甘肃省兰州市兰大附中高三第六次模拟考试新高考生物试卷及答案解析

甘肃省兰州市兰大附中高三第六次模拟考试新高考生物试卷注意事项1．考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回．2．答题前，请务必将自己的姓名、准考证号用0．5毫米黑色墨水的签字笔填写在试卷及答题卡的规定位置．3．请认真核对监考员在答题卡上所粘贴的条形码上的姓名、准考证号与本人是否相符．4．作答选择题，必须用2B铅笔将答题卡上对应选项的方框涂满、涂黑；如需改动，请用橡皮擦干净后，再选涂其他答案．作答非选择题，必须用05毫米黑色墨水的签字笔在答题卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律无效．5．如需作图，须用2B铅笔绘、写清楚，线条、符号等须加黑、加粗．一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下列有关抗体的叙述，正确的是（）A．抗体是由浆细胞和效应T细胞分泌的B．抗体与抗原的结合具有特异性C．抗体可以在细胞内液中发挥免疫效应D．抗体的分泌过程体现了细胞膜的选择透过性2．生物学是一门实验性科学，下面实验中关于“绿”所述错误的是（）A．观察DNA和RNA在细胞中分布的实验中，甲基绿可使DNA着绿色B．橙色重铬酸钾在酸性条件下与酒精反应出现灰绿色C．线粒体在健那绿作用下呈现蓝绿色，并且具有活性D．叶绿体中含多种色素，其中叶绿素a呈现黄绿色3．利用大肠杆菌探究DNA的复制方式，实验的培养条件与方法是：（1）在含15N的培养基中培养若干代，使DNA均被15N标记，离心结果如图的甲；（2）转至14N的培养基培养，每20分钟繁殖一代；（3）取出每代大肠杆菌的DNA样本，离心。如图的乙、丙、丁是某学生画的结果示意图。下列有关推论正确的是（）A．乙是转入14N培养基中繁殖一代的结果B．丙是转入14N培养基中繁殖两代的结果C．出现丁的结果需要40分钟D．转入14N培养基中繁殖三代后含有14N的DNA占3/44．若除酶外所有试剂均已预保温，则在测定酶活力的试验中，下列操作顺序合理的是A．加入酶→加入底物→加入缓冲液→保温并计时→一段时间后检测产物的量B．加入底物→加入酶→计时→加入缓冲液→保温→一段时间后检测产物的量C．加入缓冲液→加入底物→加入酶→保温并计时→一段时间后检测产物的量D．加入底物→计时→加入酶→加入缓冲液→保温并计时→一段时间后检测产物的量5．下图为人体某个细胞所经历的生长发育各个阶段示意图。图中①〜⑥为各个时期的细胞，a～c表示细胞所进行的生理过程。据图分析，下列叙述不正确的是（）A．图中①〜⑥细胞都具有细胞的全能性B．⑤和⑥的核基因基本相同，c过程导致基因选择性表达，使细胞的mRNA不完全相同C．⑤由于细胞代谢受损或中断引起的细胞死亡称为细胞凋亡D．⑤和⑥细胞的衰老过程中细胞核体积增大，可能会有基因的表达6．秋水仙碱，一种生物碱，因最初从百合科植物秋水仙中提取出来，故名，也称秋水仙素。秋水仙碱能抑制有丝分裂，破坏纺锤体，使染色体停滞在分裂中期。这种由秋水仙碱引起的不正常分裂，称为秋水仙碱有丝分裂。在这样的有丝分裂中，染色体虽然纵裂，但细胞不分裂，不能形成两个子细胞，因而使染色体加倍。秋水仙碱就被广泛应用于细胞学、遗传学的研究和植物育种中。下列有关秋水仙碱应用正确的是（）A．秋水仙碱能抑制有丝分裂，破坏纺锤体，使染色体停滞在分裂中期。故最终得到的细胞每条染色质将有两个DNA分子B．用秋水仙碱加倍曼陀罗等植物的染色体数获得成功以后，发现细胞有多个细胞核C．用秋水仙碱处理西瓜的幼苗，可能导致基因突变的产生D．用秋水仙碱处理西瓜的幼苗芽尖，会导致芽尖正在分裂的细胞染色体都加倍二、综合题：本大题共4小题7．（9分）某昆虫有多对相对性状，性别决定方式为XY型。现让此昆虫的一只纯合灰身红眼雌性与一只纯合黑身白眼雄性进行杂交，子一代雌雄个体均为灰身红眼，子一代雌雄个体相互交配，子二代表现型及比例为：灰身红眼雌性∶黑身红眼雌性∶灰身红眼雄性∶灰身白眼雄性∶黑身红眼雄性∶黑身白眼雄性=6∶2∶3∶3∶1∶1。控制体色的基因用A、a表示，控制眼色的基因用B、b表示，回答下列问题：（1）此昆虫控制眼色的基因位于_______________染色体上，依据是____________。（2）此昆虫控制体色的基因与控制眼色的基因的遗传______________（填是或否）遵循自由组合定律，理由是____________________________________________。（3）选择题干中子二代中灰身红眼雌性个体与灰身红眼雄性个体进行交配，则子三代中黑身白眼个体出现的概率是______________________。（4）若实验中发现纯合红眼雌性个体与纯合白眼雄性个体杂交，子代中出现一只白眼雌性个体，研究发现这只白眼雌性个体为遗传物质改变引起的，其原因可能是染色体片段缺失或_________________；如要通过杂交实验进一步判断这只白眼雌性个体出现的原因（已知此昆虫体内缺乏眼色基因无法存活），则实验思路是：_____________________________________。预期结果及结论是：_________________________________。8．（10分）临近2020年的春节，武汉出现不明原因肺炎，并出现死亡病例和传染现象，我国政府及时采取防治措施，疫情得到有效防控。科学家检测发现这场肺炎是由一种新型“冠状病毒”引起。请回答下列相关问题：（1）新冠肺炎病毒进入人体内后，首先由____________________组成的防线会发挥防御作用，与特异性免疫相比，这种免疫类型的主要特点_____________（答出两条）。（2）被病毒侵染的肺泡细胞，称为_________，人体内的_________细胞会与该细胞密切接触使其裂解死亡，释放病毒。（3）病毒侵入体内后，会激活免疫细胞释放细胞因子，该物质会刺激_________体温调节中枢，使有关腺体分泌的________和肾上腺素的量增加，从而使产热增加。（4）2月28日，国家卫健委鼓励康复者捐献血浆，提高重症危重症患者治愈率。康复者血清中能与新型冠状病毒结合的物质主要是_________，与该物质合成与加工有关的具膜细胞器有____________________。（5）若被确认为“新冠”患者，请例举具体的应对措施是__________________________。9．（10分）草莓比较耐阴，若将其栽种在光照强度较弱的温室大棚里可能更加适宜生长。某生物兴趣小组研究了遮光处理对草莓叶片光合作用的影响。材料用具：二叶期草莓幼苗若干、遮阳网(网内光强为自然光强1/3左右)、光合分析测定仪等。实验步骤与分析：选取生长状况相似的草莓幼苗若干，均分为对照组和实验组，实验组用遮阳网进行处理。将两组草莓幼苗在相同且适宜条件下培养至植株长出6片叶左右，测得其净光合速率如图甲所示。（1）据图甲分析，实验组有机物累积总量显著低于对照组，与预期不符，判断依据为__________。（2）有同学推测遮阴可能影响光合作用的__________反应，并据此继续进行实验得到图乙的结果。由图乙可知，实验组利用CO2的效率降低，可能的原因是遮阴使叶片温度降低，导致__________。（3）某同学推测，适当遮光可能导致叶绿素含量增加，以适应弱光环境。请设计一个简单的实验验证该同学的推测是否正确，简单的写出实验思路：__________。（4）综上所述，欲提高草莓的光合速率，可改变__________(填“CO2浓度”或“遮光比例”)再作进一步研究。10．（10分）乙烯具有促进果实成熟的作用，ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。利用反义DNA技术（原理如图1），可以抑制这两个基因的表达，从而使番茄具有耐储存、宜运输的优点。图2为融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反义表达载体的结构示意图。（1）图2中的2A11为特异性启动子，则2A11应在番茄的____________（器官）中表达。（2）从番茄成熟果实中提取___________为模板，利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以进行拼接构成融合基因并扩增。（3）合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点，ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点，用限制酶____________对上述两个基因进行酶切，再串联成融合基因，相应的Ti质粒应用限制酶_______________进行切割，确保融合基因能够插入载体中。（4）为了实现图1中反义基因的效果，应将融合基因_______（正向/反向）插入在启动子2A11的下游即可构成反义融合基因。将表达载体与农杆菌菌液混合后，接种在含有___的培养基中，可筛选出含有反义融合基因的农杆菌，再利用农杆菌转化法获得转基因番茄。（5）在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时，____________（填“能”/“不能”）用放射性物质标记的ACC氧化（合成）酶基因片段做探针进行检测，理由是____________。11．（15分）如下图小麦种子萌发过程中鲜重的变化曲线。（1）阶段Ⅰ和Ⅲ小麦种子的鲜重增加明显。阶段Ⅲ中，种子胚细胞内水的主要存在形式是__________。（2）从细胞膜组成和结构的角度来推测，水分可经过细胞膜中的______、______从细胞外进入细胞内。（3）在阶段Ⅱ，种子吸水速率_____(填“大于”、“小于”或“等于”)阶段Ⅰ，呼吸速率_______(填“大于”、“小于”或“等于”)阶段Ⅰ。（4）据测定小麦种子萌发初期以无氧呼吸为主，欲测定无氧呼吸产物是否含有酒精，所用的试剂是______。（5）有研究表明，某种小麦在轻度干旱胁迫下，叶片净光合作用速率下降了38%。为探究其原因，某兴趣小组分别测定小麦叶片在轻度干旱胁迫和供水充足两种条件下的气孔张开程度(气孔导度)与叶肉细胞胞间CO2浓度。结果发现，轻度干旱胁迫组的气孔导度和胞间CO2浓度均小于供水充足组的，由此可以得出的合理结论是__________________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、B【解析】

有关抗体需要掌握的知识：

1、化学本质：免疫球蛋白；

2、产生部位：浆细胞；

3、产生场所：核糖体；

4、分布：主要分布在血清中，在组织液和外分泌液中也有少量分布。【详解】A、抗体的化学本质是免疫球蛋白，是由浆细胞分泌的，A错误；B、抗体与抗原的结合具有特异性，B正确；C、抗体是一种分泌蛋白，存在于细胞外液中，不能在细胞内发挥作用，C错误；D、抗体的分泌过程属于胞吐，这一过程体现了细胞膜的流动性，D错误。故选B。【点睛】本题考查了人体免疫的有关知识，要求考生能够识记抗体的化学本质、产生部位和产生场所等，掌握分泌蛋白的合成和分泌过程，能够结合所学知识准确判断各项。2、D【解析】

1、观察DNA和RNA在细胞中分布实验的原理：甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿可使DNA呈绿色，吡罗红可使RNA呈红色，利用甲基绿和吡罗红混合染色剂对细胞染色，同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。2、胡萝卜素为橙黄色、叶黄素为黄色、叶绿素a为蓝绿色、叶绿素b为黄绿色。【详解】A、根据上述分析可知，观察DNA和RNA在细胞中分布的实验中，甲基绿可使DNA着绿色，A正确；B、酒精与酸性条件下的重铬酸钾发生颜色反应，从橙色变成灰绿色，B正确；C、健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色，C正确；D、叶绿体中的叶绿素a呈现蓝绿色，D错误。故选D。【点睛】本题考查生物实验中的颜色变化，将几种与“绿”有关的实验放在一起比较，需要考生在平时的学习过程中注意比较、积累并准确识记。3、C【解析】

甲中DNA双链均为15N；乙种DNA一半为杂合链，一半双链均为15N；丙中DNA均为杂合链；丁中DNA一半为杂合链，一半双链均为14N。【详解】A、15N标记的DNA转至14N的培养基培养，繁殖一代的产生的两个DNA分子都是一条链含14N，另一条链含15N，与丙符合，A错误；B、15N标记的DNA转至14N的培养基培养，繁殖两代会产生4个DNA分子，其中2个DNA分子是杂合链，2个DNA双链均含14N，与丁符合，B错误；B、由上分析可知，丁是分裂两代的结果，每20分钟繁殖一代，故出现丁的结果需要40分钟，C正确；D、转入14N培养基中繁殖三代后所有的DNA均含14N，D错误。故选C。4、C【解析】

依题意可知，该实验的pH为无关变量，为了排除无关变量的干扰，应控制相同且适宜，而缓冲液能够起到维持反应液的pH恒定的作用，因此需最先加入；酶具有高效性，所以在控制pH恒定的条件下，应先加底物后加酶，让酶促反应在适宜的温度条件下进行，一定时间后检测产物的量。根据题干信息“除酶外所有试剂均已预保温”，所以合理的操作顺序是在调整pH值后，加入酶，即加入缓冲液→加入底物→加入酶→保温并计时→一段时间后检测产物的量，故选C。【点睛】获取题干信息“除酶外所有试剂均已预保温”，根据实验设计中无关变量要保持适宜且相同，科学设计实验程序。5、C【解析】

图示为人体某个细胞所经历的生长发育各个阶段示意图，其中a表示细胞生长，细胞体积增大；b表示细胞分裂，细胞数目增多，但细胞种类不同；c表示细胞分化，细胞数目不变，但细胞种类增多。【详解】A、图中①～⑥细胞中都有完整的细胞核，都含有控制个体发育的全套遗传物质，所以都具有细胞的全能性，A正确；

B、由于基因的选择性表达导致c细胞分化出现⑤⑥，两者核基因基本相同，但两种细胞应基因选择性表达，其中的mRNA不完全相同，B正确；C、⑤由于细胞代谢受损或中断引起的细胞死亡对于机体是不利的，属于细胞坏死而非细胞凋亡，C错误；D、⑤和⑥细胞的衰老过程中细胞核体积增大，仍有基因能表达，D正确。故选C。【点睛】本题综合考查细胞生长、分裂、分化和衰老及癌变的相关知识，意在考查学生理解所学知识的要点，把握知识间内在联系的能力以及分析图示的能力，透彻理解各时期特点是解题关键。6、C【解析】

多倍体产生的人为因素是用秋水仙素处理植物的幼苗或发育的种子，从而抑制细胞中纺锤体的形成，从而使细胞中的染色体加倍．与正常个体相比，多倍体具有的特点是植株个体巨大、合成的代谢产物增多，但是发育迟缓。【详解】A、秋水仙碱抑制纺锤丝的形成，但没有抑制染色体着丝点的分裂，所以最终得到的细胞每条染色质将有1个DNA分子，A错误；B、用秋水仙碱处理可以获得多倍体植物，但只有1个细胞核，B错误；C、秋水仙碱是化学物质，可能诱导细胞发生基因突变，C正确；D、用秋水仙碱处理西瓜的幼苗芽尖，只有部分细胞染色体数目加倍，D错误。故选C。【点睛】本题需要考生理解秋水仙碱诱导多倍体的基本原理。二、综合题：本大题共4小题7、X子二代中雌性全为红眼，雄性中红眼∶白眼=1∶1，出现眼色与性别关联的现象是子二代中灰身∶黑身=3∶1，红眼∶白眼=3∶1，同时分析两对性状遗传时出现四种表现型且比例为9∶3∶3∶1（或：子二代中，灰身红眼∶灰身白眼∶黑身红眼∶黑身白眼=9∶3∶3∶1）1/72基因突变让这只白眼雌性个体与红眼雄性个体杂交，观察后代雌雄性别比例及眼色情况若子代个体中雌性全为红眼，雄性全为白眼，且雌性∶雄性=1∶1，则为基因突变所致；若子代个体雌性全为红眼，雄性全为白眼，且雌性∶雄性=2∶1，则为染色体片段缺失所致【解析】

分析题意可知，一只纯合灰身红眼雌性与一只纯合黑身白眼雄性进行杂交，子一代雌雄个体均为灰身红眼，说明灰身、红眼为显性性状。子一代雌雄个体相互交配，子二代表现型及比例为：灰身红眼雌性∶黑身红眼雌性∶灰身红眼雄性∶灰身白眼雄性∶黑身红眼雄性∶黑身白眼雄性=6∶2∶3∶3∶1∶1，F2中无论雌雄均为灰身∶黑身=3∶1，说明控制灰身和黑身的基因位于常染色体上。F2中雌性均为红眼，雄性中红眼∶白眼=1∶1，说明控制眼色的基因位于X染色体上。所以控制体色的基因与控制眼色的基因的遗传遵循自由组合定律。【详解】（1）分析题意可知，此昆虫控制眼色的基因位于X染色体上，判断依据是：子二代中雌性全为红眼，雄性中红眼∶白眼=1∶1，出现眼色与性别关联的现象。（2）由于子二代中灰身∶黑身=3∶1，红眼∶白眼=3∶1，同时分析两对性状遗传时出现四种表现型且比例为9∶3：3∶1（或：子二代中，灰身红眼∶灰身白眼∶黑身红眼∶黑身白眼=9∶3∶3∶1），故此昆虫控制体色的基因与控制眼色的基因的遗传遵循自由组合定律。（3）据题意可知，子二代中灰身红眼雌性个体与灰身红眼雄性个体进行交配，使用“先拆分再组合”的解题策略。①灰身雌性基因型是1/3AA，2/3Aa，灰身雄性基因型也是1/3AA，2/3Aa，棋盘法表示如下：②红眼雌性基因型是1/2XBXB，1/2XBXb，红眼雄性基因型是XBY，棋盘法表示如下：组合在一起，子三代黑身白眼个体出现的概率是1/9×1/8=1/72。（4）若实验中发现纯合红眼雌性个体与纯合白眼雄性个体杂交，子代中出现一只白眼雌性个体，研究发现这只白眼雌性个体为遗传物质改变引起的，其原因可能是染色体片段缺失或基因突变所致。若为染色体片段缺失，则白眼雌性的基因型为XbX0，若为基因突变，则白眼雌性的基因型为XbXb。为进一步判断这只白眼雌性个体出现的原因，可让这只白眼雌性个体与红眼雄性（XBY）个体杂交，观察后代雌雄性别比例及眼色情况。若为基因突变所致，则XbXb×XBY杂交的子代个体中雌性全为红眼，雄性全为白眼，且雌性∶雄性=1∶1；若为染色体片段缺失所致，则XbX0×XBY杂交的子代个体雌性（XBX0、XBXb）全为红眼，由于X0Y死亡，所以雄性全为白眼（XbY），且雌性∶雄性=2∶1。【点睛】本题考查自由组合定律的实质和应用以及变异类型的判断，要求考生具有一定的分析推理和计算能力。8、吞噬细胞和体液中杀菌物质生来就有，不针对某一类特定病原体，而是对多种病原体都有一定的防御作用靶细胞效应T下丘脑甲状腺素抗体内质网、高尔基体和线粒体遵医嘱治疗和自我隔离避免病毒传播【解析】

1．非特异性免疫指机体先天具有的正常的生理防御功能，对各种不同的病原微生物和异物的入侵都能作出相应的免疫应答。它和特异性免疫一样都是人类在漫长进化过程中获得的一种遗传特性。非特异性免疫是人一生下来就具有，而特异性免疫需要经历一个过程才能获得。2．新型冠状病毒侵入人体→T淋巴细胞释放淋巴因子→下丘脑体温调节中枢→垂体→甲状腺和肾上腺分别分泌甲状腺激素和肾上腺激素→体温上升。3．B细胞接受抗原刺激后，开始进行一系列的增殖、分化，形成记忆细胞和浆细胞;浆细胞分泌抗体与相应的抗原特异性结合，发挥免疫效应。【详解】（1）新冠肺炎病毒进入人体内后，首先非特异性免疫发挥作用，由于已经侵入人体，这时由吞噬细胞和体液中的杀菌物质组成的第二道防线会发挥防御作用，与特异性免疫相比，这种免疫类型的主要特点有生来就有，不针对某一类特定病原体，而是对多种病原体都有一定的防御作用。（2）被病毒侵染的肺泡细胞，携带能被免疫细胞识别的抗原，称为靶细胞，在细胞免疫的过程中，人体内的效应T细胞会与该细胞密切接触使其裂解死亡，释放病毒。（3）据分析可知，病毒侵入体内后，会激活T淋巴细胞释放淋巴因子，该物质会刺激下丘脑体温调节中枢，通过分级调节，使有关腺体分泌的甲状腺激素和肾上腺素的量增加，从而使产热增加，体温上升。（4）由于康复者曾经接触新冠肺炎病毒，体内免疫系统产生了对应的免疫细胞和免疫活性物质，其血清中能与新型冠状病毒结合的物质主要是抗体，抗体的本质是分泌蛋白，与其合成与加工有关的细胞器有核糖体（合成）、内质网（加工）、高尔基体（进一步加工）和线粒体（提供能量），其中核糖体不具有膜。（5）若被确认为“新冠”患者，具体的应对措施由保持积极乐观的心态，遵医嘱治疗和自我隔离避免病毒传播，症状缓解后，适当进行一定程度体育锻炼。【点睛】本题为热点试题，结合当下疫情考察免疫调节相关的知识。9、在实验时间内，实验组吸收的CO2总量少于对照组暗光合作用相关酶的活性降低提取并用纸层析法分离遮光和未遮光情况下的草莓等量叶片中的色素，观察并比较叶绿素色素带的宽度遮光比例【解析】

由题意呈现的实验目的（研究遮光处理对草莓叶片光合作用的影响）与反映实验结果的曲线图和柱形图为切入点，明辨实验的自变量和因变量，进而对比分析图甲中两曲线的变化趋势、图乙中实验组和对照组的固定CO2的效率和CO2的补偿点的差异，并围绕“影响光合作用的环境因素、绿叶中色素的提取和分离”的相关知识，对各问题情境进行分析解答。【详解】（1）对比分析对照组和遮荫组的曲线变化趋势可推知，实验组（遮荫组）有机物累积总量显著低于对照组的原因可能是：在实验时间内，遮阴组吸收的CO2总量少于对照组。（2）图乙显示，实验组（遮荫组）固定CO2的效率明显低于对照组，而CO2的补偿点却高于对照组，说明遮阴使实验组的CO2的利用率降低，可能影响光合作用的暗反应，究其原因是：遮阴使叶片温度降低，导致与光合作用相关的酶的活性降低，进而引起实验组利用CO2的效率降低。（3）欲设计一个简单的实验验证适当遮光可能导致叶绿素含量增加、以适应弱光环境的推测是否正确，其实验思路为：提取并用纸层析法分离遮光和未遮光情况下的草莓等量叶片的色素，观察并比较叶绿素色素带的宽度。（4）综上分析，左右自然光强，降低了草莓叶片利用CO2的效率，因此欲提高草莓的光合速率，可改变遮光比例再作进一步研究。【点睛】本题以反映“遮光处理对草莓叶片光合作用的影响”的实验结果的曲线图与柱形图为载体，考查学生对影响光合作用的环境因素等相关知识的识记和理解能力，以及具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理的能力。10、果实RNAXbalBamHl和Sacl反向卡那霉素不能番茄细胞内本来存在ACC合成酶基因，能与ACC合成酶基因探针发生分子杂交【解析】

分析题意和题图：番茄细胞中原有靶基因控制合成的ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。图1所示为反义基因转录成的RNA可与靶基因转录出的mRNA形成RNA双链，使靶mRNA不能与核糖体结合或被RNA酶降解，从而阻止了ACC氧化酶和ACC合成酶的合成，影响细胞中乙烯的合成，使番茄具有耐储存、宜运输的优点。图2所示的基因表达载体的组成包括复制原点、启动子、终止子、标记基因和目的基因，目的基因插入点在启动子和终止子之间。【详解】（1）乙烯具有促进果实成熟的作用，因此图2中的2A11为特异性启动子，则2A11应在番茄的果实中表达。（2）从番茄成熟果实中提取RNA为模板，利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以进行拼接构成融合基因并扩增。（3）合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点，ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点，要将两个基因融合，需用同一种限制酶即XbaⅠ酶对上述两个基因进行酶切，再用DNA连接酶串联成融合基因，这样融合基因上有三个限制酶切点：BamHⅠ、XbaⅠ、SacⅠ，其中限制酶BamHⅠ、SacⅠ分别位于融合基因的两端，因此相应的Ti质粒应用限制酶BamHl和Sacl进行切割，确保融合基因能够插入载体中。（4）反义融合基因是由番茄果实细胞中的靶基因转录出的mRNA反转录形成的，因此为了实现图1中反义基因的效果，应将融合基因反向插入在启动子2A11的下游即可构成反义融合基因。将表达载体与农杆菌菌液混合后，接种在含有卡那霉素的培养基中，可筛选出含有反义融合基因的农杆菌，再利用农杆菌转化法获得转基因番茄。（5）在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时，因为番茄细胞内本来存在ACC合成酶基因，能与ACC合成酶基因探针发生分子