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15I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件归口单位：内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC11奶绵羊胚胎冷冻解冻技术规程3.13.23.3又称诱发结晶，是指在略低于溶液冰点的温度下通过加3.4将处于冷冻状态的胚胎进行解冻处理，以恢复胚胎发育能力的过程。25.2胚胎冷冻所需溶液5.3胚胎操作室要求温度在20℃~25℃之间，操作前使用紫外灯消毒20min～30min，胚胎操作区域用75%酒精擦拭张囊胚期（EXB）的A（1）、B（2）级胚胎（附录A图A.5.5胚胎的洗涤与平衡5.5.1方法一乙二醇冷冻液冷冻胚胎5.5.2方法二甘油冷冻液一步法胚胎冷冻胚胎冷冻前用保存液洗涤5次～6次；洗涤后的胚胎放入5.5.3方法三甘油冷冻液三步法胚胎冷冻5.6胚胎装管5.7胚胎记录3X表示数量，EM/CM/EB/BL/EXB表示发育期，下标1/2表示A/B级胚胎级别。如2CM1代表2枚A级紧冰1s～3s，继续平衡5min，然后以-0.3～-0.5℃/min的速率降温至-35℃,平衡10min，取出胚胎冷冻细管，迅速投入液氮罐中保存。同时详细记录胚胎信息，胚胎冷冻信息登记表见附录C表C.6.2胚胎解冻所需溶液6.3胚胎操作室要求6.4解冻程序解冻时，从液氮罐中取出细管在空气中停留10s～15s后，浸入28℃~32℃水浴中20s，然后将胚胎冷冻细管用灭菌吸水纸擦干，用75%酒精棉球擦拭细管，晾干15s～20s，剪去封口端，把胚胎推解冻时，从液氮罐中取出细管在空气中停留10s～15s后，浸入25℃~32℃水浴中20s，然后将胚胎冷冻细管用灭菌吸水纸擦干，用75%酒精棉球擦拭细管，晾干15s～20s，剪去封口端，把胚胎推在记录本上详细记录胚胎信息，解冻胚胎信息登记表按照附录C中的表C.4按NY/T1674执行。解冻后胚胎形态等级信息登记表见附5A.1不同发育时期早期胚胎见图A.1。d：囊胚（blastocyst，BL）；e：扩注：a：桑椹胚（morula，M）；b：紧缩桑椹胚（compacted注：a：C

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