医学动物实验操作技术专家讲座

医学动物试验操作技术应华忠YHZ医学动物实验操作技术第1页动物试验：动物试验是用试验动物作为人替身进行各种生命科学试验过程。动物试验操作技术：是实施动物试验主要伎俩，在不一样研究领域有其不一样目标和应用，一些基本操作技术是共同，基本动物试验技术需要训练。

内容：动物试验准备、动物试验基本操作技术、动物试验后管理技术以及应该注意影响动物试验效果原因等YHZ医学动物实验操作技术第2页动物试验结果ByChenMin-li动物反应

：R＝(A+B+C)×D±E式中：R——试验动物总反应

A——试验动物种共同反应

B——动物品种及品系特有反应

C——动物个体反应（个体差异）

D——环境影响（包含试验处理）

E——试验误差(试验操作相关)YHZ医学动物实验操作技术第3页第一节动物试验前准备一、动物试验相关准备试验目标明确（课题设计）：研究、申报新药资料动物试验相配套设备、仪器、试剂标准试验动物喂养设施YHZ医学动物实验操作技术第4页二、试验动物相关准备

试验动物质量合格证实适量饲料和垫料（高脂等特殊饲料）运输中各种原因对试验动物影响，并应查看运输检疫证实动物需要隔离观察（普通3～7d适应观察）

YHZ医学动物实验操作技术第5页三、试验动物分组随机化标准：样本含有极好代表性，非试验原因方面含有极好均衡性,提升试验资料可比性与结论说服力。完全随机化效果是否永远最好?不一定。关键取决于样本含量大小。若样本含量很大,完全随机化效果比较理想;若样本含量比较小,有时完全随机化结果可能会出现一些偏差。比如：24只小鼠,其中16只雌性,8只雄性,若采取完全随机化方式均分成2组,则有可能一组中12只小鼠全是雌性,另一组中有4只雌性、8只雄性小鼠。“性别”这个主要非试验原因就严重地影响试验。此时,宜采取“分层随机化”。随机化方法有各种,能够查“随机数字表”、“随机排列表”或查“用计算机产生伪随机数字表”YHZ医学动物实验操作技术第6页试验单位随机分为三组分组情况动物号码123456789101112131415随机数字186240191240839534194491690330余数321131221121333归组CBAACABBAABACCCA组346910B组2781112C组15131415YHZ医学动物实验操作技术第7页YHZ医学动物实验操作技术第8页动情前期可见大量有核上皮细胞YHZ医学动物实验操作技术第9页动情期可见大量角化上皮细胞YHZ医学动物实验操作技术第10页交配后大鼠阴道分泌物，可见精子YHZ医学动物实验操作技术第11页四、试验动物编号与标识1、染色法：用化学试剂或药品在试验动物体表不一样部位进行涂染，并用不一样颜色区分各组动物。编号标准是先左后右，从前到后，从上到下。有时用两种颜色一个代表十位、一个代表个位。惯用染色剂有3%~5%苦味酸（黄色）、2%硝酸银溶液（咖啡色）、0.5%中性品红溶液（红色）和煤焦油酒精溶液（黑色）。YHZ医学动物实验操作技术第12页YHZ医学动物实验操作技术第13页2、耳缘剪孔法：是在动物耳边缘剪出不一样缺口或打成不一样小孔进行标识方法。为预防孔、口愈合，普通在打孔后用消毒滑石粉涂抹在孔、口局部。由打孔或剪切位置和孔数代表编号，普通在耳内按上、中、下打孔，分别代表1、2、3，在对应位置剪缺口代表4、5、6，剪两个缺口代表7、8、9，无孔或缺口为10。普通左耳代表个位数、右耳代表十位数。3、烙印法：用烙印钳或刺针将号码刺在或烙印在动物无体毛或显著部位，如耳、面、鼻部及四肢等，然后用溶在酒精中黑墨在针刺处涂抹。这种方法适合用于大中型试验动物，操作时要注意预防感染。YHZ医学动物实验操作技术第14页YHZ医学动物实验操作技术第15页（四）号牌法：用特制金属号牌固定在试验动物耳上或颈项部，挂牌时要注意避开血管。此法适合用于小动物,尤其是转基因动物培育和试验。（五）笼子编号法：不在动物身体上作标识而把装动物笼子进行编号，也叫替换法。YHZ医学动物实验操作技术第16页第一节、试验动物抓取与固定YHZ医学动物实验操作技术第17页第二节试验动物抓取和固定YHZ医学动物实验操作技术第18页

1、小鼠抓取保定：

器材：小鼠喂养盒+面罩1套。

方法步骤：

1、用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部将小鼠提起，放在喂养合面罩上。

2、用左手拇指和食指快速、准确地捏住小鼠两耳后、颈背部皮肤，将小鼠提起。YHZ医学动物实验操作技术第19页

3、翻转左手掌，以左手掌心和中指夹小鼠背部皮肤，使小鼠整个呈一条直线。

4、用左手无名指压住小鼠背部皮肤，小指压住小鼠尾巴根部。

5、松开捏住小鼠尾巴右手拇指和食指。YHZ医学动物实验操作技术第20页YHZ医学动物实验操作技术第21页手术固定法：用乙醚等麻醉药品麻醉后，用长20~30cm线绳分别系在四肢上，再把四肢线绳分别系在固定板四角钉子上，而且在头部上颚切齿地方牵一根线绳到达完全固定。在静脉给药时，先依据小鼠大小选择适当固定器，打开鼠筒盖，把小鼠放在里面，只露出尾巴；或者用倒放烧杯将鼠扣住，只露出尾巴并压住。YHZ医学动物实验操作技术第22页二、大鼠抓取与固定2、大鼠抓取与固定抓取方法：4~5周龄以内大鼠同小鼠；周龄较大大鼠其尾部皮肤轻易被剥脱，所以用左手从背部中央到胸部捏起来抓住。抓取时最好带防护手套，但手套不宜过厚。手固定法：同小鼠。手术固定法：同小鼠。静脉给药或采血时同小鼠。YHZ医学动物实验操作技术第23页YHZ医学动物实验操作技术第24页YHZ医学动物实验操作技术第25页三、豚鼠抓取与固定抓取方法：抓取幼小豚鼠时，用手捧起来；成熟大豚鼠，用手大把抓起胸肋部即可。注意不能粗野，更不能抓取腰腹部，这么轻易造成肝破裂而死亡。手固定法：⑴将左手食指和中指放在豚鼠颈背部两侧，拇指和无名指放在肋部，分别用手指夹住左右前肢抓起来。⑵反转左手，用右手拇指和食指夹住右后肢，用中指和无名指夹住左后肢是豚鼠整体伸直成一条直线。⑶一个人固定操作时，坐在椅子上，用右手拿着豚鼠后肢夹在两腿之间，用大腿代替右手夹住。手术固定法：同大、小鼠。YHZ医学动物实验操作技术第26页

方法步骤：

1、先用左手轻轻扣、按住豚鼠背部。

2、顺势抓紧其肩胛上方皮肤，拇指和食指环箍其颈部。

3、用右手轻轻托住其臀部，即可将豚鼠抓取保定。YHZ医学动物实验操作技术第27页四、家兔抓取与固定抓取方法：用一只手大把抓住颈背部皮肤提起来，另一只手托住其臀部，让其重心落在托其臀部手上，运输时，还要抓住颈肩部皮肤抱着兔子运输。手固定法：在灌胃给药时，人坐在椅子上，用一只手抓住颈背部皮肤，另一只手抓住两后肢放在两腿之间，大腿夹住兔子下半身，用空着手抓住两前肢固定之，抓住颈背部手同时捏着两只耳朵，不让头部转动。YHZ医学动物实验操作技术第28页固定器固定法：耳静脉给药或采血时用盒式固定法；从颈动脉采血或手术试验时用台式固定法。盒式固定法：把兔子放在盒子里，只露出头部，用转扭拧固定器固定家兔。台式固定法：将麻醉兔子仰卧，用纱布条依次将四肢捆绑固定于固定台两侧，然后把头部放在金属制首伽和咀环上固定。YHZ医学动物实验操作技术第29页兔抓取保定方法1：步骤：

1、用右手把兔两耳拿在手心并抓住颈后部皮肤，把兔提起。

2、然后用左手托住兔臀部。YHZ医学动物实验操作技术第30页方法2：器材：兔保定架步骤：1、打开保定架上盖，抓取并将兔放进架内，快速关上保定架上盖。2、右手抓住兔耳朵将头部拉过保定架卡栓，将兔脖子保定。3、假如兔挣扎，可用手在它背上轻轻抚摩，使其平静。YHZ医学动物实验操作技术第31页五、犬抓取与固定抓取方法：先给犬带上系有铁链条脖套，对于性情凶猛犬，要用特制钳式长柄犬夹夹住犬颈部将犬按倒后，再系脖套和链条。手固定法：首先绑住犬嘴，方法是喂养员或犬主人从侧面靠近并轻轻抚摩其颈部皮毛，然后快速用布带绑住犬嘴，布带从下颌绕到上颌打一个结，再绕到下颌打一个结，然后将布带绕到头后颈，在颈后部再打一个结，最终打一个活结，对于未经驯服犬，可用长柄犬夹夹住犬颈部按倒后强制绑嘴。手术台固定法：麻醉后，松开布带，将犬仰卧在手术台上，先固定四肢，再固定头部。YHZ医学动物实验操作技术第32页YHZ医学动物实验操作技术第33页六、猴抓取与固定抓取方法：从笼内抓取时，喂养人员应右手持短柄网罩，左臂紧靠门侧，以预防笼门敞开时猴逃出。右手将网罩塞入笼内，由上而下罩捕。当猴被罩住后，应马上将网罩翻转取出笼外，罩猴在地，由罩外抓住猴颈部，清掀网罩，再提取猴手臂反背握住。固定方法：1.徒手固定：将猴两前肢反背其背后，操作者用一只手握着，用另一只手将猴两后肢捉住即可固定。2.固定架固定：使用“猴限制椅”或“猴固定架”进行固定YHZ医学动物实验操作技术第34页YHZ医学动物实验操作技术第35页七、猪抓取与固定抓取方法：小猪常采取双手提起后肢，两膝夹住猪背倒立固定；成猪可采取站立固定。固定方法：可将猪仰放在“V”字型槽内固定，也可用木制三角固定架和帆布吊兜固定（挖四个孔使其四肢下伸）。如没有三脚架，也能够用犬固定台。YHZ医学动物实验操作技术第36页一、惯用麻醉剂（一）挥发性麻醉剂包含乙醚、氯仿、异氟烷（Isoflurane）。（二）非挥发性麻醉剂包含苯巴比妥钠、戊巴比妥钠(Pentobarbitol)、硫喷妥钠、氨基甲酸乙脂、水合氯醛、氯胺胴（Ketamine）、噻啦嗪（Xylazine）、速眠新、乌拉坦。（三）中药麻醉剂包含洋金花、氢溴酸东莨菪碱等。第三节、试验动物麻醉YHZ医学动物实验操作技术第37页二、动物麻醉方法（一）全身麻醉1.吸入麻醉：多采取乙醚做麻醉药。把带有乙醚棉球放入玻璃容器内，挥发后将动物放入容器内4~6分钟，动物失去运动力后马上取出动物以防止麻醉过深致死。此法多用于短期操作性试验，乙醚麻醉优点是清醒快，不过对呼吸道刺激性大，长时间轻易窒息死亡。2.注射麻醉：大、小鼠和豚鼠常采取腹腔注射法进行全身麻醉，犬、猫、兔等既可腹腔注射也可静脉注射给药。注射时，先用麻醉药总量2/3，亲密观察动物生命体征改变，如已经到达所需麻醉程度，余下麻醉药则不用，防止麻醉过深抑制大脑呼吸中枢造成动物死亡YHZ医学动物实验操作技术第38页

各种动物惯用全身麻醉剂剂量及路径剂量(mg/kg体重)动物注射戊巴比巴比苯巴比硫喷异戊巴氯胺酮氯醛糖乌拉坦路径妥钠妥钠妥钠妥钠妥钠比妥钠(20%~25%)(1%~3%)(1%~2%)(5%~10%)(10%)小鼠i.p50~80200/15~20100100~200//i.m///////1350大鼠i.p40~50200/40~100100100~200550/i.m///////1350s.c//100~110////800~1000豚鼠i.p30~50100//100///i.m///20~50///1350兔i.p25~40///80~120///i.v20~30225~300/15~2040~50/80~100750~1000犬i.p30//20~5080~10010~40//i.v3022550~10015~2040~50/60750~1000

口服/350////1001500注:i.p指腹腔注射,i.m指肌肉注射,s.c指皮下注射,i.v指静脉注射YHZ医学动物实验操作技术第39页（二）局部麻醉1.表面麻醉:利用局部麻醉药组织穿透作用，透过粘膜，阻滞浅表神经末梢，称为表面麻醉。惯用利多卡因，眼部用药点滴、鼻内用要涂敷、咽喉气管用药喷雾、尿道灌注给药。2.区域阻滞麻醉：在手术区内四面和底部注射麻醉药阻断疼痛向心传导，称为区域阻滞麻醉。惯用普鲁卡因。3.神经干(丛)阻滞麻醉：在神经干(丛)四面注射麻醉药，阻滞其传导，使其所支配区域疼痛感觉消失，称为神经干(丛)阻滞麻醉。惯用利多卡因。4.局部浸润麻醉：沿手术切口逐层注射局部麻醉药，阻滞组织中神经末梢，称为局部浸润麻醉。惯用普鲁卡因。YHZ医学动物实验操作技术第40页三、麻醉注意事项1.有些麻醉药，如乙醚挥发性很强，易燃，使用时应远离火源，平时应妥善保留。2.应尤其注意各种麻醉药剂量和给药路径，切莫因药量过大而引发中毒或死亡。3.注射时，普通要求迟缓注入，并随时观察动物肌肉担心性、角膜反射、呼吸频率、疼痛反射等指标。4.注意保温，采取试验桌内装灯、电褥、台灯照射等。5.万一麻醉过量，依据不一样情况采取办法，如施行人工呼吸、给予清醒剂或注射强心剂、咖啡因、肾上腺素、可拉明等，也能够静脉注射5%温热葡萄糖溶液。YHZ医学动物实验操作技术第41页一、小鼠给药方法：

(一)灌胃给药（经口给药）原理：将药液直接注入小鼠胃内。器材：小鼠灌胃针1支、注射器1支、小鼠喂养盒+面罩1套、生理盐水、烧杯。第四节给药方法YHZ医学动物实验操作技术第42页

方法步骤：1、将灌胃针连接在注射器上，吸入一定量药液。2、左手捉持小鼠，使小鼠头部向上。3、右手将灌胃针头尖端从小鼠口角处进针放进小鼠口咽部，顺咽后壁轻轻往下推，灌胃针会顺着食管滑入小鼠胃内。灌胃针插入约3cm.4、用右手食指将针栓慢慢往下压，将注射器中药液灌入小鼠胃中。YHZ医学动物实验操作技术第43页最大剂量：0.4ml／10g体重。注意：在灌胃过程中，防止误插入气管。YHZ医学动物实验操作技术第44页（二）注射给药1、皮下注射给药：原理：将药液注入皮下结缔组织，经毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环。器材：1m1注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球。YHZ医学动物实验操作技术第45页

方法步骤：

(1)注射部位：选小鼠项背部皮下。(2)常规消毒注射部位皮肤，用注射针头取一锐角角度刺入皮下，

(3)将针头轻轻向左右摆动，易摆动则表示已刺入皮下，再轻轻抽吸，如无回血，可迟缓地将药品注入皮下。注射量：0.01ml—0.03ml／g体重。YHZ医学动物实验操作技术第46页2、肌肉注射给药

原理：将药液注入动物肌肉组织，经毛细血管吸收进入血液循环。

器材：1ml注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球。YHZ医学动物实验操作技术第47页方法步骤：(1)操作时1人先将小鼠捉持保定好。(2)另1人用左手抓住小鼠1条后肢，右手拿注射器，常规消毒注射部位皮肤。(3)将注射器针头在动物后肢大腿外侧肌肉丰富处呈60度角快速刺入后注入药液。注射量：0.01m1／g体重。YHZ医学动物实验操作技术第48页3、静脉注射给药

原理：将药液注入小鼠尾静脉。

器材：1m1注射器1支、生理盐水、烧杯、金属笼或小鼠固定器、酒精、碘酒、棉球。YHZ医学动物实验操作技术第49页

方法步骤：

(1)将小鼠放在金属笼或小鼠固定器中，经过金属笼或小鼠固定器孔拉出小鼠尾巴。(2)用左手捏住小鼠尾巴中部，用75％酒精棉球重复擦拭尾部。

(3)注射时，以左手拇指和中指捏住鼠尾两侧，用食指从下面托起尾巴，以无名指夹住尾巴末梢。(4)右手持4号针头注射器，使针头与静脉平行（小于30度角）。YHZ医学动物实验操作技术第50页(5)从小鼠尾巴下1／4处进针，仔细观察，假如无阻力，无白色皮丘出现，说明已刺入血管，即可注入药品。(6)拔出针头后，用干棉球压住注射部位约l、2min，预防出血。

注射量：

0.05m1—0.025m1／g体重。

YHZ医学动物实验操作技术第51页

4、腹腔注射给药

原理：将药液注入小鼠腹腔。

器材：注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球。

YHZ医学动物实验操作技术第52页

方法步骤：

(1)用左手将小鼠捉持保定，使鼠腹部朝上，鼠头略低于尾部。

(2)右手持注射器将针头在下腹部靠近腹白线两侧进行穿刺。

YHZ医学动物实验操作技术第53页(3)针头刺入皮下后进针3mm左右，接着使注射针头与皮肤呈45度角刺入腹肌，穿过腹肌进入腹膜腔，当针尖穿过腹肌进入腹膜腔后抵抗感消失。(4)固定针头，保持针尖不动，回抽针栓，如无回血、肠液和尿液后即可注射药液。注射量：

0.5m1—1m1／只。

YHZ医学动物实验操作技术第54页二、大鼠给药方法：

(一)灌胃给药

原理：将药液直接注入大鼠胃内。

器材：大鼠灌胃针1支、注射器1支、大鼠喂养盒+面罩l套、生理盐水、烧杯。

YHZ医学动物实验操作技术第55页方法步骤：

1、将灌胃针连接在注射器上，吸入一定量药液。2、左手捉持保定大鼠，右手将灌胃针头尖端放进大鼠口咽部，顺咽后壁轻轻往下推，灌胃针会顺着食管滑入大鼠胃内。灌胃针插入约5cm.YHZ医学动物实验操作技术第56页

3、用右手食指将针栓慢慢往下压，将注射器中生理盐水灌入大鼠胃中。剂量：2ml／100g体重。注意：在灌胃过程中，防止误插入气管。

YHZ医学动物实验操作技术第57页(二)注射给药

1、皮下注射给药

原理：将药液注入皮下结缔组织，经毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环。

器材：5ml注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球。YHZ医学动物实验操作技术第58页

方法步骤：

(1)注射部位：选大鼠项背部皮下。(2)常规消毒注射部位皮肤，用注射针头取一锐角角度刺入皮下。(3)将针头轻轻向左右摆动，易摆动则表示已刺入皮下，再轻轻抽吸，如无回血，可迟缓地将药品注入皮下。注射量：0.01ml／g体重。

YHZ医学动物实验操作技术第59页2、肌肉注射给药

原理：将药液注入动物肌肉组织，经毛细血管吸收进入血液循环。

器材：1m1注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球。

YHZ医学动物实验操作技术第60页

方法步骤：

(1)操作时1人先将大鼠捉持保定好。(2)另1人用左手抓住大鼠1条后肢，右手拿注射器，常规消毒注射部位皮肤。(3)将注射器针头在动物后肢大腿内侧肌肉丰富处呈90度角，快速刺入后注入药液。注射量：0.5m1-1m1。YHZ医学动物实验操作技术第61页

3、静脉注射给药

原理：将药液注入大鼠尾静脉。

器材：

1ml注射器1支、生理盐水、烧杯、金属笼或大鼠固定器、酒精、碘酒、棉球。YHZ医学动物实验操作技术第62页

方法步骤：

(1)将大鼠放在金属笼或大鼠固定器中，经过金属笼或鼠夹孔拉出大鼠尾巴。

(2)用左手捏住大鼠尾巴中部，用75％酒精棉球重复擦拭尾部。

(3)注射时，以左手拇指和中指捏住鼠尾两侧，用食指从下面托起尾巴。

YHZ医学动物实验操作技术第63页

(4)右手持4号针头注射器，使针头与静脉平行(小于30度角)。（5)从大鼠尾巴下1／4或1／3处进针，仔细观察，假如无阻力，无白色皮丘出现，说明已刺入血管，即可注入药品。注射量：0.05—0.25ml／10g体重。

YHZ医学动物实验操作技术第64页

4、腹腔注射给药

原理：将药液注入大鼠腹腔。

器材：注射器1支、生理盐水、烧杯。

YHZ医学动物实验操作技术第65页

方法步骤：

(1)用左手将大鼠捉持保定，使鼠腹部朝上，鼠头略低于尾部。

(2)右手持注射器将针头在下腹部靠近腹白线两侧进行穿刺。YHZ医学动物实验操作技术第66页(3)针头刺入皮下后进针3mm左右，接着使注射针头与皮肤呈45度角刺入腹肌，穿过腹肌进入腹膜腔，当针尖穿过腹肌进入腹膜腔后抵抗感消失。(4)固定针头，保持针尖不动，回抽针栓，如无回血、肠液和尿液后即可注射药液。注射量：0.01—0.02m1／g体重。

YHZ医学动物实验操作技术第67页YHZ医学动物实验操作技术第68页YHZ医学动物实验操作技术第69页YHZ医学动物实验操作技术第70页YHZ医学动物实验操作技术第71页YHZ医学动物实验操作技术第72页YHZ医学动物实验操作技术第73页YHZ医学动物实验操作技术第74页YHZ医学动物实验操作技术第75页YHZ医学动物实验操作技术第76页YHZ医学动物实验操作技术第77页YHZ医学动物实验操作技术第78页三、豚鼠给药方法：

(一)灌胃给药

原理：将药液直接注入豚鼠胃内。

器材：灌胃针1支、注射器1支、生理盐水、烧杯。YHZ医学动物实验操作技术第79页

方法步骤：

1、将灌胃针连接在注射器上，吸入一定量生理盐水。

2、左手捉持保定豚鼠，右手将灌胃针头尖端放进豚鼠口咽部，顺咽后壁轻轻往下推，灌胃针会顺着食管滑入大鼠胃内。灌胃针插入约5cm。YHZ医学动物实验操作技术第80页3、用右手食指将针栓慢慢往下压，将注射器中生理盐水注入豚鼠胃中。

剂量：1—5ml。

注意：在灌胃过程中，防止误插入气管。

YHZ医学动物实验操作技术第81页

(二)注射给药

1、皮下注射给药原理：将药液注入皮下结缔组织，经毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环。器材：

1m1注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球。YHZ医学动物实验操作技术第82页

方法步骤：

(1)注射部位：选豚鼠项背部皮下。(2)常规消毒注射部位皮肤，注射针头取一锐角角度刺入皮下。(3)将针头轻轻向左右摆动，易摆动则表示已刺入皮下，再轻轻抽吸，如无回血，可迟缓地将药品注入皮下。注射量：0.01ml／g。YHZ医学动物实验操作技术第83页

2、肌肉注射给药

原理：将药液注入动物肌肉组织，经毛细血管吸收进入血液循环。

器材：1m1注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球。YHZ医学动物实验操作技术第84页

方法步骤：

(1)操作时1人先将豚鼠捉持保定好。(2)另1人用左手抓住豚鼠1条后肢，右手拿注射器，常规消毒注射部位。(3)将注射器针头在动物后肢大腿外侧肌肉丰富处呈60度角，快速刺入后注入药液。注射量：0.01ml／g。YHZ医学动物实验操作技术第85页

四、兔给药方法

(一)灌胃给药

原理：将药液直接注入兔胃内。

器材：兔开口器、14号胃管、注射器1支、生理盐水、烧杯、石蜡油。YHZ医学动物实验操作技术第86页

步骤：

1、将兔放进保定架内，助手用手轻轻压住兔背部，防止兔挣扎。

2、灌胃者用在手拇指和中指挤压兔两颊，将下颌挤开使兔被动张口。3、右手将开口器从一侧口角插入口腔并固定。4、用泡在石蜡油中胃管，经开口器孔插入，向前推进约15cm，可达胃内。5、在插管时应将胃管另一端泡在水中确认没有冒气泡，即可用注射器经胃管注入药液。

YHZ医学动物实验操作技术第87页灌胃量：

80-100ml／只／次。注

意：在灌胃过程中，防止误插入气管。

YHZ医学动物实验操作技术第88页三、兔耳缘静脉或兔耳中央动脉穿刺（用于兔给药、抽血）：

原理：穿刺兔耳缘静脉或耳中央动脉。

器材：兔保定架、注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球。YHZ医学动物实验操作技术第89页

方法步骤：

(1)将兔放在保定架内保定。

(2)酒精消毒并揉搓血管，使兔耳缘静脉或耳中央动脉充盈。

YHZ医学动物实验操作技术第90页(3)用左手食指和中指夹住兔耳缘静脉或耳中央动脉近心端，拇指和小指夹住耳郭边缘部分，无名指和小指放在耳郭下作垫。(4)右手拿注射器，针尖斜面朝上，将针头插入血管，放松对静脉近心端压迫，缓慢把地药液注射进血管，或将血液抽出来。注射或采血量：5一10ml。

YHZ医学动物实验操作技术第91页

五、吸入给药1、气管内滴注法2、经口腔和经气管给药法3、吸入室法大小鼠气管插管技术

六、经肠给药1、兔直肠给药2、麻醉后小肠或十二指肠灌注给药YHZ医学动物实验操作技术第92页

一、小鼠采血——摘除眼球采血法：

原理：将小鼠眼球摘除后取血液方法。器材：眼科弯镊、试管。第五节样品采集方法YHZ医学动物实验操作技术第93页方法步骤

(1)左手抓住小鼠颈部皮肤，轻压在试验台上，取侧卧位;(2)左手食指尽可能将小鼠眼周皮肤往颈后压，使眼球突出。(3)用眼科弯镊夹去眼球，将鼠倒立，用试管接住流出血液。(4)采血完成马上用纱布压迫止血。采血量：每次0.6-1.0ml/次。

小鼠眼内眦取血动画小鼠眼眶后静脉丛取血YHZ医学动物实验操作技术第94页

二、大鼠采血

眼眶后静脉丛(窦)取血：器材：毛细管(玻璃或塑料均可)、

1％肝素溶液、干燥皿、乙醚、试管、干棉球。

YHZ医学动物实验操作技术第95页

方法步骤：

1、先将毛细管浸泡在1％肝素溶液中数分钟，然后取出干燥备用。2、将大鼠进行麻醉，使大鼠保持侧卧位。3、左手拇指、食指抓住两鼠耳之间颈部头皮，并轻轻向下压迫颈部两侧，致大鼠静脉血回流障碍，眼球外突，眶后静脉丛充血。4、右手持毛细管由大鼠内毗部插入结膜，使毛细管与眶壁平行地向喉头方向推进，深度约3—5mm。5、轻轻旋动毛细管，使其穿破静脉丛，让血流顺毛细管流出。采血量：0.4—0.6ml／次。YHZ医学动物实验操作技术第96页YHZ医学动物实验操作技术第97页YHZ医学动物实验操作技术第98页YHZ医学动物实验操作技术第99页YHZ医学动物实验操作技术第100页YHZ医