原子荧光光谱与液相色谱联用仪性能测试方法

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中华人民共和国国家标准

GB/TXXXXX—XXXX

液相色谱与原子荧光光谱联用仪

性能测试方法

Themethodofperformancetestingforliquidchomatographycoupledatomic

fluorescencespectrometer

（征求意见稿）

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

GB/TXXXXX—XXXX

液相色谱与原子荧光光谱联用仪性能测试方法

1范围

本标准规定了液相色谱与原子荧光光谱联用仪性能测定的方法。

本标准适用于液相色谱与原子荧光光谱联用仪性能的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T13966分析仪器术语

GB/T21191原子荧光光谱仪

GB/T26792高效液相色谱仪

3术语与定义

GB/T13966界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1

基线稳定性baselinestability

仪器在30min内基线的漂移及噪声。

3.2

最小检测量minimumdetection

表征仪器的最大检测能力。

3.3

稳定性stability

在规定的条件下计量仪器保持其计量特性恒定(不随时间而变化)的能力。这里特指对特定溶液每间

隔10min进行一次测试，连续测试次数大于11次的稳定性，用相对标准偏差来表示。

4试剂和材料

4.1盐酸（优级纯）HCl。

4.2硝酸（优级纯）HNO3。

4.3甲醇（色谱纯）CH3OH。

1

GB/TXXXXX—XXXX

4.4氢氧化钾（分析纯）KOH。

4.5硼氢化钾（纯度不小于95g/100g）KBH4。

4.6磷酸二氢铵（分析纯）NH4H2PO4。

4.7氨水（分析纯）NH3•H2O。

4.8水：符合GB/T6682的规定的实验室一级水。

4.9试验用各种元素的标准储备溶液，均使用有证的一级标准物质进行逐级稀释。砷酸根(As(Ⅴ))、亚

砷酸根(As(Ⅲ))、一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)、砷甜菜碱(AsB)、砷胆碱(AsC),制备方法见附录A。

4.10氩气（纯度不小于99.99%）。

4.11经计量检定合格的容量瓶、移液管、移液器、烧杯、称量瓶等。

4.12载流：盐酸溶液（5+95）配制方法。

溶液（5+95）的配制(V/V)：取50mL浓盐酸加入到已有适量水的1000mL的容量瓶中，加水至刻度。

摇匀盐酸备用。

4.13还原剂：20g/L硼氢化钾溶液配制方法。

20g/L硼氢化钾溶液的配制：称取5g氢氧化钾溶于约200mL水，加入20g硼氢化钾并使之溶解，用水

稀释至1000mL，摇匀，用时现配。

4.14流动相：磷酸二氢铵溶液配制方法。

4.14.1等度流动相

磷酸二氢铵溶液（15mmol/L）：称取1.7g磷酸二氢铵，溶于1000mL中，以氨水调节pH至6.0，经0.45µm

水系滤膜过滤后，于超声水浴中超声脱气30min。

4.14.2流动相A

磷酸二氢铵溶液（2mmol/L）：称取0.23g磷酸二氢铵，溶于1000mL水中，以氨水调节pH至8.5，经

0.45µm水系滤膜过滤后，于超声水浴中超声脱气30min。

4.14.3流动相B

磷酸二氢铵溶液（60mmol/L）：称取6.90g磷酸二氢铵，溶于1000mL水中，以氨水调节pH至8.0，

经0.45µm水系滤膜过滤后，于超声水浴中超声脱气30min。

5仪器

5.1分析天平，准确度级别为I级，实际标尺分度值不大于0.1mg。

5.2砷（As）原子荧光专用空心阴极灯。

5.3超声波清洗器（功率W≥500W，超声频率（40~130）KHz）。

5.4溶剂过滤器，微孔滤膜（规格水相0.45μm）；真空泵（抽气速率不小于30L/min）。

2

GB/TXXXXX—XXXX

5.5带100μL定量环的进样阀。

5.6阴离子色谱柱或等效柱。

5.7微量进样针或液相自动进样器(进样量大于100μL)。

6条件

6.1仪器工作条件

6.1.1环境温度：（15～30）℃。

6.1.2相对湿度：小于80%。

6.1.3供电电源：交流（220±22）V，频率（50±1）Hz，并有良好接地。

6.1.4室内明亮且无直射光源、整洁、无尘、无腐蚀性气体，有良好的通风装置。

6.1.5无影响仪器使用的振动和电磁干扰。

6.2试验条件

6.2.1在试验前将仪器调整至最佳工作状态并预热30min。

6.2.2设置负高压为（200～500）V。

6.2.3灯工作电流为（20～120）mA。

6.2.4液相泵流量为（0.5～5.0）mL/min。

6.2.5所有性能指标在同一试验条件下完成。

7性能指标的测定

7.1基线稳定性

7.1.1试验程序

测量条件同6，进等度流动相、进载流及还原剂，连续测量30min。将30min内测定结果的荧光强度

初始值、最大值和最小值、最大相邻峰-峰值，按公式(1)计算出结果表示基线漂移。按公式(2)计算出结

果表示基线噪声。

ImaxImin

100%...............................................(1)

I0

式中：

——基线漂移；

内测得荧光强度最大值；

Imax——30min

3

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内测得荧光强度最小值；

Imin——30min

荧光强度的初始值。

I0——

Nd

100%.................................................(2)

I0

式中：

——基线噪声；

内测得最大相邻峰峰值。

Nd——30min-

7.2最小检测量

7.2.1试剂

试样：10ng/mL的As(Ⅲ)、DMA、MMA、As(Ⅴ)混合标准溶液，见附录A.4。

7.2.2试验程序

测量条件同6，高压输液泵流量1.0mL/min，等度流动相淋洗至基线稳定，对10ng/mL试样（进样量

100µL）进行测量，采集色谱图，记录色谱图中四个组分的峰高。按公式(3)分别计算四个组分的最小检

测量（ng）。

2NdcV

CLi.........................................................(3)

1000Hi

式中：

第个组分最小检测量，单位为纳克，；

CLi——i(ng)i——1~4

同；

Nd——7.1.2

c——标准溶液的浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL)；

第个组分的色谱峰高，；

Hi——i(mV)i——1~4

V——进样体积，单位为微升(μL)。

7.3重复性

7.3.1试剂

试样：100ng/mL的As(Ⅲ)、DMA、MMA、As(Ⅴ)混合标准溶液，见附录A.4。

4

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7.3.2试验程序

测量条件同6，高压输液泵流量1.0mL/min，等度流动相淋洗至基线稳定，对100ng/mL试样（进样

量100µL）进行连续7次重复测量，记录峰高或峰面积，记录各个峰保留时间。将保留时间代入式（4）

计算结果表征为定性重复性，将峰面积（或峰高）测试数据代入式(4)计算结果表征为定量重复性。

n

2

II

1i

RSDi1100%.....................................................(4)

In1

式中：

RSD——定性或定量重复性；

I

i——第i次测得的保留时间或峰高（或峰面积）；

I——7次测量保留时间或峰高（或峰面积）测量值的算术平均值；

n——测量次数，n=7。

7.4线性

测定线性按表1中的溶液进行测试，计算结果。

7.4.1试剂

试样：As(Ⅲ)、DMA、MMA、As(Ⅴ)混合标准溶液，见附录A.4

7.4.2试验程序

测量条件同6，高压输液泵流量1.0mL/min，等度流动相淋洗至基线稳定，按表1中规定标准曲线的

质量浓度进行测量（进样量100µL）。分别对标准样品中每一浓度点进行3次平行测定，取算术平均值

后，按一元线性回归方程求出工作曲线的相关系数r。

表1线性测量用As（Ⅲ）、DMA、MMA、As（Ⅴ）标准溶液质量浓度

As（Ⅲ）、DMA、MMA、As（Ⅴ）标准溶液质量浓度

ng/mL

C1C2C3C4C5C6

1020406080100

7.5等度分离度

7.5.1试剂

试样：100ng/mL的As(Ⅲ)、DMA、MMA、As(Ⅴ)混合标准溶液，见附录A.4

7.5.2试验程序

5

GB/TXXXXX—XXXX

测量条件同6，高压输液泵流量1.0mL/min，等度流动相淋洗至基线稳定，对100ng/mL试样（进样

量100µL）进行测量，As(Ⅲ)、DMA、MMA、As(Ⅴ)采集完成后，分别记录As(Ⅲ)和DMA两个组分的保

留时间与峰底宽，按公式(5)计算等度分离度。

2tR2tR1

R.....................................................(5)

W1W2

式中：

R——等度分离度；

的保留时间，单位为分钟；

tR2——DMA(min)

Ⅲ的保留时间，单位为分钟；

tR1——As()(min)

Ⅲ的峰底宽，单位为分钟；

W1——As()(min)

的峰底宽，单位为分钟。

W2——DMA(min)

7.6梯度分离度

7.6.1试剂

试样：100ng/mL的As(Ⅲ)、DMA、MMA、As(Ⅴ)、AsB、AsC混合标准溶液，见附录A.4。

7.6.2试验程序

梯度洗脱，测量条件同6，梯度洗脱程序见附录B中B.2，高压输液泵流量1.0mL/min，梯度流动相

淋洗至基线稳定，对100ng/mL试样（进样量100µL）进行测量，AsC、AsB、DMA、MMA、As(Ⅲ)、As(Ⅴ)

采集完成后，分别记录各个相邻组分的保留时间与峰底宽，共5组，按公式(6)计算梯度分离度。

2tR4itR3i

RTi...........................................................(6)

W3iW4i

式中：

第组梯度分离度；。

RTi——ii——1~5

第组相邻两个色谱峰中保留时间大的组分的保留时间，单位为分钟；

tR4i——i(min)

第组相邻两个色谱峰中保留时间小的组分的保留时间，单位为分钟；

tR3i——i(min)

第组相邻两个色谱峰中保留时间小的组分的峰底宽，单位为分钟；

W3i——i(min)

6

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第组相邻两个色谱峰中保留时间大的组分的峰底宽，单位为分钟；

W4i——i(min)

7.7稳定性

7.7.1试剂

试样：As(Ⅲ)、DMA、MMA、As(Ⅴ)混合标准溶液，见附录A.4。

7.7.2试验程序

测量条件同6，高压输液泵流量1.0mL/min，等度流动相淋洗至基线稳定，对100ng/mL试样（进样

量100µL）进行测量，采集色谱图，记录色谱图中As(Ⅲ)的保留时间和峰高值（或峰面积值），每间隔

10min进行一次测试，连续测试次数大于11次，将保留时间代入式(7)计算结果表征为定性稳定性，将峰

面积（或峰高）测试数据代入式(7)计算结果表征为定量稳定性。

n

2

II

1i

RSDi1100%.............................................(7)

WIn1

式中：

定性或定量稳定性；

RSDW——

第次测得Ⅲ的保留时间或峰高（或峰面积）；

Ii——iAs()

I——n次测量As(Ⅲ)保留时间或峰高（或峰面积）测量值的算术平均值，n=11。

7

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AA

附录A

（规范性附录）

液相色谱与原子荧光光谱联用仪测试用标准溶液的制备

A.1玻璃器皿的处理。

A.1.1将所用的玻璃器皿用清水冲洗干净，然后用（3+7）硝酸浸泡24h。

A.1.2用清水冲洗干净后，再用实验室一级水冲洗3～4次。

A.1.3洗净的玻璃器皿干燥后备用。

A.2标准储备溶液

砷酸根As(Ⅴ)以As计：17.5±0.4μg/g

一甲基砷MMA以As计：25.1±0.8μg/g

二甲基砷DMA以As计：52.9±1.8μg/g

亚砷酸根As(Ⅲ)以As计：75.7±1.2μg/g

砷甜菜碱AsB以As计：38.8±1.1μg/g

砷胆碱AsC以As计：28.0±1.1μg/g

以上为有证标准物质。

A.3标准使用液的制备

A.3.1砷酸根（1μg/mL，以As计）标准使用液的制备

用移液器准确吸取A.2中砷酸根标准贮备溶液571μL于10mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，于

冰箱中保存。

A.3.2一甲基砷（1μg/mL，以As计）标准使用液的制备

用移液器准确吸取A.2中一甲基砷标准贮备溶液398μL于10mL容量瓶中，用实验室一级水稀释至刻

度，摇匀，于冰箱中保存。

A.3.3二甲基砷（1μg/mL，以As计）标准使用液的制备

用移液器准确吸取A.2中二甲基砷标准贮备溶液189μL于10mL容量瓶中，用实验室一级水稀释至刻

度，摇匀，于冰箱中保存。

A.3.4亚砷酸根（1μg/mL，以As计）标准使用液的制备

用移液器准确吸取A.2中亚砷酸根标准贮备溶液132μL于10mL容量瓶中，用实验室一级水稀释至刻

度，摇匀，于冰箱中保存。

A.3.5砷甜菜碱（1μg/mL，以As计）标准使用液的制备

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用移液器准确吸取A.2中砷甜菜碱标准贮备溶液257.7μL于10mL容量瓶中，用实验室一级水稀释至刻

度，摇匀，于冰箱中保存。

A.3.6砷胆碱（1μg/mL，以As计）标准使用液的制备

用移液器准确吸取A.2中砷甜菜碱标准贮备溶液357.1μL于10mL容量瓶中，用实验室一级水稀释至刻

度，摇匀，于冰箱中保存。

A.4检测技术指标用标准溶液的制备

表A.1砷酸根、亚砷酸根、一甲基砷、二甲基砷混合标准溶液的制备

配制四种混

加入1μg/mL加入1μg/mL加入1μg/mL加入1μg/mL实验室一级水

合溶液的浓

的体积的体积的体积的体积稀释至体积

度As(Ⅲ)As(Ⅴ)MMADMA

mLmLmLmLmL

ng/mL

100.10.10.10.110

200.20.20.20.210

400.40.40.40.410

600.60.60.60.610

800.80.80.80.810

100111110

表A.2砷甜菜碱、砷胆碱、砷酸根、亚砷酸根、一甲基砷、二甲基砷混合梯度标准溶液的制备

配制二种混合溶液的浓度

ng/mL100

加入1μg/mLAsC的体积

mL1

加入1μg/mLAsB的体积

mL1

加入1μg/mLAs(Ⅲ)的体积

mL1

加入1μg/mLAs(Ⅴ)的体积

mL1

加入1μg/mLMMA的体积

mL1

加入1μg/mLDMA的体积

mL1

实验室一级水稀释至体积

mL10

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BB

附录B

（资料性附录）

液相色谱与原子荧光光谱联用仪测试用标准溶液的制备

B.1梯度洗脱程序参考条件见表B.1

表B.1梯度洗脱程序

时间/min

组成

0810202232

流动相

10010000100100

A/%

流动相

0010010000

B/%

_________________________________

10

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前  言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由中华人民共和国科学技术部提出。

本标准由全国仪器分析测试标准化技术委员会（SAC/TC481）归口。

本标准负责起草单位：中国分析测试协会、北京博晖创新生物技术股份有限公司、清华大学、中国

农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、北京海光仪器有限公司、北京普析通用仪器有限责任

公司。

本标准主要起草人：

I

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液相色谱与原子荧光光谱联用仪性能测试方法

1范围

本标准规定了液相色谱与原子荧光光谱联用仪性能测定的方法。

本标准适用于液相色谱与原子荧光光谱联用仪性能的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T13966分析仪器术语

GB/T21191原子荧光光谱仪

GB/T26792高效液相色谱仪

3术语与定义

GB/T13966界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1

基线稳定性baselinestability

仪器在30min内基线的漂移及噪声。

3.2

最小检测量minimumdetection

表征仪器的最大检测能力。

3.3

稳定性stability

在规定的条件下计量仪器保持其计量特性恒定(不随时间而变化)的能力。这里特指对特定溶液每间

隔10min进行一次测试，连续测试次数大于11次的稳定性，用相对标准偏差来表示。

4试剂和材料

4.1盐酸（优级纯）HCl。

4.2硝酸（优级纯）HNO3。

4.3甲醇（色谱纯）CH3OH。

1

GB/TXXXXX—XXXX

4.4氢氧化钾（分析纯）KOH。

4.5硼氢化钾（纯度不小于95g/100g）KBH4。

4.6磷酸二氢铵（分析纯）NH4H2PO4。

4.7氨水（分析纯）NH3•H2O。

4.8水：符合GB/T6682的规定的实验室一级水。

4.9试验用各种元素的标准储备溶液，均使用有证的一级标准物质进行逐级稀释。砷酸根(As(Ⅴ))、亚

砷酸根(As(Ⅲ))、一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)、砷甜菜碱(AsB)、砷胆碱(AsC),制备方法见附录A。

4.10氩气（纯度不小于99.99%）。

4.11经计量检定合格的容量瓶、移液管、移液器、烧杯、称量瓶等。

4.12载流：盐酸溶液（5+95）配制方法。

溶液（5+95）的配制(V/V)：取50mL浓盐酸加入到已有适量水的1000mL的容量瓶中，加水至刻度。

摇匀盐酸备用。

4.13还原剂：20g/L硼氢化钾溶液配制方法。

20g/L硼氢化钾溶液的配制：称取5g氢氧化钾溶于约200mL水，加入20g硼氢化钾并使之溶解，用水

稀释至1000mL，摇匀，用时现配。

4.14流动相：磷酸二氢铵溶液配制方法。

4.14.1等度流动相

磷酸二氢铵溶液（15mmol/L）：称取1.7g磷酸二氢铵，溶于1000mL中，以氨水调节pH至6.0，经0.45µm

水系滤膜过滤后，于超声水浴中超声脱气30min。

4.14.2流动相A

磷酸二氢铵溶液（2mmol/L）：称取0.23g磷酸二氢铵，溶于1000mL水中，以氨水调节pH至8.5，经

0.45µm水系滤膜过滤后，于超声水浴中超声脱气30min。

4.14.3流动相B

磷酸二氢铵溶液（60mmol/L）：称取6.90g磷酸二氢铵，溶于1000mL水中，以氨水调节pH至8.0，

经0.45µm水系滤膜过滤后，于超声水浴中超声脱气30min。

5仪器

5.1分析天平，准确度级别为I级，实际标尺分度值不大于0.1mg。

5.2砷（As）原子荧光专用空心阴极灯。

5.3超声波清洗器（功率W≥500W，超声频率（40~130）KHz）。

5.4溶剂过滤器，微孔滤膜（规格水相0.45μm）；真空泵（抽气速率不小于30L/min）。

2

GB/TXXXXX—XXXX

5.5带100μL定量环的进样阀。

5.6阴离子色谱柱或等效柱。

5.7微量进样针或液相自动进样器(进样量大于100μL)。

6条件

6.1仪器工作条件

6.1.1环境温度：（15～30）℃。

6.1.2相对湿度：小于80%。

6.1.3供电电源：交流（220±22）V，频率（50±1）Hz，并有良好接地。

6.1.4室内明亮且无直射光源、整洁、无尘、无腐蚀性气体，有良好的通风装置。

6.1.5无影响仪器使用的振动和电磁干扰。

6.2试验条件

6.2.1在试验前将仪器调整至最佳工作状态并预热30min。

6.2.2设置负高压为（200～500）V。

6.2.3灯工作电流为（20～120）mA。

6.2.4液相泵流量为（0.5～5.0）mL/min。

6.2.5所有性能指标在同一试验条