云南民族大学附中高三下学期联合考试新高考生物试题及答案解析

云南民族大学附中高三下学期联合考试新高考生物试题注意事项:1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号码填写清楚，将条形码准确粘贴在条形码区域内。2．答题时请按要求用笔。3．请按照题号顺序在答题卡各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试卷上答题无效。4．作图可先使用铅笔画出，确定后必须用黑色字迹的签字笔描黑。5．保持卡面清洁，不要折暴、不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．在一个水族箱中生活着两种原生动物，它们之间用一屏障隔开，经过一段时间的养殖后，两个种群的数量都达到最大值。这时将屏障撤掉。两个种群的数量变化曲线如图所示，下列分析错误的是（）A．种群B捕食种群AB．该图表示在后期水族箱中资源和其他条件较稳定C．若环境发生剧烈改变，最终可能种群B存在，种群A不存在D．若一直保留屏障，则种群A的数量变化曲线符合“S型”增长2．已知a、b、c、d是某细菌DNA片段上的4个基因，下图中W表示野生型，①、②、③分别表示三种缺失不同基因的突变体，虚线表示所缺失的基因。若分别检测野生型和各种突变体中某种酶的活性，发现仅在野生型和突变体①中该酶有活性，则编码该酶的基因是（）A．基因a B．基因bC．基因c D．基因d3．下列哪一项不是生物多样性的内容（）A．多种多样的基因 B．丰富的物种数目C．丰富的个体数量 D．多种多样的生态系统4．如图为细胞融合的简略过程(只考虑两个细胞的融合)。若A、B分别是基因型为Hhrr、hhRr的两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上，由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800lx时，都不能增殖。下列叙述中正确的是()。①实验开始时必须用纤维素酶和果胶酶除去不利于原生质体融合的物质②实验中除了杂种细胞外，还有5种融合细胞③要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，可在大于800lx光照下培养，收集增殖分化的细胞团④要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr或Hhrr的杂种细胞，可在大于800lx光照下培养，收集增殖分化的细胞团⑤从理论上分析考虑，将融合细胞的培养液放在大于800lx光照下培养，有5种融合细胞不能增殖分化A．①②③⑤ B．①②③ C．①③④⑤ D．①③⑤5．图1为人体细胞正常分裂时某物质或结构数量变化的曲线，图2为人体某细胞分裂过程中某染色体行为示意图。下列叙述正确的是（）A．图1可表示有丝分裂部分时期染色单体数目的变化B．若图1表示有丝分裂过程中染色体组数目变化的部分曲线，则n=1C．若图1表示减数分裂过程中每条染色体上DNA分子数目变化的部分曲线，则n=1D．若图1表示减数分裂过程，图2所示行为发生在b点之后6．下列关于物质鉴定实验的叙述，正确的是（）A．鉴定还原糖实验，配制好的斐林试剂可以长期保存备用B．鉴定蛋白质实验，试剂与蛋白质反应需要进行水浴加热C．鉴定脂肪实验，对组织切片进行染色的时间没有限制D．鉴定淀粉实验，所用材料应富含淀粉且颜色要尽可能浅7．分泌蛋白S在人胚胎发育过程中起重要的调控作用，由基因Shh控制合成。固醇类复合物是该基因转录所必需的。翻译后的产物，只有在切除羧基端的一部分氨基酸后才有活性。下列叙述合理的是（）A．基因Shh表达时，RNA聚合酶与mRNA上的起始密码子结合B．切除羧基端一部分氨基酸，可能发生在内质网或高尔基体C．患者体内缺乏分泌蛋白S是由于遗传信息改变导致的D．固醇类复合物是通过控制RNA聚合酶的活性来影响分泌蛋白S的合成8．（10分）下列有关植物激素的叙述正确的是（）A．顶端优势的原因是顶芽生长素浓度过高抑制了自身生长B．用一定浓度的秋水仙素或低温处理植物都可以抑制植物有丝分裂后期细胞板形成，从而引起染色体数目加倍C．达尔文通过实验验证：吲哚乙酸在植物向光侧和背光侧分布不均匀是导致向光性的原因D．赤霉素和乙烯可分别促进种子萌发和果实的成熟二、非选择题9．（10分）雾霾天气影响人们的生活质量，空气中的病原体、过敏原和有毒颗粒物可以使人患病。如图所示为人体感染病原体后，机体通过调节清除体内病原体的过程（A、B、C表示激素，D、E表示不同的免疫活性物质）。回答下列问题：（1）患者中很多是儿童，这是因为儿童呼吸道黏膜的过滤能力有限，导致病原体突破了人体的第_________道防线。（2）患者多表现发热症状，原因之一是：T细胞分泌的物质D_________刺激了下丘脑中的体温调节中枢，使有关的内分泌腺分泌的C_________增加，产热增加所致。（3）感冒发热饮水较多后，血浆渗透压降低，会刺激下丘脑中的_________进而使垂体释放抗利尿激素的量_________（填，“增加”或“减少”），导致尿量增加，有利于将毒素排出体外。（4）据图分析可知，当人出现焦虑、紧张情绪时，在雾霾天更易患病，其原因是_________。10．（14分）地下黑作坊用病死猪肉腌制的腊肉往往含有大量的细菌，可利用“荧光素——荧光素酶生物发光法”对市场中腊肉含细菌多少进行检测：①将腊肉研磨后离心处理，取一定量上清液放入分光光度计（测定发光强度的仪器）反应室内，加入适量的荧光素和荧光素酶，在适宜条件下进行反应；②记录发光强度并计算ATP含量；③测算出细菌数量。请分析并回答下列问题：（1）荧光素接受________提供的能量后就被激活，在荧光素酶的作用下形成氧化荧光素并且发出荧光。根据发光强度可以计算出生物组织中ATP的含量，原因是发光强度与ATP含量成_________（填“正比”或“反比”）；根据ATP含量进而测算出细菌数量的依据是：每个细菌细胞中ATP含量_________。（2）ATP中的A代表_______，由_______结合而成。生物细胞中ATP的水解一般与___________（填“吸能反应”或“放能反应”）相联系。（3）研究人员用不同条件处理荧光素酶后，测定酶浓度与发光强度间的关系如下图所示。其中高浓度盐溶液经稀释后酶活性可以恢复，高温和Hg2＋处理后酶活性不可恢复。若要节省荧光素酶的用量，可以使用____处理；Hg2＋处理后酶活性降低可能是因为______。11．（14分）阅读下面的材料，完成（1）~（4）题。CAR-T细胞疗法上市2周年了，它改变了癌症治疗吗？2017年8月30日，美国食品药品管理局宣布由诺华公司制造的CAR-T疗法细胞治疗产品tisagenlecleucel正式获批上市，用于治疗25岁以下急性淋巴细胞白血病的复发性或难治性患者，由此CAR-T细胞治疗正式进入到人们的视线当中。目前CAR-T疗法上市已经超过了2周年，它对癌症的治疗产生了怎样的影响呢？CAR-T细胞的全称是：英文翻译简写Chimeric嵌合CAntigen抗原AReceptor受体RCAR-T细胞疗法是嵌合了抗原受体的T细胞疗法。因为癌细胞会表达和正常细胞不同的抗原，所以在实验室里制备可结合这些抗原的受体，让它在T细胞中表达，从而可以直接找到癌细胞并进行杀灭。相当于给T细胞加了一个可以定向导航追踪癌细胞的GPS。当然在这个过程中，除了需要找到癌细胞的特征信息并传递到T细胞内让它可以识别肿瘤细胞，我们还需要在体外对改造后的T细胞进行培养，使其达到足够的数量，再将其回输到患者体内进行治疗。这就是CAR-T细胞疗法的整个过程。截止到目前，全球范围内获批的2款CAR-T细胞治疗产品治疗的癌症都属于血液瘤范畴，指的是血液细胞发生癌变引起的肿瘤。最新的研究结果显示：在B细胞急性淋巴瘤患者中，很多患者在接受单次细胞治疗回输后便获得了长期有效的持续缓解；在接受治疗后，总体有60%~93%的患者获得了完全缓解。而传统疗法在血液瘤中仅有不到50%的缓解率。然而这些并不是CAR-T细胞疗法的最终归宿。血液肿瘤只占恶性肿瘤中的很小一部分，目前对成年人健康危害最大的还是肺癌、胃癌等实体肿瘤。由贝勒医学院主导的一项针对神经母细胞瘤的治疗中，有27%的患者得到了完全缓解；另一项在肝癌、胰腺癌和结直肠癌中的研究中，肿瘤缩小的患者达到了13%，这表明CAR-T细胞疗法在实体肿瘤治疗中也有一定的作用，但仍需要进一步的优化。相对于血液肿瘤而言，实体肿瘤中CAR-T细胞疗法需要解决的难题主要有：实体瘤特异性靶点数量有限、CAR-T细胞无法有效浸润到实体瘤中、CAR-T细胞的持久性不足等。（1）CAR-T细胞与人体中原有的T细胞相比，其优越性在于___________________。（2）CAR-T细胞的制备离不开转基因技术，请简要说出制备CAR-T细胞的基本技术流程_________。（3）对CAR-T细胞进行体外培养，能否直接用动物细胞培养的方法？请说出理由_________。（4）根据文中所提到的实体肿瘤治疗效果差的原因，请你提出一条改进措施_________。12．回答下列（一）、（二）小题：（一）回答以菊花茎段为材料进行组织培养的有关问题：（1）在配制MS培养基时，通常先将各种药品配制成浓度为配方5~10倍的__________，这样配制的主要优点是__________（A．便于低温保存B．延长使用时间C．降低称量误差D．减少杂菌污染）。从培养基的作用看，在MS培养基中定量添加BA和NAA后的培养基属于___________培养基。（2）从自然界中获取的菊花茎段，须先用70%乙醇等进行消毒，最后用__________进行清洗。将茎段插入培养基的过程须在______中的酒精灯火焰旁进行，以保证无菌环境。（3）从带芽的茎段上长出丛状苗____________（填“需要”或“不需要”）经历脱分化，长出的丛状苗需__________后，再转入培养基中继续培养。（4）实验中选用BA和NAA而不用植物中存在的天然激素的原因是_____________________。（二）腺病毒能引起人呼吸系统不适等症状，但致死率低。研究发现该病毒可作为基因工程的载体。陈薇等科学家研发了以人5型腺病毒（Ad5）为载体的重组新冠疫苗，这是国内第一个进入临床试验阶段的新冠疫苗。腺病毒载体疫苗生产过程示意图如下：回答下列问题：（1）在制备人肾上皮细胞系（293细胞）时，发现培养一段时间，细胞铺满培养瓶后不再分裂，这种现象称为__________。出现此现象后，需用__________处理，得到细胞悬液，再进行__________培养，以获得更多的293细胞。（2）新冠病毒为RNA病毒，其遗传物质不能直接拼接到质粒上，因此在制备以上疫苗时需先通过___________过程获得相应的DNA。构建重组腺病毒穿梭质粒，可使用双酶切法，使之产生__________的粘性末端，以提高目的基因与质粒重组的成功率。据图可知需将___________导入293细胞，从而获得转基因腺病毒。（3）检测转基因腺病毒携带的目的基因是否在人体细胞内表达，可检测细胞内是否含有相应的__________或抗原分子，若检测抗原分子可用__________技术获得特异性探针。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、A【解析】

种间关系包括互利共生、捕食、竞争、寄生，其中互利共生的两种生物的数量变化是同步的；捕食关系中，两种生物的数量变化不同步，先增加者先减少，后增加者后减少，即一种生物的数量随另一种生物的数量变化而变化；竞争关系中，两者的数量呈同步性变化。据此答题。【详解】A、据图两者数量变化可判断两者为捕食关系，其中种群A捕食种群B，A错误；B、该图后期两者数量变化趋于稳定，可判断后期水族箱中资源和其他条件较稳定，B正确；C、若环境发生剧烈改变，最终可能被捕食者B存在，捕食者A不存在，C正确；D、据题干分析可知，若一直保留屏障，经过一段时间的养殖后，两个种群的数量都达到最大值，则种群A的数量变化曲线符合“S型”增长，D正确。故选A。2、B【解析】

因为该酶仅在野生型和突变体①中有活性，说明编码该酶的基因存在于野生型和突变体①中，且不存在于突变体②和突变体③中，由图比较观察知，野生型和突变体①同时含有且突变体②和突变体③同时不含有的基因为基因b。所以，答案为基因b，正确选项是B。3、C【解析】

物多样性的内涵通常包括三个方面，即基因的多样性、物种多样性和生态系统的多样性。【详解】ABD、生物多样性通常有三个主要的内涵，即基因的多样性、物种多样性和生态系统的多样性，ABD正确。C、丰富的个体数量不是生物多样性的内容，C错误。故选C。【点睛】解答此类题目的关键是理解生物多样性的内涵。4、D【解析】

植物体细胞杂交时，先要用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁，得到原生质体；再用化学方法（聚乙二醇）或物理方法（电激、离心和振动）来诱导原生质体融合，若只考虑两个原生质体的融合，诱导融合产生细胞团（只考虑两个原生质体的融合）有6种基因型，即HHrr、hhrr、hhRR、HhRr、Hhrr、hhRr，其中HHrr、hhrr、hhRR、Hhrr、hhRr的个体不能分化，只有同时具备了H和R基因才能够分化。【详解】①在植物体细胞杂交的实验中，为了便于原生质体的融合，需要用温和的方法去除细胞壁，细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以去除细胞壁时用纤维素酶和果胶酶，①正确；

②根据基因的自由组合定律可以看出，A的花粉即配子的基因型为Hr、hr，B的花粉基因型为hR、hr，诱导融合产生细胞团（只考虑两个原生质体的融合）共有6种基因型，即HHrr、hhrr、hhRR、HhRr、Hhrr、hhRr，其中4种属于杂种细胞，②错误；

③根据题干信息，“一对隐性纯合基因（rr或hh）的作用，在光照强度大于800lx时，都不能生长”，只有同时具备了R和H基因才能够分化，即只有HhRr的细胞团能分化，③正确；

④根据题干信息，“一对隐性纯合基因（rr或hh）的作用，在光照强度大于800lx时，都不能生长”，则基因型为hhRr或Hhrr的杂种细胞不能在大于800lx光照下培养，④错误；

⑤从理论上分析考虑，将融合细胞的培养液放在大于800Ix光照下培养，只有HhRr能生长，另外5种融合细胞都不能增殖分化，⑤正确。

故选D。5、C【解析】

1、有丝分裂过程中，各物质的变化规律：（1）染色体变化：后期加倍（4N），平时不变（2N）；（2）DNA变化：间期加倍（2N→4N），末期还原（2N）；（3）染色单体变化：间期出现（0→4N），后期消失（4N→0），存在时数目同DNA；（4）核膜和核仁：前期消失，末期重建；（5）中心体：间期复制后加倍，前期分离，末期细胞质分裂后恢复体细胞水平。2、减数分裂过程中，各物质的变化规律：（1）染色体变化：染色体数是2N，减数第一次分裂结束减半（2N→N），减数第二次分裂过程中的变化N→2N→N；（2）DNA变化：间期加倍（2N→4N），减数第一次分裂结束减半（4N→2N），减数第二次分裂再减半（2N→N）；（3）染色单体变化：间期出现（0→4N），减数第一次分裂结束减半（4N→2N），减数第二次分裂后期消失（2N→0），存在时数目同DNA。【详解】A、有丝分裂过程中，染色体单体数目没有出现过减半的情况，A错误；B、若图1曲线表示有丝分裂中染色体组数目变化的部分曲线，则n=2，B错误；C、每条染色体上的DNA数目为1或2，若图1曲线表示减数分裂中每条染色体上DNA分子数目变化的部分曲线，则n=l，C正确；D、图2所示变异属于基因重组，相应变化发生在减数第一次分裂前期，对应于图1中的a点时，D错误。故选C。6、D【解析】

生物组织中化合物的鉴定：（1）斐林试剂可用于鉴定还原糖，在水浴加热的条件下，溶液的颜色变化为砖红色（沉淀）。斐林试剂只能检验生物组织中还原糖（如葡萄糖、麦芽糖、果糖）存在与否，而不能鉴定非还原性糖（如淀粉）。（2）蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应。（3）脂肪可用苏丹Ⅲ染液（或苏丹Ⅳ染液）鉴定，呈橘黄色（或红色）。（4）碘液可以将淀粉染成蓝色。【详解】A、斐林试剂需要现配现用，不能长期保存，A错误；B、蛋白质的鉴定用双缩脲试剂，不需要水浴，B错误；C、脂肪的鉴定用苏丹Ⅲ染色3分钟，或者苏丹Ⅳ染色1分钟，C错误；D、淀粉遇碘变成蓝色，所以要求实验材料富含淀粉，且自身颜色越浅越好，防止对实验产生干扰，D正确。故选D。【点睛】本题考查生物组织中化合物的鉴定，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的试剂及试剂的使用方法、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。7、B【解析】

解答本题的关键是紧扣题干信息“分泌蛋白S在人胚胎发育过程中起重要的调控作用，由Shh基因控制合成，固醇类复合物是该基因转录所必需的”、“分泌蛋白S合成后并没有生物活性，只有在切除羧基端的一部分氨基酸后才有活性”答题。【详解】A、RNA聚合酶是转录时所需要的，应与基因Shh的启动子相结合，A错误；B、内质网和高尔基体对分泌蛋白都具有加工作用，B正确；C、缺乏分泌蛋白，可能是基因突变，也可能是蛋白质翻译后的加工、分泌等出问题，C错误；D、题干信息无法确定固醇类复合物是如何影响转录的，D错误。故选D。8、D【解析】

生长素对植物的生长效应表现出两重性，即低浓度促进生长，高浓度抑制生长。各种植物激素并不是孤立地起作用，而是多种激素相互作用共同调节；植物激素的概念：由植物体内产生，能从产生部位运输到作用部位，对植物的生长发育有显著影响的微量有机物。【详解】A、顶端优势是因顶芽产生的生长素积累在侧芽而导致侧芽生长受抑制，A错误；B、用一定浓度的秋水仙素或低温处理植物都可以抑制植物有丝分裂前期纺锤体的形成，B错误；C、达尔文通过实验验证单侧光照射使胚芽鞘的尖端产生某种刺激，当这种刺激传递到下部的伸长区时，会造成背光面比向光面生长快，因而出现向光性弯曲，C错误；D、赤霉素和乙烯分别能促进果实的发育和果实的成熟，D正确。故选D。二、非选择题9、一淋巴因子甲状腺激素细胞外液渗透压感受器减少T细胞的活性降低，免疫功能下降【解析】

由图中可得，A为促甲状腺激素释放激素，B为促甲状腺激素，C为甲状腺激素，D为淋巴因子，E为抗体。【详解】（1）皮肤、粘膜等抵抗外界病原体属于人体第一道防线，因此呼吸粘膜的过滤能力有限是导致病原体突破了人体第一道防线；（2）免疫系统中的T细胞分泌淋巴因子，能刺激下丘脑的体温中枢，甲状腺分泌的甲状腺激素能够参与体温调节，因此D为淋巴因子，C为甲状腺激素；（3）下丘脑中存在渗透压感受器，用于调节释放抗利尿激素，因此当血液渗透压下降时，下丘脑中的渗透压感受器受到刺激进而刺激垂体，抗利尿激素会使尿量减少，因此为了促进排尿，垂体释放的抗利尿激素会减少从而使尿量增加；（4）由图得，当人出现焦虑、紧张情绪时，T细胞的活性会降低，从而影响人的免疫功能使其下降，导致人在雾霾天更容易患病。【点睛】人体有三道防线，抵御病原体的攻击。是由皮肤和黏膜及其分泌物构成第一道防线，体液中的杀菌物质（如溶菌酶）和吞噬细胞构成第二道防线，主要由免疫器官和免疫细胞构成第三道防线。第一道防线与第二道防线通常容易混淆要注意区分。10、ATP正比大致相同且相对稳定腺苷腺嘌呤和核糖吸能反应Mg2＋Hg2＋破坏了酶的空间结构【解析】

根据题意可知，荧光素接受ATP提供的能量后就被激活，在荧光素酶的作用下发出荧光。据图分析，高温和Hg2＋处理后酶活性不可恢复，可推测Hg2＋处理后酶活性降低可能是因为Hg2＋破坏了酶的空间结构使酶变性。【详解】（1）荧光素接受ATP提供的能量后就被激活，在荧光素酶的作用下形成氧化荧光素并且发出荧光。根据发光强度可以计算出生物组织中ATP的含量，原因是发光强度与ATP含量成正比；根据ATP含量进而测算出细菌数量的依据是：每个细菌细胞中ATP含量大致相同且相对稳定，故可以根据ATP含量测算出细菌数量。（2）ATP中的A代表腺苷，由腺嘌呤和核糖结合而成。吸能反应需要ATP的水解释放能量，故生物细胞中ATP的水解一般与吸能反应相联系。（3）据图分析，用Mg2+处理荧光素酶后，在较低荧光素酶浓度下就能达到较高发光强度，因此若要节省荧光素酶的用量，可以使用Mg2+处理；Hg2+处理后，发光强度仅比高温处理高一些，根据题意，高温和Hg2＋处理后酶活性不可恢复，故Hg2＋处理后酶活性降低原因是Hg2+破坏荧光素酶（蛋白质）空间结构，导致酶活性下降。【点睛】本题考查酶与ATP相关知识，意在考查学生识记所列知识点，并能运用所学知识做出合理的判断或得出正确结论的能力。11、CAR-T细胞可以表达癌细胞抗原的受体，可以直接找到癌细胞并进行杀灭采用逆转录病毒载体将能合成特定受体的基因片段插入T细胞基因组中，使之表达出相应受体。不能，CAR-T细胞属于已分化的细胞，不能继续分裂增殖。寻找在多种实体瘤中高表达的特异性抗原；开发用于促进CAR-T细胞在体内扩增的RNA疫苗【解析】

免疫是指身体对抗病原体引起的疾病的能力，特异性免疫包含细胞免疫和体液免疫。细胞免疫对抗被病原体感染的细胞和癌细胞，此外也对抗移植器官的异体细胞。体液免疫为效应B细胞产生和分泌大量的抗体分子分布到血液和体液中，体液免疫的主要目标是细胞外的病原体和毒素。【详解】（1）CAR-T细胞与人体中原有的T细胞相比，其优越性在于CAR-T细胞可以表达癌细胞抗原的受体，可以直接找到癌细胞并进行杀灭。（2）CAR-T细胞的制备离不开转基因技术，制备CAR-T细胞的基本技术流程采用逆转录病毒载体将能合成特定受体的基因片段插入T细胞基因组中，使之表达出相应受体。（3）CAR-T细胞属于已分化的细胞，不能继续分裂增殖，不能直接用动物细胞培养的方法。（4）寻找在多种实体瘤中高表达的特异性抗原；开发用于促进CAR-T细胞在体内扩增的RNA疫苗，可以提高实体肿瘤治疗效果。【点睛】本题主要以文字信息考查学生对CAR-T细胞的理解，要求学生对文字信息有一定的处理能力。12、母液C发芽（生芽）无菌水超净台不需要分株BA和NAA是人工合成激素，植物没有相关分解酶，作用时间长，效果明显接触抑制胰蛋白酶传代逆转录不同重组腺病毒穿梭质粒和辅助质粒mRNA单克隆抗体制备【解析】

1、植物组织培养的过程：离体的植物组织、器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成胚状体，最后长出完整植株（新植体）。2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，被称为“激素杠杆”。3、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。4、基因工程技术的基本步骤