种菌落：光滑型菌落-细小、圆形、突起有光泽；粗糙型菌落-大，表面呈颗粒状。

触酶试验阴性。48小时发酵葡萄糖、乳糖，产酸不产气。

对湿热及化学消毒剂敏感。

红斑丹毒丝菌引起红丹毒丝病，感染局部的皮肤发红、肿胀、疼痛、或有痒感。也可引起急性败血症

或心内膜炎。

本菌对青霉素、头抱菌素、红霉素和四环素等药敏感。

五、阴道加特纳菌

引起非淋菌性阴道炎的主要病原菌之一。

新鲜标本分离菌株趋向革兰染色阳性，保存菌株趋向革兰染色阴性。本菌无芽胞、无荚膜、无鞭毛，

多形性。

营养要求较高，在5%人血平板上，在3%〜5队0八可形成针尖大小菌落，在人血