免疫缺陷性疾病及其免疫检测

免疫缺陷性疾病及其免疫检测第一节免疫缺陷病的分类和特点第二节原发性免疫缺陷病第三节继发性免疫缺陷病第四节免疫缺陷病检验内容提要由遗传因素或其他原因造成的免疫系统发育或免疫应答障碍而导致的一种或多种免疫功能不全称为免疫缺陷(immunodeficiency),由此所致的各种临床综合征称为免疫缺陷病(immunodeficiencydisease,ID)。第一节免疫缺陷病的分类和特点原发性免疫缺陷性疾病（primaryimmunodeficiencydisease,PIDD）继发性免疫缺陷病（secondaryimmunodeficiencydisease,SIDDorAIDD）一、免疫缺陷病分类反复感染易发肿瘤高度伴发自身免疫病的倾向，以类风湿关节炎和恶性贫血等多见。遗传倾向临床表现和病理损伤复杂多样二、免疫缺陷病的特点免疫缺陷病类型病原体类别感染类型体液免疫、吞噬细胞和补体缺陷以化脓性球菌感染为主，补体缺陷时也常见脑膜炎链球菌和淋球菌感染败血症、化脓性脑膜炎、肺炎、气管炎、中耳炎、全身性肉芽肿等细胞免疫缺陷细胞内寄生病原体感染为主重症病毒感染、真菌感染、布氏菌病、结核病联合免疫缺陷以化脓菌为主，有时合并胞内寄生病原体感染全身重症细菌及病毒感染、顽固性腹泻或脓皮病免疫缺陷病感染特点第二节原发性免疫缺陷病原发性免疫缺陷性疾病（primaryimmunodeficiencydisease,PIDD）又称先天性免疫缺陷病（congenitalimmunodeficiencydisease,CIDD）,是由于免疫系统遗传基因异常或先天性免疫系统发育障碍而致免疫功能不全引起的疾病。

一、原发性B细胞缺陷病二、原发性T细胞缺陷病三、原发性联合免疫缺陷病四、原发性吞噬细胞缺陷病五、原发性补体缺陷病原发性免疫缺陷性疾病

由于B细胞先天性发育不全，或由于B细胞不能接受T细胞传递的信号，而导致抗体产生减少的一类疾病。一、原发性B细胞缺陷primaryBlymphocytesdeficiency实验室指标特征主要临床表现体内Ig水平降低或缺陷外周血B细胞可减少或缺陷T细胞数量正常。反复化脓性感染发病机制:B细胞的信号转导分子酪氨酸激酶（Bruton’styrosinekinase，Btk）基因缺陷，使得B细胞发育过程中信号转导障碍，导致B细胞发育停滞于前B细胞阶段，成熟B细胞数量减少或缺失。（一）X性连锁无丙种球蛋白血症（X-linkedagamaglobulinemia，XLA）为X连锁隐性遗传，最常见原发性B细胞缺陷病，多见于男性婴幼儿。故又称Bruton病。临床表现：患儿多在出生6月后反复发生化脓性细菌感染,血清中各类Ig含量明显降低，外周血成熟B细胞和浆细胞数量几乎为零。临床表现：患儿易反复感染，尤其是呼吸道感染，比低水平免疫球蛋白缺陷病表现更为严重。（二）X性联高IgM综合征

（X-linkedhighIgMsyndrome，XLHM）发病机制：X-染色体上CD40L基因突变，使T细胞表达CD40L缺陷，其与B细胞CD40的相互作用受阻，导致B细胞活化增殖和Ig类别转换障碍，不能产生除IgM以外的其它类型免疫球蛋白。实验室指标：血清IgM升高而IgG、IgA、IgE水平低下，外周血和淋巴组织中有大量分泌IgM的浆细胞。实验室指标：血清IgA水平异常低下（<50mg/L），sIgA缺乏，其它各类Ig水平正常。（三）选择性IgA缺陷

（selectiveIgAdeficiency）最常见的选择性Ig缺陷，为常染色体显性或隐性遗传

发病机制：具有IgA受体的B细胞发育停滞，不能分化成为分泌IgA的浆细胞。临床表现：患者多无明显症状，或仅表现为呼吸道、消化道和泌尿道反复感染，少数患者可出现严重感染，常伴有自身免疫病和超敏反应性疾病。T细胞的发生、分化和功能障碍的遗传性缺陷，其中包括T细胞及其前体。T细胞缺陷不仅影响T效应细胞（如TCL），也会间接影响单核-吞噬细胞和B细胞。因此，多数T细胞功能缺陷者常伴体液免疫功能缺陷。二、原发性T细胞缺陷（primaryTlymphocytesdeficiency）患儿T细胞功能缺陷、外周血T细胞数减少或正常，B细胞和抗体功能正常或偏低。（一）先天性胸腺发育不全综合症又称DiGeorge综合征，为典型的T细胞缺陷性疾病，并伴甲状腺功能低下。发病机制：由于妊娠早期胚胎第三、四咽囊分化发育障碍，导致起源于该部位的器官如胸腺、甲状旁腺、主动脉弓、唇和耳等发育不全。临床特征：有心脏和大血管畸形，反复感染和新生儿24小时内出现手足抽搐

例如：CD3复合分子（

-、

-、

-、

-链）基因变异引起TCR-CD3复合物表达或功能受损

ZAP-70（一种酪氨酸激酶）基因变异，不能产生ZAP-70蛋白

（二）TCR活化和功能缺陷T细胞膜分子表达异常或缺失可导致T细胞活化和功能缺陷

一组胸腺、淋巴组织发育不全及Ig缺乏的遗传性疾病，机体不能产生细胞免疫和体液免疫应答。患者出生后6个月即出现发育障碍，易发严重感染而死亡。三、重症联合免疫缺陷

（severecombinedimmunodeficiencydisease，SCID）患者病理表现：T细胞缺乏或显著减少B细胞数量正常但功能异常，导致Ig生成减少和类型转换障碍主要发病机制：IL-2受体

链基因突变。（一）性联重症联合免疫缺陷（X-linkedSCID,X-SCID）

发病机制：定位于第20对染色体的ADA基因突变导致ADA缺乏，使腺苷和脱氧腺苷分解障碍，造成核苷酸代谢产物dATP和dGTP在细胞内大量蓄积，对早期T、B细胞有毒性作用，影响RNA、DNA、蛋白质和磷脂合成，使之发育成熟受阻，造成T细胞和B细胞缺陷。（二）腺苷脱氨酶缺乏症（adenosinedeaminase,ADA）

主要表现：

吞噬细胞的数量、移动和（或）黏附功能、杀菌活性等异常四、原发性吞噬细胞缺陷

primaryphagocytesdeficiency临床表现：化脓性细菌或真菌反复感染临床表现：患儿多在出生后1个月内即开始发生各种细菌的反复感染。（一）中性粒细胞数量减少分类：粒细胞减少症（granulocytopenia）和粒细胞缺乏症（agranulocytosis。发病机制：G-CSF（粒细胞集落刺激因子）基因突变导致粒细胞分化受阻。LAD-1发病机制：是由于CD-18基因突变，使中性粒细胞、巨噬细胞、T细胞、NK细胞表面整合素家族成员表达缺陷，导致中性粒细胞不能与内皮细胞黏附、移行并穿过血管壁到达感染部位。

（二）白细胞黏附缺陷

（leukocyteadhesiondeficiency，LAD）分类：分为LAD-1和LAD-2两种LAD-2发病机制：是一种岩藻糖转移酶基因突变，使得白细胞和内皮细胞表面缺乏能与选择素家族成员结合的寡糖配体Sialyl-Lewisx（Slex），导致白细胞与内皮细胞间的黏附障碍。临床表现：均表现为反复的化脓性细菌感染发病机制：

编码还原型辅酶Ⅱ（NADPH）氧化酶系统的基因缺陷。（三）慢性肉芽肿病

（chronicgranulomatousdisease，CGD）临床表现：为反复的化脓性感染，淋巴结、皮肤、肝、肺、骨髓等器官有慢性化脓性肉芽肿或伴有瘘管形成。多数为常染色体隐性遗传，少数为常染色体显性遗传,属最少见的原发性免疫缺陷病。五、原发性补体缺陷

（primarycomplementsystemdeficiency）在补体系统中，几乎所有的补体固有成分、补体调控蛋白及补体受体都可发生缺陷。临床表现为反复化脓性细菌感染。发病机制：C1抑制分子（C1inhibitor,C1INH）基因缺陷所致。（一）遗传性血管神经性水肿为常见的补体缺陷，属于常染色体显性遗传病临床表现：反复发作的皮肤黏膜水肿，若水肿发生于喉头可导致窒息死亡。发病机制：编码糖基磷脂酰肌醇（glycosylphosphatidylinositol,GPI）的pig-α基因翻译后修饰缺陷，导致GPI合成障碍。（二）陈发性夜间血红蛋白尿临床表现：慢性溶血性贫血、全血细胞减少和静脉血栓形成，晨尿中出现血红蛋白。第三节继发性免疫缺陷病

继发性免疫缺陷病（secondaryimmunodeficiencydisease,SIDD）是后天因素造成的，继发于某些疾病或使用药物后所致的免疫系统暂时或持久损害的一类免疫缺陷性疾病。分为继发性T细胞功能缺陷、继发性低丙种球蛋白血症、继发性吞噬细胞功能缺陷和补体缺陷。1．肿瘤：恶性肿瘤，加之放疗、化疗、营养不良、消耗等因素可导致免疫缺陷。2．感染性疾病：以HIV感染所致的艾滋病最为严重。3．遗传性疾病：染色体异常、酶缺乏、血红蛋白病等。4．营养不良5．免疫抑制疗法6．其它：如电离辐射、手术、创伤、脾切除等均可引起免疫功能低下。一、继发性免疫缺陷的常见原因又称艾滋病，是由人类免疫缺陷病毒（humanimmunodeficiencyvirus，HIV）感染引起的一组综合征。病人以CD4+T细胞减少为主要特征，同时伴反复机会感染、恶性肿瘤及中枢神经系统退行性病变。二、获得性免疫缺陷综合征

（acquiredimmunodeficiencysyndrome，AIDS）艾滋病全球分布情况In1986,theviruswasnamedHIVIn1981,firstreportofAIDSPneumocystisCarinniPneumonia(PCP)肺孢子菌肺炎Kaposi’ssarcoma(KS)卡波济肉瘤

In1982,thediseasewasnamedAIDSIn1983,theviruswasisolatedHIVco-discovererDr.RobertGalloHistoryofAIDSHIVcarrierAIDSpatientEpidemiology:

sourceofinfection

性传播(sexualcontact)

血液传播(throughblood)

垂直传播(mothertochild)男性同性性接触感染几率:1-4%异性间性接触感染几率:1%静脉输血感染几率:90-100%routes

of

transmissionDataof2007:

newinfection：50,000sexualcontactpercentage：56.9%（heterosexualcontact：44.7%；

homosexualcontact：12.2%）

injectionpercentage

：42%高危人群男性妇女、儿童目前艾滋病流行现状：由高危人群向一般人群扩散AIDS的病因：人类免疫缺陷病毒（humanimmunodifiencyvirus，HIV）

HIV-1和HIV-2两型。

（一）病原学HIVHIV-1HIV-2OMA,B,C,D,E,F,G,H,I,JTypesCladesANT70,MVP5180,VAURODNIH2GroupsNHIV的型和亚型p24核衣壳蛋白p17内膜蛋白Enzyme(RT、IN、PR)

gp120(受体：CD4，辅助受体：CXCR4/CCR5)+SSRNAgp41融合蛋白gp:glycoprotein(糖蛋白)StructureofHIV

结构基因HIV-1(HIV-2)

包膜(env)Gp160/gp120,gp41(gp140/gp105,gp36)

多聚酶(pol)P66,p55(P68,P56)

核心(gag)P24,p17(P26,p16)HIV的主要结构基因和相应的抗原（二）HIV的致病机制HIV通过gp120与靶细胞表面的CD4分子高亲和性结合，同时也与表达在靶细胞表面的趋化因子受体（CXCR4和CXCR5）结合，再由gp41介导病毒包膜与细胞膜融合，使病毒得以进入细胞。1．HIV侵入CD4+靶细胞的机制CD4分子是HIV糖蛋白的特异性受体，故HIV主要侵犯CD4﹢T细胞。表达CD4分子的单核-吞噬细胞、树突状细胞、B细胞、神经胶质细胞等也是其重要的靶细胞2．HIV损伤感染的CD4+细胞：HIV在靶细胞中复制，可通过直接或间接途径损伤CD4+细胞3．HIV逃避免疫攻击的机制：HIV感染机体后，可通过不同机制逃避免疫系统识别和攻击，以利于病毒在体内长期存活并不断复制。（三）HIV诱导的免疫应答

HIV感染机体后，HIV会进行性破坏机体免疫系统(尤其是细胞免疫)，但在病程不同阶段，机体免疫系统可通过不同应答机制以阻止病毒复制。体液免疫应答

中和抗体抗P24壳蛋白抗体抗gpl20和抗gp41抗体细胞免疫应答

CD8+T细胞应答CD4+T细胞应答

1．CD4﹢T细胞数量显著减少。2．Th1细胞与Th2细胞平衡失调。3．抗原呈递细胞功能降低。4．B细胞功能异常，表现为多克隆激活、高Ig血症和产生多种自身抗体。（四）HIV感染的免疫学特征HIV感染宿主其特征为潜伏期长、病程发展缓慢。（五）HIV感染的临床特点HIV急性感染多表现为单核细胞增多样综合征，血清可检出抗HIV抗体。临床症状多发生于感染后2-6周，表现为发热、肌肉痛、关节痛、头痛、腹泻、咽痛和淋巴结肿大等。HIV在胞内主要呈潜伏感染，当宿主细胞被细菌、病毒、丝裂原激活后，病毒即进行复制。③神经系统损害：约60%的AIDS病人出现AIDS痴呆症。（五）AIDS的典型临床表现①机会性感染：是AIDS病人死亡的主要原因。常见的引起机会感染的病原体是卡氏肺囊虫和白色念珠菌，其他有巨细胞病毒、带状疱疹病毒、隐球菌和鼠弓型虫等；②恶性肿瘤：AIDS患者易伴发Kaposi肉瘤和恶性淋巴瘤，也是AIDS病人常见的死亡原因；常

见综合征爱滋病（卡波氏肉瘤）第四节免疫缺陷病检验

免疫缺陷病的检测是多方面、综合性的，主要涉及体液免疫、细胞免疫、补体和吞噬细胞等方面的检测，除了采用免疫学方法、分子生物学方法外，一些常规的和特殊的检测手段也极为重要。

一、B细胞缺陷病的实验室检测二、T细胞缺陷病的实验室检测三、吞噬细胞缺陷病的实验室检测四、补体系统缺陷病的实验室检测五、获得性免疫缺陷病的实验室检测免疫缺陷病的实验室检测血清Ig测定同种血型凝集素的测定特异性抗体产生能力测定噬菌体试验B细胞表面膜免疫球蛋白（SmIg）的检测CD抗原检测一、B细胞缺陷的检测二、T细胞缺陷的检测T细胞功能检测T细胞数量及其亚群检测皮肤试验T细胞功能体外试验白细胞计数趋化功能检测吞噬和杀伤试验NBT还原试验黏附分子检测三、吞噬细胞免疫缺陷的检测四、补体系统缺陷的检测总补体活性单个组分的测定一般认为CH50、C1q、C4、C3和B因子等几项检测可大致反应补体缺陷的情况，对遗传性血管神经性水肿患者必须检测C1抑制剂才能最终确诊。五、获得性免疫缺陷病的检测HIV感染的免疫学诊断方法主要包括病毒抗原抗病毒抗体免疫细胞数目和功能抗体检测：血液（清）、尿液、唾液抗原检测：血清（浆）核酸检测：血清（浆）病毒分离：血液，脑脊液，性分泌液CD4细胞检测：血液病毒载量测定：血清（浆）检测标本种类（一）HIV抗原检测常用ELISA法检测HIV的核心抗原P24。P24出现于急性感染期和AIDS晚期，其定量检测可作为早期或晚期病毒量的间接指标。在潜伏期，P24检测常为阴性。

（二）HIV抗体检测HIV感染后2～3月可出现抗体，并可持续终身，此为艾滋病的常规检测指标。

初筛试验：

ELISA法胶乳凝集法免疫金层析法

确认试验： 免疫印迹法初筛查最基本，最可靠的手段ELISA试剂敏感性和特异性越来越高与抗原检测同时进行ELISA法检测HIV抗体常用的方法有免疫斑点法、免疫层析法、硒标记法、金标记法和凝集试验等。HIV抗体快速检测OraQuicktest（1）便于操作，大部分快速检测试剂均为一步法，只需在样品孔中按要求滴上样品后在规定的时间内观察结果即可。（2）反应时间短，一般为15～60分钟，大部分试剂的反应时间为30分钟。（3）可以目测，不需要特殊的仪器设备。HIV快速检测法的优点（5）试剂可在室温条件下保存，如雅培HIV-1/2抗体诊断试剂在30℃储存12个月后的试剂敏感性与储存与2~8℃的试剂敏感性相同。（4）技术要求不高。方法简单，受训的技术员都可操作。确认试剂必须经国家食品药品监督管理局注册批准。HIV抗体确认试验确认试验可使用免疫印迹法、条带免疫法及免疫荧光法。目前以免疫印迹法（WB试验）最为常用。HIV抗体确认试验判断标准①HIV抗体阳性：至少有两条膜带（gp41/gp120/gp160）或至少一条膜带与p24带同时出现；②HIV抗体阴性：无HIV抗体特异性条带出现；③HIV抗体可疑：出