土壤铵态氮的测定

第第页土壤铵态氮的测定土壤铵态氮的测定4.4.3.12mol·L—1KCl浸提—蒸馏法4.4.3.1.1方法原理用2mol·L—1KCl浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。取一份浸出液在半微量定氮蒸馏器中加MgO（MgO是弱碱，有防止浸出液中酰铵有机氮水解的可能）蒸馏。蒸出的氨以H3BO3汲取，用标准酸溶液滴定，计算土壤中的NH4+—N含量。4.4.3.1.2重要仪器振荡器、半微量定氮蒸馏器、半微量滴定管（5mL）。4.4.3.1.3试剂（1）20g·L—1硼酸—指示剂。20gH3BO3（化学纯）溶于1L水中，每升H3BO3溶液中加入甲基红—溴甲酚绿混合指示剂5mL并用稀酸或稀碱调整至微紫红色，此时该溶液的pH为4.8、指示剂用前与硼酸混合，此试剂宜现配，不宜久放。（2）0.005mol·L—11/2H2SO4标准液。量取H2SO4（化学纯）2.83mL，加蒸馏水稀释至5000mL，然后用标准碱或硼酸标定之，此为0.0200mol·L—1（1/2H2SO4）标准溶液，再将此标准液精准地稀释4倍，即得0.005mol·L—11/2H2SO4标准液（注1）。（3）2mol·L—1KCl溶液称KCl（化学纯）14901g溶解于1L水中。（4）120g·L–1MgO悬浊液MgO12g经500～600℃灼烧2h，冷却，放入100mL水中摇匀。4.4.3.1.4操作步骤取新鲜土样10.0g（注2），放入100mL三角瓶中，加入2mol·L—1KCl溶液50.0mL。用橡皮塞塞紧，振荡30min，立刻过滤于50mL三角瓶中（假如土壤NH4+—N含量低，可将液土比改为2.5:1）。吸取滤液25.0mL（含NH4+—N25µg以上）放入半微量定氮蒸馏器中，用少量水冲洗，先把盛有20g·L–1硼酸溶液5mL的三角瓶放在冷凝管下，然后再加120g·L–1MgO悬浊液10mL于蒸馏室蒸馏，待蒸出液达30～40mL时（约10min）停止蒸馏，用少量水冲洗冷凝管，取下三角瓶，用0.005mol·L—11/2H2SO4标准液滴至紫红色为尽头，同时做空白试验。4.4.3.1.5结果计算土壤中铵态氮NH4+—（N）含量（mg·kg—1）=式中：c——0.005mol·L—11/2H2SO4标准溶液浓度；V——样品滴定硫酸标准溶液体积（mL）；V0——空白滴定硫酸标准溶液体积（mL）；14.0——氮的原子摩尔质量（g·mol—1）；ts——分取倍数；103——“换算系数”（包括mL换算为L，10—3；g换算为mg，103；换算为kg，103）；m——烘干样品质量（g）。4.4.3.22mol·L—1KCl浸提—靛酚蓝比色法4.4.3.2.1方法原理2mol·L—1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。在含氮0.05～0.5mol·L—1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。4.4.3.2.2试剂（1）2mol·L—1KCl溶液称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯）溶于水中，稀释至1L。（2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH，化学纯）10g和硝基铁氰化钠[Na2Fe（CN）5NO2H2O]100mg稀释至1L。此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。（3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O,化学纯）7.06g、磷酸钠（Na3PO4·12H2O,化学纯）31.8g和52.5g·L—1次氯酸钠（NaOCl，化学纯，即含5%有效氯的漂白粉溶液）10mL溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。（4）掩蔽剂将400g·L—1的酒石酸钾钠（KNaC4H4O6·4H2O,化学纯）与100g·L—1的EDTA二钠盐溶液等体积混合。每100mL混合液中加入10mol·L—1氢氧化钠0.5mL。（5）2.5µg·mL–1铵态氮（NH4+—N）标准溶液称取干燥的硫酸铵[（NH4）2SO4，分析纯]0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制备成含铵态氮（N）100µg·mL–1的贮存溶液；使用前将其加水稀释40倍，即配制成含铵态氮（N）2.5µg·mL–1的标准溶液备用。4.4.3.2.3仪器与设备往复式振荡机、分光光度计。4.4.3.2.4分析步骤（1）浸提称取相当于20.00g干土的新鲜土样（若是风干土，过10号筛）精准到0.01g，置于200mL三角瓶中，加入氯化钾溶液100mL，塞紧塞子，在振荡机上振荡1h。取出静置，待土壤—氯化钾悬浊液澄清后，吸取肯定量上层清液进行分析。假如不能在24h内进行，用滤纸过滤悬浊液，将滤液储存在冰箱中备用。（2）比色吸取土壤浸出液2mL～10mL（含NH4+—N2µg～25µg）放入50mL容量瓶中，用氯化钾溶液补充至10mL，然后加入苯酚溶液5mL和次氯酸钠碱性溶液5mL，摇匀。在20℃左右的室温下放置1h后（注1），加掩蔽剂1mL以溶解可能产生的沉淀物，然后用水定容至刻度。用1cm比色槽在625nm波优点（或红色滤光片）进行比色，读取吸光度。（3）工作曲线分别吸取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mLNH4+—N标准液于50mL容量瓶中，各加10mL氯化钠溶液，同（2）步骤进行比色测定。4.4.3.2.5结果计算土壤中NH4+—（N）含量（mg·kg—1）=式中：ρ——显色液铵