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文档简介

限时练171.丝瓜果肉中邻苯二酚等酚类物质在多酚氧化酶(PPO)的催化下形成褐色物质,褐色物质在410nm可见光下有较高的吸光值(OD值),且褐色物质越多,OD值越高。已知PPO的最适pH为5.5。科学家用丝瓜果肉的PPO粗提液、邻苯二酚、必需的仪器等探究温度对PPO活性的影响,结果如图。下列说法错误的是(A)A.PPO在35℃和40℃时降低的活化能相同B.测定PPO的最适温度需要在30~40℃范围内设置温度梯度C.应使用pH为5.5的缓冲液分别配制PPO粗提液和邻苯二酚溶液D.丝瓜果肉PPO粗提液可以在低温和pH为5.5的条件下保存解析:PPO在温度为35℃和40℃时酶活性不同,因此,降低的活化能也不同;由于35℃时OD值最高,所以应在30~40℃间设置温度梯度以更精确测定PPO的最适温度;由题可知,多酚氧化酶(PPO)的最适pH为5.5,pH为无关变量,在实验时,应该保持酶在最适pH下反应,因此应使用pH为5.5的缓冲液配制PPO粗提液和邻苯二酚溶液;酶在高温下会失活,要保证多酚氧化酶(PPO)的结构不受破坏,需要在低温下和pH为5.5的条件下保存。2.水稻细胞中的M基因编码的一种毒性蛋白,对雌配子没有影响,但会导致同株水稻一定比例的不含该基因的花粉死亡,通过这种方式来改变后代分离比,使M基因有更多的机会遗传下去。现让基因型为Mm的水稻自交,F1中三种基因型个体的比例为MM∶Mm∶mm=3∶4∶1,F1随机授粉获得F2。下列有关分析错误的是(A)A.F1产生的雌配子与雄配子的比例为3∶1B.由F1的结果推测,亲本水稻产生的含m基因的花粉存活的概率为1/3C.该水稻种群的M基因频率会随着杂交代数的增加而增大D.杂交F2中三种基因型的比例为MM∶Mm∶mm=15∶14∶3解析:F1产生的雌配子远少于雄配子;基因型为Mm的水稻自交,子代中mm=1/8,雌配子正常,说明雌配子中含m基因的概率为1/2,花粉中含m基因的概率为1/4,因此雄配子中M∶m=3∶1,亲本水稻产生的含m基因的花粉存活的概率为1/3;由题干可知,M基因编码的一种毒性蛋白,对雌配子没有影响,同株水稻一定比例的不含该基因的花粉死亡会改变后代分离比,使M基因有更多的机会遗传下去;F1中三种基因型个体的比例为MM∶Mm∶mm=3∶4∶1,F1随机授粉,用配子法计算,基因型MM、Mm、mm都作为母本,则产生的雌配子5/8M、3/8m,基因型MM、Mm、mm都作为父本,Mm产生的含m基因的花粉存活的概率为1/3,则产生的雄配子3/4M、1/4m,杂交子二代中三种基因型的比例为MM∶Mm∶mm=15∶14∶3。3.免疫训练是指原发感染或疫苗接种可诱导宿主的固有免疫细胞(参与非特异性免疫的细胞)产生对二次感染的增强抗性,且可为异源感染提供交叉保护。下列说法正确的是(C)A.免疫训练对特异性免疫没有影响B.免疫训练依赖记忆B细胞和记忆T细胞的参与C.注射卡介苗可能会提高机体对流感病毒的免疫能力D.免疫训练表明非特异性免疫可以转变为特异性免疫解析:由题意可知,吞噬细胞能参与免疫训练,吞噬细胞既参与非特异性免疫,又参与特异性免疫,所以免疫训练对特异性免疫也有影响;免疫训练主要增强非特异性免疫,而记忆细胞参与的是特异性免疫;免疫训练可为异源感染提供交叉保护,所以注射卡介苗可能会提高机体对流感病毒的免疫能力;由题干信息无法得出“免疫训练表明非特异性免疫可以转变为特异性免疫”的结论。4.科学家对一个结构相对简单的天然湖泊的能量流动进行了一年的定量分析,能量流动过程如图所示。下列叙述正确的是(A)A.一年中生产者的凋落物有一部分可能属于未利用的能量B.一年中第二营养级的同化量大部分被自身呼吸作用消耗C.图中12.6J/(cm2·a)的能量都属于第三营养级的能量D.因多数能量未利用,所以无法体现能量流动逐级递减的特点解析:一年中生产者的凋落物有一部分没有被利用,可能属于未利用的能量;一年中第二营养级(植食性动物)的同化量的去向中,未被利用的能量最多;图中肉食性动物可能包括多个营养级,所以12.6J/(cm2·a)的能量不一定都属于第三营养级的能量;虽然大多数能量均未利用,但每一个营养级可利用的能量中总有一部分通过呼吸作用散失,总有一部分流向分解者,剩下的才可能流向下一个营养级(最高营养级除外),故能量逐级递减。5.环状定点诱变技术通过设计特定引物进行PCR,来实现目标载体的单碱基突变,从而生产出满足需求的质粒载体。质粒pUC18中含有限制酶Eam1105Ⅰ(识别序列为5′GACGGGGAGTC3′)和EcoRⅠ的识别序列。为使质粒pUC18不能被限制酶Eam1105Ⅰ识别,但依然具有氨苄青霉素抗性,现对质粒pUC18第1695个碱基(图方框中的碱基)进行诱变,设计了具有诱变位点的引物P1和不具有诱变位点的引物P2。具体操作流程如图所示。(1)为使诱变后的质粒不能被限制酶Eam1105Ⅰ识别,但依然具有氨苄青霉素抗性,选择质粒突变位点时应注意

(2)进行上述PCR反应,缓冲液中需提供pUC18质粒,P1、P2两种引物以及,同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。至少经过个循环,会出现双链均被诱变的线性质粒。扩增得到的线性质粒需在酶的作用下才能连接成环状质粒。

(3)提取连接产物(环化后的质粒),经过EcoRⅠ,Eam1105Ⅰ双酶切,然后进行电泳,可根据结果判断质粒pUC18的第1695个碱基诱变是否成功,判断的理由是

解析:(1)为使诱变后的质粒不能被限制酶Eam1105Ⅰ识别,但依然具有氨苄青霉素抗性,也就是说需要破坏质粒上限制酶Eam1105Ⅰ的识别序列,同时不影响氨苄青霉素抗性基因的正常表达,因此在选择质粒突变位点时应注意诱变的位点位于限制酶Eam1105Ⅰ识别序列中,诱变后编码的氨基酸不变或不影响氨苄青霉素抗性基因的正常表达。(2)PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,利用的原理是DNA复制,需要条件有模板DNA(pUC18质粒)、四种脱氧核苷酸、一对引物(P1、P2两种引物)、TaqDNA聚合酶,同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。DNA的复制方式为半保留复制,经过第一次复制,会出现一条链被诱变的线性质粒,经过第二次复制,会出现双链均被诱变的线性质粒,因此至少经过2个循环,会出现双链均被诱变的线性质粒。扩增得到的线性质粒为平末端,需要经过T4DNA连接酶的作用才能连接成环状质粒。(3)质粒pUC18的第1695个碱基诱变成功,则限制酶Eam1105Ⅰ的识别位点被破坏,经过EcoRⅠ、Eam1105Ⅰ双酶切,然后进行电泳,电泳图谱中只有1条条带;质粒pUC18的第1695个碱基未诱变成功,则限制酶Eam1105Ⅰ的识别位点没有被破坏,经过EcoR

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