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文档简介
作业55动物细胞的培育A组基础达标1.动物细胞培育是动物细胞工程的基础。下列关于动物细胞培育的叙述,错误的是()A.液体培育基中的动物血清需过滤除菌B.定期更换培育液可以防止细胞代谢产生有毒物质危害细胞C.在二氧化碳培育箱中进行原代培育和传代培育D.动物细胞培育体现了动物细胞核的全能性2.(2024浙江新力气联盟)下列关于动物细胞培育的叙述,正确的是()A.胰蛋白酶能消化细胞内的胶原纤维和其他成分,获得细胞悬液B.细胞进行一次传代培育所需时间等于一个细胞周期的时间C.培育基中添加胎牛血清有助于提高动物细胞克隆形成率D.动物细胞只能贴壁生长,不能进行悬浮培育3.动物细胞培育是动物细胞工程的基础,科研人员将数量相等的动物肝脏肿瘤细胞和肝脏正常细胞分别置于相同培育液中培育。下列有关叙述正确的是()A.在培育过程中通常要通入5%的CO2刺激细胞呼吸B.细胞培育液中通常含有维生素、激素、糖等多种能源物质C.定期更换培育液可以防止代谢产物的积累对细胞造成危害D.为了防止细菌污染,可向培育液中加入适量的干扰素4.一般来说,动物细胞体外培育须要满意以下哪些条件?()①无毒的环境②无菌的环境③合成培育基需加血清④温度与动物体温相近⑤须要O2,不须要CO2⑥CO2能调整培育液pHA.①②③④⑤⑥B.①②③④C.①③④⑤⑥ D.①②③④⑥5.如图为动物成纤维细胞的培育过程示意图。下列叙述正确的是()A.步骤①的操作不须要在无菌环境中进行B.步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分别C.步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理D.步骤④培育过程中不会发生细胞转化6.如图为动物细胞培育过程中细胞增殖状况的变更曲线,图中B、D两点表示经筛选、分装后接着培育。下列推断正确的是()A.细胞培育过程中应通入95%的O2和5%的CO2B.细胞在培育过程中都会出现接触抑制的现象C.原代培育和传代培育的分界点是曲线中B点D.制备单克隆抗体应选择B点后的细胞与B淋巴细胞融合7.动物细胞培育就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在相宜的培育基和环境条件中,让这些细胞生长和增殖。下列关于动物细胞培育条件的设置,不合理的是()A.培育基中除含有细胞所需的各种养分成特殊,还需添加抗生素和琼脂B.对培育动物细胞所用的培育液和培育用具等,须要进行相应灭菌处理C.细胞培育时通常接受培育皿或松盖培育瓶,以保证细胞对气体的需求D.培育基中常需加入血清等自然物质,因为其中含有细胞生长所必需的物质8.某探讨小组为测定某药物对体外培育细胞的毒性,打算对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培育。下列说法不正确的是()A.对配制好的动物细胞培育液需进行高压蒸汽灭菌处理B.乙细胞在原代培育过程中,最终会出现停止增殖的现象C.甲细胞连续培育下去可获得连续细胞系D.将数量相等的甲、乙细胞分别置于相同且相宜的条件下培育,一段时间后,会视察到甲细胞的数量比乙细胞多9.下列关于动物细胞培育的说法,错误的是()A.若干脆取组织块进行组织培育,仅少量细胞可以生存和繁殖,为了获得大量生长良好的细胞,须把组织细胞分散开B.连续细胞系中的细胞丢失了接触抑制C.细胞株一般具有恒定的染色体组型、病毒敏感性或者抗性等,基因型一样D.动物细胞培育须要用到二氧化碳培育箱,目的之一是使培育基中的pH处于平衡状态,同时相宜O2浓度可以保证细胞需氧呼吸B组素能培优10.试验小鼠皮肤细胞培育的基本过程如图所示。下列叙述错误的是()试验小鼠皮肤组织皮肤细胞悬液细胞群体1细胞群体2A.甲过程须要对试验小鼠进行消毒B.乙过程须要用胰蛋白酶等处理皮肤组织,使细胞分散开C.丙过程表示原代培育,该过程中会出现接触抑制现象D.丁过程表示传代培育,此过程中的细胞分瓶后能无限增殖11.通常选取皮肤烧伤患者的自身细胞,经体外培育获得自体健康皮肤,再通过皮肤移植手术对患者进行治疗。下列说法错误的是()A.通常选取皮肤中分裂实力强、易培育的成纤维细胞或皮肤干细胞进行体外培育B.在体外培育细胞时,须要对培育液和用具进行灭菌处理,并且定期更换培育液C.细胞培育过程须要供应含有95%的O2和5%的CO2的混合气体,以维持培育液的pHD.进行传代培育时,贴壁生长的细胞需经酶消化后制成细胞悬液,分瓶培育12.为检测某药物X的抗癌活性,在细胞培育板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞,使其贴壁生长,试验组加入溶于二甲基亚矾的药物X,培育72h后进行计数,比较试验组和比照组每个孔中细胞数目。下列有关叙述错误的是()A.细胞培育液中通常须要加入血清或其他自然成分B.可用胰蛋白酶处理使肝癌细胞脱落下来并进行计数C.比照组中应加入等体积的无菌蒸馏水,其他条件一样D.若试验组细胞数远低于比照组,可初步推断此药物有抗癌效果13.(2024浙江丽水质检)动物细胞培育时,培育细胞的生命期如下图所示。下列叙述正确的是()A.可以运用稀释涂布平板法或显微镜计数法对细胞进行计数B.传代培育前,常用胰蛋白酶处理使原培育瓶内的细胞分散C.随着细胞传代次数不断增加,传代间隔的时长越来越小D.有限细胞系培育过程中会出现接触抑制现象,而无限细胞系不会14.某探讨小组欲探究HCV入侵时间对肝细胞活力的影响,请依据供应的试验材料和仪器完成试验思路,并回答相关问题。材料与用具:人体肝组织、新分别的HCV株(RNA病毒)、胎牛血清、动物细胞培育液、胰蛋白酶、培育瓶、相关检测仪器等。(要求与说明:检测时间间隔12h,保证48h内悬浮培育的养分条件相宜,不出现接触抑制,试验仪器、试剂等操作不作要求,细胞活力的检测方法不作要求)(1)试验思路:①;
②将肝细胞悬液均等加入若干培育瓶中,;
③甲组用适量且等量新分别HCV感染肝细胞,乙组不作处理;④在相宜条件下培育,,统计分析数据。
(2)预料最可能的试验结果。(用曲线图表示,坐标轴上标出初始值)(3)分析与探讨:胰蛋白酶可以分散细胞获得单个细胞的悬浮液的缘由是
。答案:1.D动物血清可为动物细胞供应生长因子等物质,培育过程中须要经过过滤除菌,以保持无菌环境,A项正确;定期更换培育液可以防止代谢产物的积累对细胞造成危害,B项正确;在二氧化碳培育箱中进行原代培育和传代培育,两者的主要区分在于是否分瓶培育,C项正确;动物细胞培育得到的是多个动物细胞,该过程没有得到完整的动物个体,不能体现动物细胞核的全能性,D项错误。2.C胰蛋白酶能消化组织中的胶原纤维和细胞外的其他成分,获得单细胞悬液,A项错误;传代培育的实质就是分别后再次培育,进行一次分别再培育称之为传一代,因此细胞进行一次传代培育所需时间应当大于一个细胞周期的时间,B项错误;动物血清能为细胞增殖供应有利的环境条件,有助于提高动物细胞克隆形成率,C项正确;动物细胞可以贴壁生长,有些动物细胞也能进行悬浮培育,D项错误。3.C在培育过程中通常要通入5%的CO2是为了维持培育液的pH,A项错误;维生素和激素不是能源物质,B项错误;定期更换培育液可以防止代谢产物的积累对细胞造成危害,C项正确;为了防止细胞培育过程中细菌的污染,可向培育液中加入适量的抗生素,D项错误。4.D动物细胞培育须要满意以下条件:无菌、无毒的环境,在培育液中可以添加确定量的抗生素,以防止培育过程中的污染;细胞体外培育须要的养分物质与体内基本相同,须要水、糖类、氨基酸、生长因子、无机盐、微量元素等;在运用合成培育基时,通常须要加入血清、血浆等一些自然成分;细胞体外培育的相宜温度一般与动物的体温相近;多数细胞生存的相宜pH为7.2~7.4;细胞培育须要的气体主要有O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培育液的pH,二者缺一不行。5.C步骤①是获得组织粗提物,一般先接受剪刀、镊子等工具在无菌环境中将组织块剪碎,有利于细胞悬液的制备,A项错误。步骤②是制备细胞悬液,利用胰蛋白酶可将组织中的胶原纤维和细胞外的其他成分消化掉,获得单个细胞。不能运用盐酸,因为运用盐酸会导致细胞死亡,B项错误。步骤③是将获得的细胞悬液放入卡氏瓶中培育,动物成纤维细胞属于贴壁生长的细胞类型(除血细胞等几种细胞外,大部分动物细胞都是贴壁生长的),因此细胞在培育过程中会吸附在卡氏瓶壁上,在进行传代培育前,需运用胰蛋白酶处理,将细胞膜上用于吸附的蛋白质消化掉,使细胞重新变为悬浮状态,C项正确。步骤④传代培育过程中,因培育环境(培育物、温度或其他因素)或人工诱导等可以发生转化,形成转化细胞系,D项错误。6.C细胞培育过程中应通入95%的空气和5%的CO2,A项错误。细胞的悬浮培育不会出现接触抑制的现象,B项错误。人们通常将动物组织消化后的初次培育称为原代培育,分瓶后的培育称为传代培育;当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,即会发生接触抑制现象如AB段;B点之后细胞接着生长,可见B点之后进行了传代培育,C项正确。制备单克隆抗体时,可选取图中D点后的细胞即能无限增殖的细胞与B淋巴细胞融合形成杂交细胞,D项错误。7.A培育动物细胞要用液体培育基,不须要添加琼脂,A项不合理;动物细胞培育须要无菌、无毒的环境,因此对培育动物细胞所用的培育液和培育用具等,须要进行相应灭菌处理,B项合理;细胞培育时通常接受培育皿或松盖培育瓶,这样培育箱内的气体可以进入培育皿或培育瓶中,保证细胞对气体的需求,C项合理;培育基中常需加入血清、淋巴液等,因为其中含有细胞生长所必需的物质,D项合理。8.A动物细胞培育液中常含有在高温条件下会变性失去功能的物质,如血清等,因而对培育液的这些成分接受过滤除菌,A项错误;正常肝细胞在原代培育过程中会出现接触抑制现象,B项正确;甲细胞为肿瘤细胞,将其培育可获得连续细胞系,C项正确;肝肿瘤细胞代谢和增殖速度较快,故一段时间后,会视察到甲细胞的数量比乙细胞多,D项正确。9.B连续细胞系是指能连续培育下去的细胞系,有些连续细胞系仍有接触抑制现象,B项错误。10.D离体动物细胞培育须要无菌、无毒的环境,甲过程表示从试验小鼠身上取下皮肤组织,该过程须要对小鼠进行消毒,A项正确;皮肤细胞培育前需用胰蛋白酶等处理皮肤组织使细胞分散开,并制成细胞悬液,B项正确;丙过程表示原代培育,该过程中会出现接触抑制现象,C项正确;丁过程表示传代培育,但分瓶后,细胞并非都能无限增殖,D项错误。11.C动物细胞培育所需的气体主要有O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培育液的pH,故培育时须要通入含有95%的空气和5%CO2的混合气体(维持培育液的pH),C项错误。12.C培育动物细胞时,细胞培育液中通常须要加入血清或其他自然成分,A项正确;对于已经贴壁生长的肝癌细胞,可用胰蛋白酶处理,使肝癌细胞脱落下来并进行计数,B项正确;试验组加入适量的溶于二甲基亚矾(溶剂)的药物X,比照组中应加入等体积的二甲基亚矾(溶剂),C项错误;若试验组细胞数目远低于比照组,即添加药物X的试验组肝癌细胞数目少,可以初步推断药物X有抗癌效果,D项正确。13.B动物细胞不能用稀释涂布平板法计数,A项错误;传代培育前,常用胰蛋白酶处理使原培育瓶内细胞的分散,B项正确;依据曲线图可知,随着细胞传代次数不断增加,传代间隔的时长基本不变,C项错误;无限细胞系中的良性无限细胞系虽已获得了不死性,但保留接触抑制现象,D项错误。14.答案(1)①将人体肝细胞培育在添加了胎牛血清的动物细胞培育液中,当细胞处于快速增长期时,用胰蛋白酶将细胞分散并悬浮培育②将培育瓶均分为甲、乙两组,检测细胞活力,并记录④分别在12h、24h、36h、48h检测细胞活力,记录(2)HCV入侵时间对肝细胞活力影响曲线图(3)胰蛋白酶可消化组织中的胶原纤维和细胞外其他成分解析(1)本试验的目的是探究HCV入侵时间对肝细胞活力的影响,自变量是HCV及其入侵时间。依据试验设计的比照原则和单一变量原则,试验思路为:①将人体肝细胞培育在添加了胎牛血清的动物细胞培育液中,当细胞处于快速增长期时,用胰蛋白酶将细胞分散并悬浮培育;②将肝细胞悬液均
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