紫外可见分光光度计原理及应用 光度计工作原理

第第页紫外可见分光光度计原理及应用光度计工作原理紫外可见分光光度计法从问世以来，在应用方面有了很大的进展，尤其是在相关学科进展的基础上，促使分光光度计仪器的不断创新，功能更加齐全，使得光度法的应用更拓宽了范围。1.原理物质的吸取光谱本质上就是物质中的分子和原子吸取了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸取光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸取光谱曲线，可依据吸取光谱上的某些特征波优点的吸光度的高处与低处判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是依据物质的吸取光谱讨论物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外可见分光光度法的定量分析基础是朗伯—比尔（Lambert—Beer）定律。即物质在确定浓度的吸光度与它的吸取介质的厚度呈正比2应用2.1检定物质依据吸取光谱图上的一些特征吸取，特别是大吸取波长虽ax和摩尔吸取系数是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。在国内外的药典中，已将浩繁的药物紫外吸取光谱的大吸取波长和吸取系数载入其中，为药物分析供应了很好的手段。2.2与标准物及标准图谱对比将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中，在同一条件下分别测定紫外可见吸取光谱。若两者是同一物质，则两者的光谱图应完全一致。假如没有标样，也可以和现成的标准谱图对比进行比较。这种方法要求仪器精准，精密度高，且测定条件要相同。2.3比较大吸取波长吸取系数的一致性2.4纯度检验2.5推想化合物的分子结构2.6氢键强度的测定试验证明，不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同，这可以利用紫外光谱来判定化合物在不同溶剂中氢键强度，以确定选择哪一种溶剂。2.7络合物构成及稳定常数的测定2.8反应动力学讨论2.9在有机分析中的应用有机分析是一门讨论有机化合物的分别、辨别及构成结构测定的科学，它是在有机化学和分析化学的基础上进展起来的综合性学科。

紫外可见光光度计的测试我们该如何使用紫外可见光光度计进行杂光散光测试呢？下面跟我一起来了解一下吧。

据了解，有的紫外可见光光度计只测试220nm处的杂散光，不测试340nm处的杂散光，这样是不正确的，需测试220nm处杂散光是由于：

①依据仪器学理论中的电光源理论，氘灯在220nm处能量很小，即信号很小，简单显现杂散光；

②依据仪器学理论中的光电发射理论，光电倍增管在220nm处的光谱响应（灵敏度）低，简单显现杂散光。

③依据量子光学理论，波长是能量的倒数，波长短能量大，简单产生杂散光，而220nm处属于短波部分；

而测试340nm处杂散光的原因是完全不同的，由于340nm处一般是氘灯换钨灯和仪器调换滤光片的地方，此时最简单产生杂散光。所以，对于紫外可见光光度计来讲，应当测试220nm和340nm两处的杂散光。

紫外可见光光度计杂散光测试步骤：

1、首先将参比液注入配对石英石吸取池，分别放置在参比池座和试样池座内。再测定波段扫描基线并使之平滑。

2、将减光片插入试样光路的滤光片槽内，其读数即为减光片的衰减值K，然后将减光片插入参比光路的滤光片座内，

3、将石英吸取池中的蒸馏水依次换成上述截止滤光液，插入试样试样池座中，在相应的波段内扫描、打印；在记录纸的作标上量取测定波优点的透光度，乘以衰减值K，即得各测定波优点的杂散光值。

紫外可见光光度计仪器设计的理论依据是比耳定律。讨论的是物质对光的吸取。比耳定律的真正物理意义可以描述为：当一束平行的单