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文档简介
第46讲微生物的培育技术及应用【课标要求】1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培育物的前提。2.阐明无菌技术是在操作过程中,保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。3.举例说明通过调整培育基的配方可有目的地培育某种微生物。4.概述平板划线法和稀释涂布平板法是试验室中进行微生物分别和纯化的常用方法。5.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。考点一微生物的基本培育技术1.培育基的配制(1)培育基的种类和用途。①含义:人们依据微生物对______________的不同需求,配制出供其___________________________________的养分基质。②③用途:用以培育、分别、__________、保存微生物或______________________。[易错提示]是否含有凝固剂(如琼脂)是区分固体培育基与液体培育基的唯一标准,含凝固剂的为固体培育基。(2)培育基的养分组成。①养分组成:水、无机盐、碳源、____________,此外还须要满足微生物生长对pH、特殊养分物质以及O2的需求。②几种微生物的养分和能量来源。微生物碳源氮源能源蓝细菌__________NHeq\o\al(+,4)、NOeq\o\al(-,3)等光能硝化细菌__________NH3NH3的氧化根瘤菌糖类等有机物________有机物酵母菌糖类、蛋白质等有机物蛋白质等有机物2.无菌技术(1)目的:获得___________________________。(2)关键:防止__________污染。(3)常用方法:__________和__________。(4)无菌技术的主要方法及适用对象。[连一连]提示:b—Ⅰ—⑥b—Ⅱ—①a—Ⅲ—⑤b—Ⅳ—②a—Ⅴ—④a—Ⅵ—③[易错提示]灭菌的效果比消毒要好。活体生物材料、操作者的手等只能消毒,而不能灭菌。3.微生物的纯培育(1)(2)(3)(4)[易错提示]区分培育物、纯培育物、纯培育[答案自填]1.(1)①养分物质生长繁殖②液体③鉴定积累其代谢物(2)①氮源②CO2CO2N22.(1)纯净的微生物培育物(2)杂菌(3)消毒灭菌3.(1)协调湿热灭菌50℃酒精灯火焰(2)单菌落冷却上一次划线的末端第一次的划线[教材命题点思索]1.牛奶的消毒常接受巴氏消毒法或高温瞬时消毒法。与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是________________________________________________。提示:在达到消毒目的的同时,养分物质损失较少2.分别培育酵母菌通常运用____________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“马铃薯蔗糖”)培育基,该培育基应接受________灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培育一段时间后可视察到菌落,菌落的含义是______________________________________________________。提示:马铃薯蔗糖高压蒸汽由单个或少数微生物细胞分裂形成的肉眼可见的、有确定形态结构的子细胞群体3.在试验中,探讨者每隔24h统计一次菌落数目,并选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止________________________________________。提示:因培育时间不足导致遗漏细菌数目[情境命题点思索]4.接受下表配方配制的培育液分别果胶酶产生菌时,该表X处的成分应是________(填“葡萄糖”或“果胶”),不选另一种成分的缘由是_______________________________________________。K2HPO4MgSO4NaNO3FeSO4XH2O0.1g0.5g3g0.01g2g加至1L提示:果胶大多数微生物以葡萄糖作为碳源,不具有选择作用5.下图是接受纯化微生物培育的两种接种方法接种后培育的效果图,请分析并回答下列问题:(1)获得图A效果和图B效果的接种方法分别是什么?(2)某同学在纯化土壤中的细菌时,发觉培育基上的菌落连成了一片,最可能的缘由是什么?应当怎样操作才可避开此种现象?(3)接种操作为什么确定要在火焰旁边进行?提示:(1)获得图A效果的接种方法为稀释涂布平板法,获得图B效果的接种方法为平板划线法。(2)最可能的缘由是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灼烧灭菌。应实行的措施是增大稀释倍数或每次在新区域划线前先将接种环灼烧灭菌。(3)火焰旁边存在无菌区域。1.倒平板的操作步骤2.平板划线法操作步骤(1)主要过程。通过接种环在固体培育基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培育基的表面。经数次划线后培育,可以分别得到单菌落。(2)培育结果。考向1无菌操作技术1.(2024·湖北选择考)灭菌、消毒、无菌操作是生物学试验中常见的操作。下列叙述正确的是()A.动、植物细胞DNA的提取必需在无菌条件下进行B.微生物、动物细胞培育基中需添加确定量的抗生素以防止污染C.为防止蛋白质变性,不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培育基进行灭菌D.可用湿热灭菌法对试验中所运用的微量离心管、细胞培育瓶等进行灭菌解析:选D。动、植物细胞DNA的提取不须要在无菌条件下进行,A项错误;动物细胞培育基中需添加确定量的抗生素以防止污染,保证无菌环境,而微生物的培育基中不能加入抗生素,B项错误;一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培育基进行灭菌,以防止杂菌污染,C项错误;可用湿热灭菌法对试验中所运用的微量离心管、细胞培育瓶等进行灭菌,以防止杂菌污染,D项正确。2.在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避开杂菌的污染。下列关于消毒和灭菌的叙述,错误的是()A.牛奶的消毒常用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法B.水厂供应的自来水通常是经过高锰酸钾消毒的C.用紫外灯对密闭教室消毒前,适量喷洒消毒液可强化消毒效果D.培育基不能放入干热灭菌箱中进行干热灭菌解析:选B。高锰酸钾是强氧化剂,不宜用其对自来水进行消毒,B项错误。考向2平板划线法的接种过程及微生物试验室培育3.(2024·山东烟台高三期末)下图表示探讨人员在试验室中运用的分批培育细菌的方法,下列叙述错误的是()A.尿素分解菌可利用培育基中的尿素是因为能合成脲酶B.在酒精灯火焰旁边打开皿盖,用接种环在培育基表面快速划3~5条平行线,灼烧接种环后再划线C.液体选择培育基通常可用于选择培育,增大目标菌种的浓度D.将锥形瓶放在摇床上振荡培育能提高溶氧量和养料的利用率解析:选B。在酒精灯火焰旁边将培育皿打开一条缝隙,用接种环在培育基表面快速划3~5条平行线,盖上皿盖,灼烧接种环,待其冷却后再划线,B项错误。4.为纯化菌种,在鉴别培育基上划线接种分解尿素的细菌,培育结果如下图所示。下列叙述正确的
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