仿制药质量一致性评价人体生物等效性研究技术指导原则

附件3仿制药质量全都性评价人体生物等效性争论技术指导原则一、概述液循环中的药物浓度来获得反映药物体内吸取程度和速度的主行为是全都并且可重现的。〔Bioavailability,BA〕是反映药物活性成分吸有一样活性成分的仿制产品要替代它的原研制剂进入临床使用的血药浓度-时间曲线意味着在作用部位能到达一样的药物浓〔Bioequivalence,BE〕。BA和BE将重点阐述BA和BEBA和BE争论的设计、操作和评价等。本指导原则主要是针对化学药品一般固体口服制剂质量全都的原则。二、BA和BE根本概念及应用循环的程度和速度。一般分为确定生物利用度和相对生物利用〔通常认为静脉制剂生物利用度为100%〕为参比制剂获得的药物活性成分吸取进入体内循环的〔如片剂和口服溶液为参比制剂获得的药物活性成分吸取进入体循环的相对量。BE争论是指用BA效、药效学指标或体外试验指标等进展比较性争论，但需充分证明所承受的方法具有科学性和可行性。BA和BE：原研药〔InnovatorProduct〕：是指已经过全面的药学、药理学和毒理学争论以及临床争论数据证明其安全有效性并首(Pharmaceuticalequivalence性(Therapeuticequivalence)适的方法。假设药物吸取速度与临床疗效无关,吸取程度一样但分只是活性成分化学形式不同〔或剂型不同〔如片剂和胶囊剂〕的药物制剂也可能治疗等效。根本相像药物〔Essentiallysimilarproduct〕：假设两剂型，并且经过证明具有生物等效性,则两个制剂可以认为是基替换原研药使用的。BA和BE强调反映药物活性给药途径和确定用药方案(如给药剂量和给药间隔)的重要依据之一。BE则重点在于以预先确定的等效标准和限度进展的比较，是保证含同一药物活性成分的不同制剂体内行为全都性的依据，是推断后研发产品是否可替换已上市药品使用的依据。BA和BE争论在药品研发的不同阶段有不同作用：理性，通过与原剂型比较的BA争论来确定剂型的给药剂量，也可通过BEBE争论来验证同一药物的不同时期产品的前后全都性，如：早期和晚期的临床试验用药品，临床试验用药品〔尤其是用于确定剂量的试验药〕和拟上市药品等。BE争论来证明仿制产品与原研药是否具有生物等效性，是否可与原研药替换使用。药品批准上市后，如处方组成成分、比例以及工艺等消灭一行BEBA更前后生物利用度的变化。三、争论方法BE争论是在试验制剂和参比制剂生物利用度比较根底上建立等效性。药代动力学争论点的生物样本〔如全血、血浆、血清或尿液〕中药物浓度，获得药物浓度-时间曲线〔Concentration-Timecurve,C-T〕来反映〔AUC〕、达峰浓度〔Cmax〕、达峰时间〔Tmax〕等，通过统计〔如无灵敏〕，可以考虑用明确的可分级定量的人体药效学指标通过效应-时间曲线〔Effect-Timecurve〕与参比制剂比较来确定生物等效性。临床比较试验当无适宜的药物浓度检测方法，也缺乏明确的药效学指标服以上局限。体外争论来替代体内争论。四、BE以药代动力学参数为终点指标的争论方法是目前普遍承受本分析、试验设计、统计分析、结果评价四个方面内容。〔一〕生物样本分析方法的建立和确证生物样品一般来自全血、血清、血浆、尿液或其他组织，具适宜的生物样品定量分析方法，并对方法进展确证。常用分析方法目前常用的几种分析方法有：〔1〕色谱法：气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)、可用于大多数药物的检测；〔2〕免疫学方法：放射免疫分析法、测；〔3〕微生物学方法：可用于抗生素药物的测定。生物样本分析方法的选择宜尽量选择可行的灵敏度高的方法。方法学确证〔MethodValidation〕建立牢靠的和可重现的定量分析方法是进展生物等效性研证，一般应进展以下几方面的考察：特异性(Specificity)性的最正确检测条件。对于色谱法至少要考察6个来自不同个体的〔注明浓度以软电离质谱为根底的检测法〔LC－MSLC-MS-MS〕应留意考察分析过程中的介质效应，如离子抑制等。标准曲线和定量范围〔CalibrationCurve〕标准曲线反映了所测定物质浓度与仪器响应值之间的关系，〔如用加权最小二乘法所得的回归方程来定结果应到达试验要求的周密度和准确度。决于分析物可能的浓度范围和分析物/响应值关系的性质。必需至少用6个浓度建立标准曲线，对于非线性相关可能需要更多浓曲线各浓度点的实测值与标示值之间的偏差*在可承受的范围之的偏差在±20%±15%点计算得比较准确。〔注：*偏差=【〔实测值－标示值〕/标示值】X100%〕定量下限〔LowerLimitofquantitation，LLOQ〕定量下限是标准曲线上的最低浓度点，表示测定样品中符合LLOQ应能满足测定3～5个准差(RSD)应小于20%。应至少由5个标准样品测试结果证明。周密度与准确度(PrecisionandAccuracy)的一系列测量值的分散程度。通常用质控样品的批内和批间RSD来考察方法的准确度。一般RSD应小于15％，在LLOQRSD应小于20％。实浓度的接近程度(即质控样品的实测浓度与真实浓度的偏差115％范围内，在LLOQ四周应在80％～120％范围内。一般要求选择高、中、低3个浓度的质控样品同时进展方法的周密度和准确度考察。低浓度选择在LLOQ的3倍以内，高浓度53(Analyticalrun/Analyticalbatch)，至少45个样品。样品稳定性(Stability)分析物的稳定性，以保证检测结果的准确性和重现性。提取回收率从生物样本基质中回收得到分析物质的响应值除以纯标准物样品中分析物提取出来供分析的比例。应考察高、中、低3个浓度的提取回收率，其结果应当周密和可重现。微生物学和免疫学方法确证特别之处。微生物学或免疫学分析的标准曲线本质上是非线性的，所以应尽可能承受比化学分析更多的浓度点来建立标准曲则应在方法确证和未知样品测定中承受同样的步骤。方法学质控只有在生物样本分析方法确证完成之后才能开头测定未知同浓度的质控样品对分析方法进展考核。增加各浓度质控样品数，使质控样品数大于未知样品总数的5%。质控样品测定结果的偏差一般应小于15%，低浓度点偏差一般应小于20%，最多允许1/3在同一浓度质控样品中。如质控样品测定结果不符合上述要求，则该分析批样品测试结果作废。CmaxCmax以后取样的样品应以无法定量〔Notdetectable,ND〕计算，以减小零值对AUC计算的影响。分析数据的记录与保存操作规程、保存完整的试验记录是分析方法有效性的根本要素。生物分析方法建立中产生的数据和质控样品测试结果应全部记的数据。至少应当供给的数据包括：方法建立的数据品〔〕的纯度和来源；描述测定特异性、准确度、周密度、回收率、定量限、标准曲线的试验并色谱图或质谱图并加以说明。样品分析的数据结果。供给100的标准曲线和质控样品的色谱图复印件。据和选择所报告的数据说明理由。其他相关信息行简化的理由、以及相应的工程打算编号、标题等。〔二〕试验设计与操作穿插设计清洗期〔Wash-outPeriod〕。这样，对每位受试者都连续承受差异对试验结果的影响。依据试验制剂数量不同一般承受2×2穿插、3×3穿插等设计。假设是两种制剂比较，双处理、双周期，两序列的穿插设计是较好的选择。如试验包括3个制剂〔受试制剂2个和参比制剂1个3制剂3周期二重3×3拉丁方试验设计。各周期间也应有足够的清洗期。的处理影响到随后一周期的处理中。清洗期一般不应短于7个消退〔HighlyVariableDrug〕，依据具体状况，除承受增加例数的方法外，在的个体内差异进展测定。受试者的选择择患者作为受试者。年龄:一般18～40周岁，同一批受试者年龄不宜相差10岁以上。50kg。按体质指数(BodyMassIndex,BMI)＝体重〔kg〕／身高2〔m2〕计算，一〔kg〕不宜悬殊过大，由于受试者服用的药物剂量是一样的。心电图、呼吸状况、肝、肾功能和血象无特别，避开药物体内过程受到疾病干扰。依据药物类别和安全性状况，还应在试验前、如有吸烟史，在争论结果时应考虑可能的影响。于慢代谢可能消灭的安全性等问题。受试者例数受试者例数应当符合统计学要求，对于目前的统计方法,18—24的药物可能需要适当增加例数。一个临床试验的例数多少是由三个根本因素打算的：〔1〕显著性水平：即α值的大小，通常取或5%；〔2〕把握度：即1-β80%，其中β是犯第Ⅱ类错误的〔CV%〕〔θ〕：两药等效性检验中检测指标的变异性和差异越大所需例数越多。在试验前并不知道θ和CV%，只能依据已有的参θ、CV%和把握度等参数来求N试验所选择例数进展比照，检验试验所承受例数是否适宜。受试者分组必需承受随机方法分组，各组间应具有可比性。受试制剂和参比制剂(TestProductandReferenceProduct,TandR量差异不能超过5%。对于受试制剂，应为符合现行质量标准的中试/生产规模的产品。应供给当制剂的体外溶出度、稳定性、含量或效价测定、及光学异构体的资料。条件、有效期。试验完毕后受试制剂和参比制剂应保存足够长时间直到产品全都性评价以备查。给药剂量利用度。一般状况下一般制剂仅进展单剂量给药争论即可,但在某些状况下可能需要考虑进展屡次给药争论，如：〔1〕受试药单次测定血药浓度时；〔2〕受试药的生物利用度有较大个体差异；药物吸取程度相差不大，但吸取速度有较大差异；〔4〕缓控释制剂。进展屡次给药争论应按临床推举的给药方案给药，至少连续3次测定谷浓度确定血药浓度达稳态后选择一个给药间隔取样进展测定，并据此计算生物利用度。取样取样点的设计对保证试验结果牢靠性及药代动力学参数计法时，一般应兼顾到吸取相、平衡相〔峰浓度〕和消退相。在药物浓度—时间曲线各时相及估量达峰时间前后应有足够采样点，2—3少需要33—5Cmax，代谢物3～5个半衰期时，或至血药浓度为Cmax的1/10～1/20,AUC0-t/AUC0-∞通常应当大于80%。过程，由于末端消退项对该类制剂吸取过程的评价影响不大。物，则应当连续24小时取样。当受试药不能用血药浓度测定方法进展生物利用度检测时，〔大于给药剂量的70%〕，入量。试验药品和试验方案应当符合生物利用度测定要求。尿样的收集承受分段收集法,其采集频度、间隔时间应满足估算受物吸取速度，误差因素较多，一般不提倡承受。和生物等效性试验。药代动力学参数计算经确证并应在争论报告中注明所用软件。在生物等效性争论中，其主要测量参数Cmax和TmaxAUC0→t以梯形法计算，故受数据处理程序影响不大。争论过程标准化食、活动都应掌握。试验工作应在I期临床试验观看室进展。受试者应得到医护录，必要时停顿试验。〔三〕数据处理及统计分析1.数据表达BA和BE争论必需供给全部受试者各个时间点受试制剂和参比制剂的药物浓度测定数据、每一时间点的平均浓度〔Mean〕及其标准差〔SD〕和相对标准差〔RSD〕，供给每个受试者的浓度—时间曲线〔C-T曲线〕和平均C-T曲线以及C-T曲线各个时间其他数据替代。2.药代动力学参数单次给药的BA和BE争论，供给全部受试者服用受试制剂和参比制剂的AUC0→t，AUC0→∞、Cmax、Tmax、t1/2、CL、Vd、F等参数及其平均值和标准差。Cmax和Tmax均以实测值表示。AUC0→t以梯形法计算；AUC0→∞按公式计算：AUC0→∞＝AUC0→t＋Ct/λz〔t为最终一次可实测血药浓度的采样时间；Ct为末次可测定样本药物浓系对数浓度-时间曲线末端直线部份求得的末端消退速率常数，可用对数浓度-时间曲线末端直线局部的斜率求得；t1/2用公式t1/2＝／λz计算。以各个受试者受试制剂〔T〕和参比制剂〔R〕的AUC0→t按下式分别计算其相对生物利用度〔F〕值：当受试制剂和参比制剂剂量一样时：F＝AUCT／AUCR×100％受试制剂和参比制剂剂量不同时【AUCT×DR／AUCR×DT×100％〔AUCT、AUCR分别为T和R的AUC；DR、DT分别为T和R的剂量〕。对于屡次给药的BA和BE争论，供给受试制剂和参比制剂的〔Cmin〕，达稳态后的AUCssCss-maxCss-min、Tss-max、t1/2、F、DF等参数。当受试制剂与参比制剂剂量相等时，F值按下式计算：F＝AUCssT／AUCssR×100％〔式中AUCssT和AUCssR分稳态条件下的AUC〕3.统计分析对数转换评价BE的药代动力学参数AUC0→t和Cmax在进展等效性检验前必需作对数转换。当数据有偏倚时经对数转换可校正其对称换,可实现将均值之比置信区间转换为对数形式的均值之差的计算。等效推断标准当前普遍承受主要药代参数经对数转换后以多因素方差分析〔ANOVA〕t检验和计算90％置信区间的统计分析方法来评价和推断药物间的生物等效性。P<等效；P>P>并不能认为两者相等或相近。在生物利用度试验中，承受多因素方差分析〔ANOVA〕双单侧t检验计算供给了误差值〔MSE〕。双单侧t〔1－2α〕%置信区间法是目前生物等效检验的唯一标准。双向单侧t检验是等效性检验，设定的无效假设是P<时说明受试制剂没有超过规定的参比制剂的高限和低限，拒绝无效假设，〔1－2α〕%置信区间是双单侧t检验另一种表达方式。其根本原理是在高、低2个方向对受试制剂的参数均值与凹凸界值之间的差异分别作单侧t没有小于等于参比制剂均数的80％〔P＜〕，即在两个方向的单侧t检验，都能以95％的置信区间确认没有超出规定范围，则可认为受试制剂与参比制剂生物等效。等效推断标准，一般规定，经对数转换后的受试制剂的AUC0→t在参比制剂的80％—125Cmax在参比制剂的80％—125％范围。依据双单侧检验的统计量，同时求得〔1－2α〕%置信区间，如在规定范围内，即可有1－2α的概率推断两药生物等效。Tmax定受试制剂与参比制剂生物等效。〔四〕结果评价生物等效性是指一种药物的不同制剂在一样的试验条件下，赐予一样剂量其吸取程度和吸取速度没有明显差异故对受试制剂与参比制剂的生物等效性评价应从药物吸取程度和吸取速度两方面进展，评价反映这两方面的 3个药代动力学参数即AUC0→t、Cmax和Tmax是否符合前述等效标准。目前比较确定AUCCmaxTmax依靠取样时间的安排，用它们衡量吸取速率有时是不够准确的，时，假设消灭某些不等效特别状况，需具体问题加以具体分析。AUC，一般要求90％可信区间在80％—125％范围内。CmaxTmax，一般在释放快慢与临床疗效和安全性亲热相关时需要统计评价，其等效范围可依据临床要求来确定。超生物利用，可以考虑两种状况：1〕参比制剂是否本身生物利用度低的产品，因而受试制剂表现诞生物利用度相对较高；2〕参比制剂质量符合要求，受试制剂确实超生物利用度。分析获得的相对生物利用度数值进一步指导确定剂型的临床使用剂量。〔五〕BE争论报告内容建立和考察的数据，供给必要的图谱；〔3〕具体的试验设计和操作方法，包括全部受试者的资料、样本例数、参比制剂、给药剂量、服药方法和采样时间安排；〔4〕原始测定未知样品浓度全部数据，每个受试者药代参数和药时曲线；〔5〕承受的数据处理程序和统计分析方法以及具体统计过程和结果；〔6〕服药后的考文献。正文前应有简短摘要；正文末，应注明试验单位、争论负责人、参与试验人员，并签名盖章，以示对争论结果负责。五、复方制剂点。六、结语生物利用度和生物等效性争论只是作为一个验证制剂质量是否能到达与原研制剂或其他已经过临床试验证明白安全与有关文献，以实现争论目的。七、名词解释介质效应:由于样品中存在干扰物质,对响应造成的直接或间接的影响。标准样品(StandardSample)：在生物介质中参加未知样品中分析物浓度。质控样品〔QualityControlSample〕：质控样品系将方法的效能和评价每一分析批中未知样品分析结果的完整性和正确性。一般配制高、中、低三个浓度的质控样品。分析批〔Analyticalrun/batch〕：包括待测样品、适当数以持续几天完成，但连续测量不宜超过3天。高溶解度〔Highlysoluble〕：假设药物的最大剂量能溶解在250ml或更少的的水溶液中，此药物可被认为是高溶解度的药250ml的量来源于标准的生物等效性争论中受试者用于服药的一杯水的量。高渗透性〔Highlypermeable〕：渗透性的分类标准以药物在〔〕为能充分描述人体内的吸取程度〔如体外上皮组织细胞培育法〕吸取程度到达90%时，此药物可被认为是高渗透性的。快速溶出〔Rapidlydissolving〕:利用规定的第一法装置100rpm(或二法装置50rpm)，使用900ml或少于900ml的以下每种介质测定溶出度：〔1〕LHCl或符合药典规定的无酶人工胃液；pHpH在上述条件下，假设一个口服制剂在30分钟内其标示量的85%以上完全溶出，则此药物被认为是快速溶出的。高变异性药物〔Highlyvariabledrug〕：当某一药物的个体内变异系数〔以AUC或Cmax计算的个体内变异系数〕大于或等于30%时，称之为高变异药物。这种变异的增加使得对样本例数可能要求增加。八、参考文献CFDA.化学药品制剂人体生物利用度和生物等效性争论指导原则〔试行〕，2023.中国药典2023版二部附录