药理学实验理论内容

药理学实验理论内容

实验基本要求.......................................................5

实验基本知识.......................................................6

实验设计基本原则................................................6

随机........................................................6

对照........................................................6

重复........................................................7

分组设计方法....................................................7

单纯随机设计................................................7

简化分层随机设计............................................8

配对随机设计................................................8

常用剂量换算....................................................9

种属间按公斤体重折算........................................9

种属间按体表面积折算........................................9

浓度剂量和体积的换算.......................................10

摩尔浓度和百分比浓度的换算.................................11

实验动物标记...................................................11

剪指法.....................................................11

耳朵带上标号的耳环..........................................11

黄色的苦味酸溶液进行标记...................................11

新药及分类.....................................................12

新药概念...................................................12

新药分类...................................................12

新药来源.......................................................12

天然产物...................................................12

人工合成...................................................12

半人工合成和结构改造.......................................13

生物制剂...................................................13

临床前药理学评价...............................................13

药效学.....................................................13

药代动力学.................................................13

毒理学.....................................................13

动物实验要求...............................................14

临床药理学评价.................................................14

I期........................................................14

II期.......................................................14

III期......................................................14

IV期......................................................15

实验设计.......................................................15

证明一个药物经过肝脏代谢起效...............................15

证明P受体阻断剂有内在拟交感活性...........................15

设计实验证明一个药有去甲肾上腺素神经末梢的作用.............15

证明ASP阿司匹林和CPZ氯丙嗪降低体温作用...................16

录像16

实验动物的捉拿和固定，性别鉴定，注射及处死.....................16

糖皮质激素.....................................................17

激素调节...................................................17

生理作用...................................................17

药理作用...................................................17

作用机制...................................................18

临床应用...................................................18

不良反应...................................................18

下丘脑-垂体一肾上腺昼夜节律.................................18

其他.......................................................19

抗震颤麻痹药药理与临床.........................................19

作用于中枢神经系统(CNS)的药物..................................20

实验课............................................................21

实验(I)：ED5。的测定............................................21

ED50、LD50概念，意义，试反应..............................21

点斜法测定ED50时对实验设计的要求：........................21

实验(II)：磺胺药的药代动力学...................................22

药代动力学参数的测定：......................................22

开放性房室模型.............................................22

磺胺嚏咤的测定原理：.......................................23

实验(III):新斯的明对肌松药物的影响............................23

传出神经系统...............................................23

琥珀酰胆碱、筒箭毒碱的作用原理以及能否被新斯的明解救.......24

实验（IV）:小鼠肝细胞色素P-450的含量测定及药物影响............24

肝药酶的特点：.............................................24

小鼠肝脏cytP450测定的实验原理..............................24

实验（V）:传出神经系统药物对血压和血流动力学的影响............25

传出神经系统药物...........................................25

心功能的几个影响因素.......................................25

实验基本要求

1.指导老师：刘晓岩两所楼607liuyan@

2.共八次课，1次绪论+2次理论课+5次实验

3.实验报告：周一上课统一收，不用写预习报告，但要预习==,熟悉实验步骤

每组一份原始记录

4.考试：结课笔试40%+平时60%（5次实验*10分+考勤提问等10分）

笔试内容：两次理论课，每节课前的实验理论内容，实验过程中可能遇到的问题

2次缺勤不能参加考试

5.实验报告要求（重点）

•题目（英文）日期室温试验人合作人

•目的如书中所给

•动物（或标本）名称种系性别（雄S/MB9/F）体重（g/kg）

•药品和试剂名称浓度

•器材不用细写如直接写手术器械不用一一列举，测定用仪器写名称型号

厂家

•实验方法步骤简写不要抄书简明扼要标号1,2,3或单箭头——>——>

——>

•结果要求1准确2要有原始记录，一组一份，不能涂改，可以划线3图表

4计算公式（主要公式的省略推导计算过程）5结果有语言描述

图：机打图题目（英文）操作者日期参量给药部位所做操作

手绘图题目（英文）

表：三线表题目（英文）项目（英文）

•讨论实验目的是否达到正面分析结果实验失败原因误差来源等讨论里

面不要写注意事项

•结论简明一句话最多两句话

实验基本知识

实验设计基本原则

随机

目的

减少个体差异，使样本的个体差异平均分配到各组；消除或减少实验者的主观因

素产生的误差

对照

目的

鉴别处理因素与非处理因素之间的差异，以及消除或减少实验无关因素的影响或

、0-\z.

I天差

原则

齐同可比（同时同地同条件）

类型

自身对照给药前后

组间对照a阴性对照组（空白对照）不给药不处理。b阳性对照组（标准品对

照）市面销售药品

重复

目的

降低以个体差异为主的各种实验误差

样本大小的估计原则

在保证正确可信的情况下确定最少的例数

样本大小

大、小鼠210只，兔28只，犬25只

小鼠10-15大型动物个体变异小猴等8-10

分组设计方法

单纯随机设计

2.随机分组的方法

①单纯随机设计（样本量大）9774246762428114

1676022766565026

奇偶分两组除k取余法1256859926969668

5559563564385482

1622779439495443

8442175331572455

一组：6301637859169555

3321123429786456

二组：

5760863244094727

If：H07

9246441716

26|62|38

9775841607

随机数字表

15

简化分层随机设计

②简化分层随机（样本量少）

按体重编号

一组二组三组

123

654

789

配对随机设计

③配对随机设计（针对两组）

配成对子的两个试验单位的初始条件尽量一致，不同对子间试验单位的初始条件允

随机数字表

常用剂量换算

种属间按公斤体重折算

动物与人体的每公斤体重剂量折算系数表

3.药物剂量换算A种动物或成人

折算系数w—天庆—ra冤看美成无

①种属间换算0.02kq0.2kq0.4kq1.5kq2kq12ka60kq

B小也0g1.01.61.62.73.24.89.01

种大鼠0.2kg0.71.01.141.882.33.6(^25,

按公斤体重换算：动

•豚卸）.4kg0.610.871.01.652.053.05.55

物

兔1.5kg0.370.520.61.01.231.762.30

已知A种动物每kg体重用药剂量,欲估或

猫2.0kg0.300.420.480.811.01.442.70

成

算B种动物每kg体重用药剂量时，可先查表犬12kg0.210.280.340.56.0681.01.88

人

60kg0.110.160.180.3040.3710.5311.0

找出折算系数（W）,再按下式计算：

B种动物的剂量（mg/kg）=WxA种动物的剂量Cmg/kg）

例：已知某药的60kg成人的用量是300mg,需折算出大鼠的剂量？220g大鼠用量？

大鼠剂量=6.25x—Qmg=31.25mg/kg

60kg

31.25mg/kgx0.22kg=6.875mg

18

种属间按体表面积折算

动物与人体表面积比值表

B种动物或成人

折算系数w一天福一禄丽冤看is美菰］

0.02kq0.2kq0.4kq1,5kq2kq4.0kq12kq60kq

•按体表面积换算：A小a20g1.07.012.2527.829.764.1Q24j>387.9

大鼠

种0.2kg0.141.01.743.94.29.217.856

已知A种动物每kg体重用药剂量,欲动豚鼠0.4kg0.080.571.02.252.45.210.231.5

物兔1.5kg0.040.250.441.01.082.44.514.2

估算B种动物每kg体重用药剂量时，可先或猫2.0kg0.030.230.410.921.02.24.113.0

成猴4.0kg0.0160.110.190.420.451.01.96.1

查表找出折算系数（W）,再按下式计算:人犬12kg0.0080.060.100.220.230.521.03.1

fi£A60kq0.00260.0180.0310.070.0780.16

A种动物的体重（kg）

B种动物的剂量（mg/kg）=WxA种动物的剂量（mg/kg）x

B种动物的体重（kg）

例：某药小鼠的剂量是80mg/kg,换算成狗的用药剂量？

狗的剂量=124.2x80mg/kgx姆里

=16.56mg/kg

12kg

18

浓度剂量和体积的换算

②药物浓度、剂量、给药体积的换算

单位：

浓度(C):百分比浓度(%,g/100ml),摩尔浓度(M,mol/L)

剂量(D):mg/kg

给药体积(V):ml/kg

D(mg/kg)=C(mg/ml)xV(ml/kg)

18

•已知浓度、动物体重、给药剂量，求给药体积

例：小鼠体重25g,ip0.1%盐酸吗啡，给药剂量10mg/kg,求给药体积？

10mg/kg

v=?=10ml/kg

C1mg/ml

lOml/kgx0.025kg=0.25ml

例：家兔静脉注射3%戊巴比妥钠，剂量是30mg/kg,求给药体积？体重为

L9kg的家兔给药体积是多少ml?

D_30mg/kg

=Iml/kg

C30mg/ml

1ml/kgx1.9kg=1.9ml

18

•已知给药剂量，给药体积，求浓度-换算成百分比浓度

例：大鼠静脉注射普蔡洛尔，给药剂量是0.2mg/kg,给药体积是lml/100g,

求配制普奈洛尔的浓度(百分比浓度)？

C=—=°?mg/kg.=002mg/ml=0,002%

V1ml/100g

例：家兔静脉注射酚妥拉明，给药剂量是lmg/kg,给药体积是0.2ml/kg,

求配制酚妥拉明的浓度(百分比浓度)？

D1mg/kg...

C=—=-----=5mg/ml=0n.5c%0

V0.2ml/kg

18

摩尔浓度和百分比浓度的换算

•摩尔浓度与百分比浓度的换算

mol10x

x%=型——=—mol/L(M)

0.1Lw

例：20mmol/L某药MW=351,求百分比浓度？

X%=M*°702%

18

实验动物标记

剪指法

耳朵带上标号的耳环

黄色的苦味酸溶液进行标记

与蛋白质产生牢固结合

没有0

多位数的标记方法：组合标记，前一位数字小于后一位数字（89之后是123）

新药及分类

新药概念

首次在国内上市销售的药品。对已上市的药品改变剂型、改变给药途径、增加新

适应症的药品，亦按新药管理，注册按新药申请的程序申报

新药分类

中药、天然药物；化学药品；生物制品

新药来源

天然产物

人工合成

具有天然结构；全新结构

半人工合成和结构改造

生物制剂

临床前药理学评价

药效学

主要药效学

评价药物的主要药效作用

一般药效学

评价药物主要药效学以外的广泛药理作用

研究药物对神经系统；心血管系统；呼吸系统等的影响

①全面了解药物的药理作用。②补充一般毒性的不足。③新用途的发现。

药代动力学

①药代动力学参数，②药物在体内的分布情况，③排泄情况

毒理学

一般毒理

①急性毒性

给药：单次大剂量或24h内多次给药

以死亡为指标，LD50

②长期毒性

给药期：疗程的三倍量；

给药剂量：最少三种剂量。高剂量有明显毒性作用，死亡率小于20%，・低剂量高

于药物的有效剂量，但是不引起毒性；中剂量在之间。

特殊毒性

三致（致癌，致畸，致突变），致敏，依赖性

动物实验要求

L种属：2-3种动物，至少一种是非啮齿动物（犬，猴等）

2.要包括整体实验，离体实验

3.剂量：至少3种，高中低

4.给药途径：至少两种，其中一种与临床拟用途径一致

5.采用多种动物模型

临床药理学评价

I期

30人左右的健康成年人

主要评估药物在健康人体内的安全性，同时兼顾一些药动学的评估，确定安全给

药途径、给药剂量。

II期

应用于少量患者，100人左右，

初步确定药效，并确定药物对患者的安全性。

实验设计中注意双盲原则

III期

应用于大量患者，一般超过300人

进行治疗作用的确证，长期服药的不良反应。

试生产，完成临床川期后的药物可以上市

IV期

临床，病例数大

长期不良反应，罕见不良反应

实验设计

证明一个药物经过肝脏代谢起效

②药物先经过肝脏灌流/未经过肝脏灌流

③作用于实验性肝损伤的动物

④有疗效/无疗效

证明B受体阻断剂有内在拟交感活性

（某些B-受体阻滞药对B1-受体或B2-受体或二者均具有部分激动作用，激动效

果弱，和激动剂合用显示出阻断效果）比如口即朵洛尔有，普蔡洛尔无。

①注射利血平，抑制去甲肾上腺素重摄取，耗竭去甲肾上腺素

②注射B受体阻断剂

若心率T血压T,则有内在拟交感活性，否则无内在拟交感活性

设计实验证明一个药有去甲肾上腺素神经末梢的作用

方法一

①注射去甲肾上腺素血压BPT

②注射未知药NA耗竭，注射NABPTT

方法二

3H-氨酸，放射性降低

证明ASP阿司匹林和CPZ氯丙嗪降低体温作用

ASP不影响正常体温，不受环境因素影响

CPZ抑制体温调节中枢，对各种体温有影响，受环境因素影响

环境温度ASPCPZ

正常动物高一t

中——

低一1

病理性动物高

中

低

录像

实验动物的捉拿和固定，性别鉴定，注射及处死

可参考实验教程相关内容。

录像内涉及的内容包括小鼠、大鼠、家兔、猫、犬、猴子、蟾蛛的捉拿、固

定、性别鉴定、注射与实验动物处死等。

在我们实验中用到的操作考察的可能性会大一些，如小鼠、大鼠、家兔的捉

拿、固定和性别固定，颈椎脱臼法、断头法处死小鼠和空气栓塞法处死家兔，腹

腔注射，耳缘静脉注射等。

糖皮质激素

激素调节

促皮质素释放激素(CRH)和促肾上腺素皮质激素(ACTH),糖皮质激素对下丘

脑有负反馈抑制，分为短反馈与长反馈(调节通路与甲状腺素类似)。

生理作用

调节代谢

促进糖异生，升高血糖，促进糖原合成，促进脂肪代谢，生成ATP,保钠排钾

参与应激反应

药理作用

(i)抗炎作用：急性炎症用甲醛建立病理模型，慢性炎症用消毒棉球建立；

(ii)免疫抑制作用：治疗量时抑制细胞免疫(检测指标:

巨噬细胞、迟发型超敏反应的反应程度)，大剂量时还能抑制体液免疫；

(iii)抗毒素作用：可以耐受致死剂量的细胞外毒素；

(iv)抗休克作用：病理模型是静脉注射内毒素导致血压下

降而继发休克；

(v)对血系统：使红细胞、血红蛋白、血小板、纤维蛋白

原、中性粒细胞(但会抑制其功能)数量增加，淋巴细胞数量减少。

(vi)中枢兴奋作用：有欣快、抗抑郁作用。大量使用可能

有失眠、磨病、精神分裂的副作用。

作用机制

与受体结合产生活性，可以被蛋白质受体抑制剂阻断。可能有允许作用(即

不直接作用于靶点，而对另一种激素起支持作用)，分子机制待阐明；

临床应用

(i)肾上腺皮质功能异常：如Addison氏病；

(ii)自身免疫性疾病：如类风湿、重症肌无力；

(iii)变态反应性疾病：如支气管哮喘、过敏性紫瘢、输

血反应；

(iv)严重感染与重要部位炎症；

(v)血液系统疾病：如急性淋巴性白血病、淋巴瘤；

(vi)严重休克：须突击使用，及时停用。

(vii)局部应用：消炎、平喘(需要有11-0H的皮质类药

物才有此项功效)

不良反应

(i)医源性肾上腺皮质功能亢进(Cushing氏病)；

(ii)诱发和加重感染；

(iii)诱发和加重溃疡；

(iv)医源性肾上腺皮质功能障碍(功能不全)故应用糖皮

质激素时不应突然停药，应逐渐减量

(v)其他：如中枢兴奋、升高眼压(诱发白内障)

下丘脑-垂体-肾上腺昼夜节律

早上8点时体内糖皮质激素水平达到最高，此时给药可以最大程度地减轻负

反馈抑制，从而避免医源性肾上腺皮质功能障碍；

其他

如糖皮质激素的隔日疗法(同样是为了避免源性肾上腺皮质功能障碍)。

抗震颤麻痹药药理与临床

(参考教材P151)

a、注意区别帕金森氏病与帕金森氏综合征。此处特指帕金森氏病。

b、临床症状：肌肉震颤、僵硬，运动困难、面容呆板，静止时震颤

加重；

c、病理与生化：与黑质-纹状体-多巴胺通路有关

病理条件下黑质神经元细胞异常减少，间质细胞增

多，生化层面上纹状体内多巴胺合成酶数量减少。

d、药物治疗：分为拟多巴胺类、单胺氧化酶B(MAO-B)抑制剂和中枢

抗胆碱药物：

(i)增加多巴胺(DA)功能：左旋多巴、金刚烷胺、漠隐平；

(ii)左旋多巴增效药：卡比多巴；

(iii)MAO-B抑制剂:司来吉兰；

(iv)中枢抗胆碱药：苯海索。

e、左旋多巴与卡比多巴的作用原理

左旋多巴通过多巴脱竣酶转化为多巴胺而起效；

卡比多巴是外周多巴脱竣酶的抑制剂，从而使进入中枢的左旋多

巴数量增加。卡比多巴与左旋多巴复合片为心宁美，比例为1:10。

f、临床疗效与不良反应

临床疗效用于抗帕金森病……

不良反应包括胃肠道反应、心血管反应、不自主运动、精神障碍

和“开-关现象”等

g、实验动物模型：(参考教材P162)

(i)雄性小鼠腹腔注射卡敏；

(ii)小鼠脑内纹状体注射6-羟多巴胺(旋转模型)；

(iii)猴子慢性注射MPTP,可以选择性地破坏多巴胺受体。

作用于中枢神经系统(CNS)的药物

(这里好像没记全。。)

a、精神分裂症：

(i)临床症状：思维异常、幻觉、喜怒无常；

(ii)实验动物模型：电刺激激怒小鼠攻击；

(iii)常用药物：氯丙嗪；

b、抑郁症：

(i)临床症状：情感紊乱、情绪低落、抑郁；

(ii)实验动物模型：行为绝望实验(小鼠强迫性游泳)、小鼠悬尾法；

c、震颤麻痹(见上面的帕金森氏病)

d、学习与记忆

实验动物模型：利用光、电等建立啮齿类动物的条件反射

e、中枢镇痛药

实验动物模型：辐射热照射甩尾法

实验课

实验⑴：ED5。的测定

概念：量反应、质反应、ED50、LD50、治疗指数

熟悉：量效曲线的特点，量反应与质反应在普通坐标与半对数坐标下的量效

曲线

ED50、LD50概念，意义，试反应

能使群体中有半数个体出现某一效应的剂量，称为半数效应量，若此效应为

有效，则为半数有效量ED50,若此效应为死亡，则为半数致死量LD50

意义：可以评价药物的疗效和安全性，治疗指数TI=LD50/ED50,该值越大

越好，说明药物越安全。

试反应：进行预实验，是为了确定给药剂量的Dmax与Dmin（使其符合11

中的E）

量效曲线（效应-剂量的曲线为长尾的S型；效应-1g剂量的曲线为对称的S

型；累加频率-剂量的曲线为长尾的S型；累加频率-1g剂量的曲线为对称的S

型）

点斜法测定ED50时对实验设计的要求：

A动物以5〜8组为宜；

B每组动物数须一致；

C各组给药剂量应为等比数列；

D各组给药剂量的公比r=l.l~1.6；

E最大剂量（Dmax）组的阳性反应率须280%,最小剂量（Dmin）组的阳性反应率

须W20%。

实验（II）：磺胺药的药代动力学

概念：药代动力学、房室模型

注意：一室模型与二室模型，一级动力学与零级动力学的特点与区别

熟悉：药代动力学参数的测定方法

药代动力学参数的测定：

测定方法—1）制备时量曲线：A单次静脉注射；8于不同时间点取动脉血

测定血药浓度；C绘制时量曲线。

2）建立房室模型，写出数学表达式；计算机进行曲线拟合，

得到表达式的各因数。

3）计算机进行参数检验。

开放性房室模型

A、有一个中央室，一个或多个周边室；

B、药物首先由中央室进入，有中央室向周边室分布，最后从中央室消除；

C、药物在中央室的消除是一级动力学过程；

一级动力学过程（定比消除）和零级动力学（定量消除）比较：*

（速率方程、C-t图形、半衰期等角度比较）

房室模型曲线图；

一室模型、二室模型的比较

磺胺喀碇的测定原理：

磺胺类药物能与某些试剂发生反应生成有色物质，通过比色可以对其血药浓

度进行定量检测。酸性环境下，磺胺类药物苯环上的氨基离子化生成镂类化合物,

与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成重氮盐。这种化合物在525nm波长下比色，

其光密度与磺胺类药物的浓度成正比。

实验（III）：新斯的明对肌松药物的影响

传出神经系统

1、传出神经系统分为运动神经系统与植物神经系统，其中植物神经系统分

为交感神经系统与副交感神经系统。

2、传出神经按照神经末梢释放的递质不同，可分为胆碱能神经和肾上腺素

能神经，分别对应的神经递质是乙酰胆碱（ACh）和去甲肾上腺素（NA）。

3、胆碱受体可分为M亚型与N亚型。其中N亚型包括M与M两种，M

主要分布在神经节细胞上，M主要分布在骨骼肌细胞上。

4、乙酰胆碱酯酶（AChE）是体内水解ACh所必须的酶，具有选择性水解的作

用（属于特异性酶，这是与肝药酶的区别）。新斯的明的作用机理是它是AChE

的抑制剂，从而表现出拟胆碱作用，但其作用依赖于内源性ACh的释放。

5、肌松药的作用机理分为去极化与非去极化两种。去极化药（琥珀酰胆碱）

能使突触后膜持续去极化而丧失对ACh的反应活性；非去极化药（筒箭毒碱）

是N2受体的拮抗剂，其肌松作用可以被新斯的明解救。

6、其他相关内容如突触前膜受体和反馈性调节，受体的组织