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文档简介

第七章

临床尿液检验仪器临床尿液检验仪器第1页

教学要求

掌握试剂带反应原理;掌握尿液分析仪检测原理;掌握流式细胞术尿有形成份分析仪工作原理;熟悉尿液分析仪、流式细胞术尿有形成份分析仪结构

;熟悉尿液分析仪、尿有形成份分析维护和保养。临床尿液检验仪器第2页

主要内容

第一节尿液分析仪一、尿液分析仪分类二、尿液分析仪工作原理三、尿液分析仪仪器结构与功效四、尿液分析仪安装、调校

五、尿液分析仪使用注意事项及维护与保养

六、尿液分析仪质量控制第二节尿有形成份分析仪一、流式细胞术尿有形成份分析仪二、影像式尿有形成份分析仪

临床尿液检验仪器第3页第一节尿液分析仪尿液自动分析仪发展史尿液分析仪分类尿液分析仪测试原理尿液分析仪结构安装、调校、维护干化学检验与显微镜检验干化学尿液分析技术操作不足影响干化学检测结果原因临床尿液检验仪器第4页一、自动尿液分析仪发展史干化学尿液分析仪是测定尿中一些化学成份自动化仪器,是医学试验室尿液自动化检验主要工具。20世纪50年代即有些人采取单一干化学试带法测定尿中蛋白质和糖。尿液分析仪出现给临床试验室尿液分析带来了一个飞跃。临床尿液检验仪器第5页20世纪60年代,世界上许多企业也开始研制生产尿液干化学试剂带,如德国宝灵曼企业于1964年代推出COMBUR-TEST试剂带。

20世纪70年代,伴随自动化程度不停提升,半自动尿液分析仪问世,替换了肉眼观察结果,降低了人为误差,提升了检测敏感度和特异性。一、自动尿液分析仪发展史临床尿液检验仪器第6页一、自动尿液分析仪发展史

到了20世纪80年代中期,因为计算机技术高度发展和广泛使用,尿液分析仪自动化才能得到迅猛发展,由半自动发展到全自动。我国尿干化学试带研制开始于20世纪60年代。1985年广西桂林医疗电子仪器厂从日本引进了当初先进MA-4210型尿液自动分析仪和专用试剂带生产技术和设备,以后几年,经过我国教授努力,于1990年到达了全部国产化。临床尿液检验仪器第7页一、自动尿液分析仪发展史不过,在尿液分析仪使用中,使用不妥和许多中间步骤及影响原因却直接影响自动化分析结果准确性,会引发试验结果误差,以致作犯错误诊疗。所以,要求操作者对自动化仪器原理、性能、注意事项及影响原因方面知识要有充分了解,正确使用自动化仪器,才能使尿液分析仪得出结果更可靠、准确。

临床尿液检验仪器第8页二、尿液分析仪分类按工作方式分类按测试项目将尿液分析仪分类按自动化程度将尿液分析仪分类临床尿液检验仪器第9页二、尿液分析仪分类临床尿液检验仪器第10页二、尿液分析仪分类(一)按工作方式可分为湿式尿液分析仪干式尿液分析仪临床尿液检验仪器第11页二、尿液分析仪分类(二)按测试项目可分为8项尿液分析仪9项尿液分析仪10项尿液分析仪11项尿液分析仪12项尿液分析仪13项尿液分析仪临床尿液检验仪器第12页二、尿液分析仪分类1.8项尿液分析仪代表仪器:日本或国产MA-4210型检测项目:尿蛋白、尿糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿隐血、尿亚硝酸盐。临床尿液检验仪器第13页二、尿液分析仪分类2.9项尿液分析仪代表仪器:德国产RL-9型检测项目:尿蛋白、尿糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血、尿白细胞。临床尿液检验仪器第14页二、尿液分析仪分类3.10项尿液分析仪代表仪器:德国MIDITRON型或美国CLINITEK200型检测项目:蛋白、糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿红细胞、白细胞、尿比密临床尿液检验仪器第15页二、尿液分析仪分类4.11项尿分析仪代表仪器:美国CLINITEK500型检测项目:蛋白、糖、PH、酮体、尿胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血、白细胞、比密、维生素C临床尿液检验仪器第16页二、尿液分析仪分类(三)按自动化程度可分为半自动尿液分析仪:代表仪器是德国MIDITRON型、美国CLINITEK200型

全自动尿液分析仪:代表仪器是德国SUPERTRON型、美国CLINTEKAT-LAS型临床尿液检验仪器第17页二、尿液分析仪分类临床尿液检验仪器第18页二、尿液分析仪分类临床尿液检验仪器第19页三、尿液分析仪测试原理尿液分析仪测试原理主要有以下三个方面:尿液分析仪试剂带原理尿液分析仪测量原理尿液分析仪计算原理临床尿液检验仪器第20页三、尿液分析仪测试原理试剂带原理多联试剂带是将各种项目标试剂块集成在一个试剂带,使用多联试剂带,浸入一次尿液可同时测定多个项目。图为德国宝灵曼企业COMBURTEST试剂带。它采取了多层模结构;尼龙膜:预防大分子物质对反应污染;临床尿液检验仪器第21页三、尿液分析仪测试原理绒制层:包含碘酸盐层和试剂层:碘酸盐层能够破坏维生素C等干扰物质,试剂层含有试剂成份,主要与尿液中测定物质发生化学反应,产生颜色改变;吸水层:可使尿液均匀快速浸入,并能抑制尿液流到相邻反应区;塑料底层:作支持体。临床尿液检验仪器第22页

多联试剂带结构图

三、尿液分析仪测试原理临床尿液检验仪器第23页三、尿液分析仪测试原理

另外,试剂带中还有另一个垫-“赔偿区”,作为尿液本底颜色,以对有色尿及仪器改变等产生误差进行赔偿。试剂带按一定次序排列,各个厂家不一样,尿液中各种成份被各测定块吸收,引发化学反应及酶反应,使试剂块颜色依据尿液中各成份百分比而改变。临床尿液检验仪器第24页三、尿液分析仪测试原理项目缩写符号反应原理胆红素BIL偶氮反应法尿胆原URO醛反应法,重氮反应法酮体KET硝基铁氢化钠法亚硝酸盐NIT亚硝酸盐还原法白细胞LEU脂酶法比密D(SG)多聚电解质离子解离法

各项目测定原理表临床尿液检验仪器第25页三、尿液分析仪测试原理项目缩写符号反应原理胆红素BIL偶氮反应法尿胆原URO醛反应法,重氮反应法酮体KET硝基铁氢化钠法亚硝酸盐NIT亚硝酸盐还原法白细胞LEU脂酶法比密D(SG)多聚电解质离子解离法临床尿液检验仪器第26页隐血试验原理:利用Hb中亚铁血红素有类似过氧化物酶作用,在供氢体(如无色邻联甲苯胺)存在下,使过氧化物还原成为水,而无色邻联甲苯胺被氧化成为有色产物。AH2-H2O2过氧化物酶A2-H2O2(无色)(有色)三、尿液分析仪测试原理临床尿液检验仪器第27页干化学分析试带使用说明操作人员必须仔细阅读试带性能和仪器操作方法;操作中应充分混匀新鲜尿液标本;将试带全部快速浸入尿液标本;试带从标本中取出时,除去多出尿液;可疑结果必须进行确诊试验;干化学试验结果应与理学、显微镜结果相关联。三、尿液分析仪测试原理临床尿液检验仪器第28页试带保留方法:试带贮存在干燥、不透明、有盖容器中,不能取出容器中干燥剂;放置于阴凉干燥地方,不要放冰箱;不能暴露于挥发性烟雾中;不能使用过期试带,通常打开后6个月内用完,不能使用已褪色化学试带。三、尿液分析仪测试原理临床尿液检验仪器第29页三、尿液分析仪测试原理测量原理这类仪器普通用微电脑控制,将浸有尿液试剂带放在仪器比色槽内,试带上已产生化学反应各种试剂垫被光源照射,其反射光被球面积分仪接收,球面积分仪光电管被反射双波长光(包含经过滤光片测定光和一束参考光)照射。测定每种试剂带块反射光光量值与空白块反射光量值进行比较,经过计算机求出反射率,换算成浓度值,便可由分析仪打印出半定量数值。临床尿液检验仪器第30页三、尿液分析仪测试原理

各波长百分比由检测项目决定在几十秒钟(依据不一样分析仪自己设定时间而定)反应时间内,各个项目(空白块不参加反应,只作标准参考用)试剂带块因为化学反应而展现颜色改变,并吸收照射单色光。临床尿液检验仪器第31页三、尿液分析仪测试原理各波长选择由检测项目决定,球面积分仪上有三个光电管和特定波长滤光片:参比光为深红色滤片(λ=720nm)。在测量光电管中:一个加有绿色滤光片(550nm)对亚硝酸盐、酮体、胆红素、尿胆原作测量。另一个红色滤光片(620nm),对葡萄糖、蛋白质、PH和隐血作测量。临床尿液检验仪器第32页三、尿液分析仪测试原理仪器检测过程为:光源灯发出光经过积分球照射在试剂带膜块上。试剂带膜块颜色深浅对光吸收和反射是不一样,颜色越深,吸收光量值越大,反射光量值越小,则反射率越小。仪器按以下公式自动计算出反射率,然后与标准曲线比较,自动打印出各成份对应结果。临床尿液检验仪器第33页三、尿液分析仪测试原理计算原理R(%):反射率Tm:试剂垫对测定波长反射强度Ts:试剂垫对参考波长反射强度Cs:标准垫对参考波长反射强度Cm:标准垫对测定波长反射强度临床尿液检验仪器第34页四、尿液分析仪结构

尿液分析仪由:机械系统、光学系统、电路系统三部分组成。临床尿液检验仪器第35页四、尿液分析仪结构(一)机械系统

主要功效是将待测试剂带传送到位。临床尿液检验仪器第36页光电管球面积分仪滤光片光源

(二)光电系统结构图四、尿液分析仪结构临床尿液检验仪器第37页四、尿液分析仪结构(三)电路系统其作用是将光电检测器信号进行放大和运算处理。临床尿液检验仪器第38页五、安装、调校、维护

安装条件:远离电磁干扰源、电源、预防阳光照射、防潮、通风好、温度10~30℃,湿度<80%;

调校:新仪器安装后,或每次大维修之后,必须对仪器技术性能进行测试,评价,这对确保检验质量起到主要作用。临床尿液检验仪器第39页五、安装、调校、维护日常应用和维护

尿液分析仪日常应用和维护:每台尿液分析仪应建立操作程序,并严格按操作规程进行操作;专员负责管理,健全专用仪器登记本,对天天仪器操作情况,出现问题,以及维护,维修情况给予登记;

临床尿液检验仪器第40页五、安装、调校、维护天天开机测定前,要对仪器进行全方面检验,测定完成要对仪器进行全方面清理保养;做到每日、每七天、每个月维护.临床尿液检验仪器第41页五、安装、调校、维护

普通评价程序

1.首先应该对尿液分析仪进行校正,校正目标是让仪器进入厂商要求状态。其操作是用标准校正条对仪器进行测定仪器光路,状态进行校正,以到达最正确状态,有些厂家校正条是一次性,不能重复使用,以免影响试验结果,有些厂家校正条可重复使用,尿液分析仪只有在校正经过时才能进行试验,不然要停机。临床尿液检验仪器第42页五、安装、调校、维护2.应该对尿液分析仪及试纸条准确度进行评价。准确度指是测定值与真值靠近程度,因为尿液分析仪是一个半定量仪器,所以它准确度评价只有依据仪器制造商要求测定范围配制成一定浓度标准物,在仪器上严格按说明书操作,每份标准物测定3次,观察测定结果与标准物浓度相符合程度。临床尿液检验仪器第43页五、安装、调校、维护3.用传统方法与尿液分析仪测定作对比分析,对尿液分析仪敏感性和特异性进行评价。4.了解该仪器对每项测试指标测试范围,并建立该仪器参考范围。临床尿液检验仪器第44页六、干化学与镜检中华医学会经过三次教授研讨会,寻求一个简单、快速筛选方法,对干化学尿液分析提供了筛选试验伎俩。在干化学尿试带质量合格,尿液分析仪运转正常情况下,试验中满足以下条件时,可免去镜检:白细胞、红细胞、蛋白质及亚硝酸盐为阴性。临床尿液检验仪器第45页六、干化学与镜检另外,对肾脏疾病患者不适合干化学检验筛选法,对以镜检结果作为诊疗依据和观察疗效指标时,不宜作筛选,如:结石、结晶、寄生虫检验。临床尿液检验仪器第46页

七、干化学尿液分析技术操作不足干化学尿液分析技术操作简便,检测项目多,诊疗过筛面大,仪器价廉等很多优点,很快在临床推广应用,但这类仪器检测结果受许多原因影响,务必严格控制才能取得好结果。临床尿液检验仪器第47页八、影响干化学检测结果原因影响检测结果原因大致来自以下几方面:试纸条原因尿标本原因操作原因:包含仪器校验和维护,操作程序,环境原因等。临床尿液检验仪器第48页第二节尿有形成份分析仪临床尿液检验仪器第49页第二节尿有形成份分析仪尿有形成份检验方法学进展尿有形成份分析仪分类临床尿液检验仪器第50页一、尿有形成份检验方法学进展尿有形成份检验包含有形成份计数和形态学分析两方面检验。尿液因物理性质改变(渗透压)引发被检细胞形态学变异,判定技术较难,自动化和机械化检验发展很慢。但因为有血细胞自动计数仪开发经验,在美国和日本已经有尿有形成份自动分析仪应用,在我国,在较大检验科室,已经有了各种档次尿有形成份分析仪在应用。

临床尿液检验仪器第51页一、尿有形成份检验方法学进展尿液化学自动分析仪出现,对尿液化学成份和部分有形成份检验提供了可靠和主要数据,但对尿液有形成份定量计数和形态学分析还没有完全处理,伴随计算机高速发展,尿有形成份自动分析仪问世,很好处理了显微镜镜检尿有形成份所存在问题。临床尿液检验仪器第52页一、尿有形成份检验方法学进展尿有形成份检验即使已经有一个多世纪历史,但发展远不如尿化学成份检验快速,其主要是人工进行尿有形成份检验存在以下问题:检验方法不统一,也无统一质控标准;检验所需时间长;检验重复性差,检验人员之间个体差异大,各检验机构之间差异也大。全自动尿有形成份分析仪是当前比较满意检测尿有形成份分析仪。临床尿液检验仪器第53页手工制片镜检尿有形成份定量分析板应用尿有形成份自动化分析仪一、尿有形成份检验方法学进展临床尿液检验仪器第54页一、尿有形成份检验方法学进展临床尿液检验仪器第55页一、尿有形成份检验方法学进展(1)开展利用干化学法检测尿中WBC、RBC,进行显微镜检验筛选。(2)利用图象摄影系统摄制尿有形成份静止图象,对尿有形成份进行自动分类、计算及储存等,形成尿有形成份自动分析系统。(3)利用流式细胞术结合电阻抗原理检测尿中成份进行定量分析全自动尿有形成份分析仪。临床尿液检验仪器第56页一、尿有形成份检验方法学进展(4)除利用普通显微镜外,还可采取干涉、相差、偏振光、扫描及透射电镜等观察。(5)现已采取尿沉渣活体染色及细胞化学等多染色法来识别各种细胞和管型。(6)近年来应用单克隆抗体技术识别各种细胞成份。临床尿液检验仪器第57页一、尿有形成份检验方法学进展临床尿液检验仪器第58页一、尿有形成份检验方法学进展1988年美国国际遥控影像系统有限企业生产了世界上第一台“YELLOWIRIS”高速摄影机式尿有形成份自动分析仪,简称Y-1尿自动分析仪,这种仪器是将标本粒子影像展示在计算机屏幕上,由检验人员加以判别。临床尿液检验仪器第59页一、尿有形成份检验方法学进展1990年日本东亚医疗电子有限企业与美国国际遥控影像系统有限企业合作,对原有尿有形成份分析仪进行改进,生产出影像流式细胞仪式UA-1000型和UA-型尿有形成份自动分析仪。

临床尿液检验仪器第60页一、尿有形成份检验方法学进展1995年日本东亚医疗电子有限企业在原来影象流式细胞仪式尿有形成份分析仪基础上,将流式细胞和电阻抗技术结合起来,生产出新一代UF-100(fullyautomatedurinecellanalyzer)型尿有形成份自动分析仪。这种仪器含有快速、操作方便,同时给出尿有形成份数量结果和RBC、WBC散射光分布直方图,便于临床及科研工作。临床尿液检验仪器第61页二、尿有形成份分析仪分类(一)流式细胞术尿有形成份分析仪(二)影像式尿有形成份分析仪(三)尿有形成份分析工作站(四)尿有形成份分析仪与显微镜检验临床尿液检验仪器第62页二、尿有形成份分析仪分类(一)流式细胞术尿有形成份分析仪分析原理仪器结构尿有形成份细胞资料综合分析尿有形成份分析仪检测项目尿有形成份自动分析仪评价红细胞、白细胞参考值仪器安装、使用及保养临床尿液检验仪器第63页二、尿有形成份分析仪分类临床尿液检验仪器第64页二、尿有形成份分析仪分类分析原理1.稀释、染色标本经过鞘液池2.氩激光照射3.测定荧光、散射光和电阻抗临床尿液检验仪器第65页二、尿有形成份分析仪分类UF-100分析原理稀释、染色标本经过鞘液池当一个尿液标本被稀释液稀释和染液染色后,它靠液压作用经过鞘液流动池,当反应样品从喷嘴出口进入鞘液流动室时,它被一个无粒子颗粒鞘液包围,使每个细胞以单个纵列形式经过流动池中心(竖直)轴线。临床尿液检验仪器第66页二、尿有形成份分析仪分类氩激光照射在这里每个尿液细胞将被氩激光光束照射。每个细胞有不一样程度:荧光强度(FL,fluorescentlight)是从染色尿液细胞发出荧光强度,主要反应细胞定量特征,如细胞膜、核膜、线粒体、核酸)、散射光强度(这种仪器测定是前向角散射光Fsc,forwardscatterelight,它成百分比反应细胞大小)电阻抗大小(电阻抗电信号主要与细胞体积成正比)。临床尿液检验仪器第67页二、尿有形成份分析仪分类测定荧光、散射光和电阻抗仪器正是将这种荧光、散射光和电阻抗信号转变成电信号,分析这些电信号,才能使得每个尿液标本产生出直方图和散射图,然后分析这些图形,即可区分出每个细胞并得出每个细胞形态。临床尿液检验仪器第68页二、尿有形成份分析仪分类仪器结构流式细胞术尿有形成份分析仪包含:检测系统液流系统电路系统自动进样系统临床尿液检验仪器第69页二、尿有形成份分析仪分类检测系统:

1.光学系统由氩激光(波长488nm)、激光反射系统、流动池、前向光采集、前向光检测器组成。

2.电阻抗检测系统

临床尿液检验仪器第70页二、尿有形成份分析仪分类激光作为光源用于流式细胞分析系统,它被双色反射镜反射,然后被聚光器搜集形成射束点,而聚集于流动池中央。样品流到流动池,每个细胞被激光光束照射,产生前向散射光和前向荧光光信号。散射光信号被光电二极管转变为电信号,被输送到微处理器。临床尿液检验仪器第71页二、尿有形成份分析仪分类依据光散射定律,在分析尿标本时,因为细胞种类不一样和分布不均,光反射和散射主要取决于细胞表面,所以散射光强度主要取决于细胞大小,所以仪器能够从散射光强度得出测定细胞大小资料。临床尿液检验仪器第72页二、尿有形成份分析仪分类荧光经过滤光片滤过一定波长荧光后,输送到光电倍增管,将光信号放大再转变成电信号,然后输送到微处理器,得出细胞定量特征。临床尿液检验仪器第73页二、尿有形成份分析仪分类UF-100尿有形成份分析仪使用两种荧光染料:一个为菲啶染料,主要染细胞核酸成份(DNA),在480nm光波激发时,产生610nm橙黄色光波,用于区分有核细胞和无核细胞(如RBC与WBC,病理管型和透明管型);临床尿液检验仪器第74页二、尿有形成份分析仪分类

另一个为羧花氰染料,它穿透能力强,与细胞质膜(细胞膜、核膜和线粒体)脂层成份发生反应结合,在460nm光波激发时产生505nm绿色光波,主要用于区分细胞大小(如上皮细胞和白细胞区分)。临床尿液检验仪器第75页二、尿有形成份分析仪分类这两种染料含有以下特征:反应快速:背景荧光低:从细胞发生荧光与染料和细胞结合程度成百分比。临床尿液检验仪器第76页二、尿有形成份分析仪分类电阻抗检测系统:●电阻抗测定系统包含测定细胞体积电阻抗系统和测定尿液导电率传导系统。电阻抗测定方法:与血细胞分析义电阻抗原理相同●部分标本含有一些结晶,影响电阻抗测定敏感性,为了确保尿液标本传导性稳定,能够在稀释液中使用含EDTA盐化合物或加热使结晶溶解。临床尿液检验仪器第77页二、尿有形成份分析仪分类液流(鞘液流动)系统:反应池染色标本伴随真空作用吸入到鞘液流动池。为了使尿液细胞进入流动池不凝固成团。而使单细胞流经过加压鞘液输送到流动池,使染色样品经过流动池中央,鞘液形成一股液涡流,使尿液细胞排成单个纵队经过鞘液中心。临床尿液检验仪器第78页二、尿有形成份分析仪分类电路系统:

从样品细胞中得到前向散射光很强,不需要极敏感光检测器,光电二极管能够将光信号转变成电信号。但从样品细胞中得到前向荧光很弱,所以需要使用极敏感光电倍增管。这种光电倍增管能够吸收在光电表面光子能量,并使用金属光电效应发出光电子。临床尿液检验仪器第79页二、尿有形成份分析仪分类

发出光电子能够被外加电压促进,造成许多继发电子放大。这种放大前向荧光转变成电信号。从样品中得到电阻抗信号和传导性信号被感受器接收后直接放大输送给微处理器。临床尿液检验仪器第80页二、尿有形成份分析仪分类自动进样装置:自动进样装置主要由自动进样传输装置、样本混匀器、定量吸样装置和样品传输装置组成。临床尿液检验仪器第81页二、尿有形成份分析仪分类光学分析系统临床尿液检验仪器第82页分析原理流程图二、尿有形成份分析仪分类临床尿液检验仪器第83页二、尿有形成份分析仪分类UF-100细胞分析过程临床尿液检验仪器第84页尿液有形成份脉冲图形二、尿有形成份分析仪分类临床尿液检验仪器第85页二、尿有形成份分析仪分类尿有形成份细胞资料综合分析仪器经过对前向散射光波形(强度和散射光脉冲宽度)、前向荧光波形(荧光强度和荧光脉冲宽度)和电阻抗值大小综合分析,得出细胞形态、细胞横截面积、染色片段长度、细胞容积等信息并绘出直方图和散射图。仪器经过分析每个细胞信号波形特征来对其进行分类。临床尿液检验仪器第86页二、尿有形成份分析仪分类前向散射光信号主要反应细胞体积大小。前向散射光强度FSC反应细胞横截面积;前向散射光脉冲宽度FSCW主要反应细胞长度;FSCW=CL+BW/VCL——细胞长度BW——激光束宽度V——流动速度临床尿液检验仪器第87页二、尿有形成份分析仪分类前向荧光信号主要反应细胞染色质块大小荧光强度FL主要反应细胞染色质强度;前向荧光脉冲宽度FLW反应细胞染色质长度。FLW能够用以下等式表示:FLW=NL+BW/VNL——细胞核长度BW——激光束宽度V——流动速度临床尿液检验仪器第88页二、尿有形成份分析仪分类尿有形成份分析仪检测项目UF-100型全自动尿有形成份分析仪采集标本体积为9ml,自动进样模式所需标本体积不少于4ml,实际吸收标本体积为0.8ml,检测标本体积为9.0微升,每小时可检测100个尿标本,可汇报以下参数:临床尿液检验仪器第89页二、尿有形成份分析仪分类检测项目-红细胞分析白细胞分析上皮细胞(EC)管型(CAST)细菌(BACT)其它检测导电率测定临床尿液检验仪器第90页二、尿有形成份分析仪分类1.红细胞分析RBC直径为8微米,无核和线粒体,所以RBC荧光强度(F1)很弱。另外,RBC在尿液标本中大小不均,且部分溶解成小RBC碎片,或者在肾脏疾患时排出RBC也大小不等,所以,能够看见RBC前向散射光强度(FSC)差异较大。普通来说,F1极低和FSC大小不等均为RBC。临床尿液检验仪器第91页二、尿有形成份分析仪分类仪器除给出尿RBC定量(每微升细胞数和每高倍视野平均细胞数)参数外,还可汇报尿形态均一性RBC和形态非均一性RBC百分比,非溶血性RBC数量和百分比,平均红细胞前向荧光强度、平均红细胞前向散射光强度和红细胞荧光强度分布宽度。临床尿液检验仪器第92页二、尿有形成份分析仪分类这种分类方法主要依据RBC形态改变,将均一性RBC归为非肾性血尿;非均一性RBC归为肾性血尿,全自动尿有形成份分析仪也含有此项功效,其要求:80%红细胞前向散射光强度(Fsc)≥126ch;称为均一性红细胞;80%红细胞前向散射光强度(Fsc)≤84ch称为非均一性红细胞(变异性红细胞);介于二者之间即为混合性红细胞。

ch(channel):为检测到脉冲信号强度及宽度临床尿液检验仪器第93页二、尿有形成份分析仪分类2.白细胞分析WBC在尿液分布直径大约为10um,约比RBC大,因以前向散射光强度也比RBC稍大一些,但WBC含有核而RBC无核,所以它有高强度前向荧光,就能将RBC和WBC区分开来。当WBC存活时,会展现前向散射光强和前向荧光弱;当WBC损害或死亡时,展现前向散射光弱和前向荧光强。临床尿液检验仪器第94页二、尿有形成份分析仪分类利用尿液WBC激光散射光强度和荧光强度技术识别WBC高活性和低活性不一样程度,来深入对急性感染和慢性感染,以及恢复期做出判断。急性泌尿系感染WBC>60/ul,且白细胞前向散射光强度强和荧光强度弱;慢性泌尿系感染WBC>10/ul,且白细胞前向散射光强度弱和荧光强度强。临床尿液检验仪器第95页二、尿有形成份分析仪分类3.上皮细胞(EC)由泌尿道上皮细胞脱落而来,种类多,大小不等。上皮细胞胞体大,散射光强,都含有细胞核、线粒体等,荧光也比较强。仪器除给出上皮细胞数量参数外,还标出肾小管上皮细胞(SRC),并在第二个屏幕上显示出每微升细胞数。临床尿液检验仪器第96页二、尿有形成份分析仪分类小圆上皮细胞是指细胞大小与白细胞相同或略大,形态较圆上皮细胞,它包含肾小管上皮细胞、中层和底层移行上皮细胞。因为这些细胞散射光、荧光及电阻信号改变大,仪器不能完全区分出哪一类细胞,所以当这类细胞细胞数仪器标出未抵达一定浓度时,还需经过离心染色镜检得出准确结果。

临床尿液检验仪器第97页二、尿有形成份分析仪分类4.管型(CAST)因为管型种类较多,且形态各不相同,仪器不能完全区分这些管型性质;只能检测出透明管型和标出有病理管型存在。临床尿液检验仪器第98页二、尿有形成份分析仪分类透明管型因为不含有内含物有极高前向散射光脉冲宽度和微弱荧光脉冲宽度出现在第二个散射图中下区域;而病理性管型,因为它们体积与透明管型相等,但含有内含物(如线粒体、细胞核等);所以有极高前向散射光脉冲宽度和荧光脉冲宽度,出现在第二个散射图中上区域。临床尿液检验仪器第99页二、尿有形成份分析仪分类借助于荧光脉冲宽度,即可区分出透明管型和病理管型,当仪器标明有病理性管型时,因为仪器只能起过筛作用,不能完全判定就是病理管型,只有经过离心镜检才能确认是哪一类管型。临床尿液检验仪器第100页二、尿有形成份分析仪分类5.细菌(BACT)细菌因为体积小并含有DNA和RNA,所以前向散射光强度要比红、白细胞弱,但荧光强度要比红细胞强,又比白细胞弱。所以,细菌分布在第1个散射图红细胞和白细胞之间下方区域。此仪器很好地处理了上述缺点,能够检测出全部细菌。细菌检验临床意义主要用于泌尿系细菌感染诊疗。临床尿液检验仪器第101页二、尿有形成份分析仪分类6.其它检测全自动尿有形成份分析仪除检测上述五项参数外,还能标识出酵母细胞(YLC)精子细胞(SPERM)结晶(X-TAL)临床尿液检验仪器第102页二、尿有形成份分析仪分类酵母细胞(YLC)精子细胞(SPERM)类酵母细胞和精子细胞因为含有RNA和DNA,荧光强度很高,因为类酵母细胞前向散射光脉冲宽度小于精子细胞,所以,根椐前向散射光脉冲宽度,可将类酵母细胞和精子细胞区分开来。但在低浓度时,精子细胞与酵母细胞区分有一定难度;在高浓度时,部分酵母细胞对红细胞计数有交叉。临床尿液检验仪器第103页二、尿有形成份分析仪分类

结晶(X-TAL)结晶出现在散射图红细胞区域,因为结晶多样性,所以其散射光强度分布很宽,如草酸盐在散射图上分布靠近FSC轴,尿酸盐依靠自己荧光分布区域和红细胞重复在一起,因结晶中心分布不稳定,所以它和红细胞能够被区分开。临床尿液检验仪器第104页二、尿有形成份分析仪分类当尿酸盐浓度增多时,部分结晶会影响红细胞计数。所以,当仪器对酵母细胞子、精子细胞和结晶有标示时,都应离心镜检,才能真正区分。临床尿液检验仪器第105页二、尿有形成份分析仪分类临床尿液检验仪器第106页二、尿有形成份分析仪分类临床尿液检验仪器第107页二、尿有形成份分析仪分类7.导电率测定概述导电率与渗透量有亲密关系:导电率代表溶液中溶质质点电荷,与质点种类、大小无关;渗透量代表溶液中溶质质点(渗透活性粒子)数量,而与质点种类、大小及所带电荷无关。所以导电率与渗透量又有差异,如溶液中含有葡萄糖时,因为葡萄糖是无机物,它没有电荷,与导电无关,但与渗量相关。临床尿液检验仪器第108页二、尿有形成份分析仪分类导电率测定临床意义对糖尿病、尿崩症判别诊疗、治疗都含有十分主要意义;经过对尿导电率高低监控,能够预防一些结石疾病发生,有利于结石疾病治疗。

临床尿液检验仪器第109页二、尿有形成份分析仪分类尿有形成份分析仪检测评价全自动尿有形成份分析仪优点崭新流式细胞学技术应用于尿检独特有形成份判别系统临床尿液检验仪器第110页UF-100结合流式细胞学技术与电阻抗测定对尿成份进行直接判别及计数,将染色有形成份加压使其经过鞘流室小孔。用激光光束照射有形成份,光便产生散射,而尿液有形成份则发出荧光,然后对散射光、荧光及电阻抗改变进行测定和分析,使用这一已经证实流式细胞新技术,是自动化尿检取得了重大突破,即实现真正无人检验!二、尿有形成份分析仪分类1.崭新流式细胞学技术应用于尿检临床尿液检验仪器第111页将从每个粒子上所产生散射光,荧光及电阻抗改变转变为电信号进行分析,并将粒子分布制成简明易懂散射图和直方图。利用先进自适应凝聚体分析系统(A.C.A.S)确定有形成份类型,从而以自动分析代替了主观判别。二、尿有形成份分析仪分类2.独特有形成份判别系统临床尿液检验仪器第112页二、尿有形成份分析仪分类3.全自动尿有形成份分析仪优点1)可对血尿中红细胞进行定量计数,同时对其形态进行判别,有利于临床分析泌尿系统出血部位。2)对尿中白细胞也可进行定量计数,可同NIT及细菌数结合分析,有利于尿路感染患者诊疗和疗效监控。临床尿液检验仪器第113页二、尿有形成份分析仪分类3)仪器提供尿渗透压信息,对尿液状态有更多了解。4)和尿化学分析一起使用,将更有利于临床。5)可满足大批尿液常规检验单位需要,减轻劳动强度。 临床尿液检验仪器第114页二、尿有形成份分析仪分类红细胞、白细胞参考值因为尿液常规有形成份检验普通都使用显微镜检验,该法操作要求高、费时、重复性差,结果不宜临床动态观察。干化学尿液分析仪问世,即使给尿液有形成份检验带来一些革新,但它给出结果只是一个半定量结果,只起过筛分析,也不宜于临床动态观察。临床尿液检验仪器第115页二、尿有形成份分析仪分类红细胞、白细胞参考值调查全自动尿有形成份分析仪开发使用,很好地处理了尿有形成份检验中存在主要问题。当前国内外虽有使用,但迄今未见健康人相关正常参考值报道。丛玉隆等使用全自动尿沉渣分析仪对400例健康人尿液红、白细胞进行测定。临床尿液检验仪器第116页二、尿有形成份分析仪分类结果显示红、白细胞各年纪组之间无显著差异男女性别之间有显著性差异红细胞:男性为0~12/ul,女性为0~24/ul白细胞:男性0~12/ul,女性0~26/ul

临床尿液检验仪器第117页二、尿有形成份分析仪分类仪器安装、使用及保养仪器安装仪器使用仪器维护及保养临床尿液检验仪器第118页二、尿有形成份分析仪分类1.仪器安装安装条件:远离电磁干扰源、电源、预防阳光照射、防潮、通风好、温度15~30℃,湿度<80%;仪器两侧最少有0.5米空间,最好安装在稳定水平试验台上。临床尿液检验仪器第119页二、尿有形成份分析仪分类2.仪器使用仪器开机前,要对仪器进行全方面检验;开机后,仪器先进行自检;仪器自检后,进行自动冲洗并检验本底;本底经过后,进行仪器质控检验;质控经过后,进行样品测试。临床尿液检验仪器第120页二、尿有形成份分析仪分类3.仪器维护及保养仪器要有专员负责,建立专用仪器登记本;仪器必须严格按操作规程进行;仪器保养必须按规程做:(1)每日保养(2)每个月保养(3)每年保养临床尿液检验仪器第121页二、尿有形成份分析仪分类(二)影像型尿有形成份分析仪流动式影像型尿有形成份分析仪

静止式尿有形成份分析仪临床尿液检验仪器第122页二、尿有形成份分析仪分类1.流动式影像型尿有形成份分析仪仪器结构

检测原理自动数码影像拍摄

有形成份识别汇报

临床尿液检验仪器第123页二、尿有形成份分析仪分类(1)仪器结构

流动式影像型尿有形成份分析仪普通有四个模块组成:一是流动式显微成像模块;二是计算机分析处理模块;三是自动进样模块;四是干化学系统模块。临床尿液检验仪器第124页二、尿有形成份分析仪分类流动式显微成像模块:采取鞘流技术,是被测样品进入系统,并在流动过程中应用全自动智能显微镜摄像镜头(CCD)高速拍摄有形成份照片。临床尿液检验仪器第125页二、尿有形成份分析仪分类计算机分析处理模块:计算机分析处理模块:用于对图像结果分析、处理、显示、存放和管理,包含电脑主机、显示器、键盘和鼠标。

临床尿液检验仪器第126页二、尿有形成份分析仪分类是自动进样模块:配置有自动进样装置,在样本架上可同时容纳多个专用试管架。

临床尿液检验仪器第127页二、尿有形成份分析仪分类干化学系统模块:依据用户要求,能够接收其它类型干化学分析系统结果等功效。

临床尿液检验仪器第128页二、尿有形成份分析仪分类(2)检测原理

采取流动式显微镜系统,尿液标本采取层流平板式流式细胞术,标本在上下两层鞘液包裹下进入系统中。仪器流体力学系统由尤其制作薄层板组成,蠕动泵带动鞘液进入薄层板组成流动池,双层鞘液流包裹在尿液标本外周,而尿液会以单层细胞颗粒厚度进入薄层板,被高速拍摄照片后进入废液容器。临床尿液检验仪器第129页临床尿液检验仪器第130页二、尿有形成份分析仪分类(3)自动数码影像拍摄

尿液标本在鞘流液包裹下进入流动池,经过固定在薄层鞘流板一侧显微镜物镜头,其厚度和位置恰好在显微镜视野焦距范围,CCD数字摄影机位于显微镜目镜后面。流经物镜头前面标本薄层是平坦,依据鞘流原理,任何粒子经过时,都会以最大面积直接面对镜头观察。临床尿液检验仪器第131页二、尿有形成份分析仪分类(4)有形成份识别

在显示器上看到每个有形成份都是独立,被分割在一个特定大小格子内。仪器内部预先存放了12种常见有形成份大量图像资料,建立了标准模板数据库。依据被拍摄到粒子大小、外形、对比度和纹理特征和数据库中标准板进行对比来初步判定。临床尿液检验仪器第132页二、尿有形成份分析仪分类(5)汇报尿有形成份结果用定量方式汇报,所以能够用每微升含有量方式表示,也能够换算成传统每高倍/低倍视野表示方式汇报。

临床尿液检验仪器第133页2.

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