冻干粉针剂车间培养基模拟灌装验证方案

第第111页冻干粉针剂车间培育基模拟灌装验证编订人＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿编订日期＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿会签部门部门职务姓名日期生产负责人总经理质量负责人质量副总冻干粉针剂车间车间主任设备工程治理部设备工程治理部经理质量治理部质量治理部经理生产治理部生产治理部经理批准人＿＿＿＿＿＿＿＿批准日期＿＿＿＿＿＿＿＿＿文件名称 冻干粉针剂车间培育基模拟灌装验证方案文件编号JB-ZYZ-004-A编制人编制日期年月日复制份数审核人审核日期年月日颁发部门质量治理部批准人批准日期年月日生效日期分发部门质量治理部、设备工程治理部、冻干粉针剂车间编制依据《药品生产质量治理标准》目 的：建立一个冻干粉针培育基模拟灌装工艺再验证方案，以标准冻干粉针车间培育基模拟灌装工艺验证工作证明所生产的无菌产品可以在规定的环境工艺和操作下能有效防止微生物污染，同时确定无菌灌装室内允许的最多人员数量，使生产的注射剂符合产品质量标准，尤其符合无菌标分发部门质量治理部、设备工程治理部、冻干粉针剂车间编制依据《药品生产质量治理标准》范 围：冻干粉针生产线无菌工艺的验证。责 任：设备工程治理部经理、质量治理部经理、质控主管、质保主管内 容：概述培育基模拟灌装是在与实际生产一样的工艺条件和操作方法下，模拟灌装经除菌过滤的胰酪胨大豆胨肉汤培育基适量到抗生素瓶中，压塞后，在3~6℃条件下冻干，轧盖后，按规定条件进展培育，以确认无菌灌装工艺的牢靠性。在此验证之前,空气系统、水处理系统、灭菌系统等验证工作均已完成。验证目的通过培育基模拟灌装试验证明，在无菌灌装过程中所承受的各种方法和规程，可使微生物污染的水平到达可承受的合格标准的力量，并供给保证所生产产品的无菌性的置信度到达可承受的合格标准的证据。对整个无菌灌装过程进展验证试验，依据验证结果来评估生产线正常运转时对微生物掌握的状况，推断生产过程的牢靠性，利用培育基模拟灌装试验来证明，在正常状态下，生产过程是牢靠的，0.10%95%的要求。验证过程应严格依据本方案规定的内容进展，假设因特别缘由确需变更时，应填写验证方案变更申请及批准书，报验证领导小组批准。验证分工验证小组负责验证方案的审批。负责验证的协调工作，以保证本验证方案规定工程的顺当实施。文件名称文件名称冻干粉针剂车间培育基模拟灌装验证方案文件编号JB-ZYZ-004-A负责验证数据及结果的审核。负责验证报告的审批。负责发放验证证书。负责再验证周期确实认。设备工程部负责组织验证所需厂房、设施、设备、仪器的验证。负责仪器、仪表、量具等的校正。负责设备的维护保养。质量治理部负责拟订验证方案负责取样及对样品的检验。负责收集各项验证、试验记录，并对试验结果进展分析后，填写验证报告，报验证小组批准。冻干粉针剂车间负责验证方案的实施。负责设备的操作。负责收集各项验证、试验记录，并对试验结果进展分析后，填写验证报告，报验证小组批准。成员成员职责黎士柱负责整个验证过程的规划指导和生产安排蔡萍、耿艳、张宏负责整个验证过程的生产工艺和质量掌握张为民负责整个验证过程的设备治理于久红、孙明、修应清负责对验证过程进展监视及验证文件的整理佟艳杰、秦晓红负责制备培育基负责培育基灌装及工艺掌握点的掌握负责样品培育、阴阳比照试验及无菌灌装室内沉降菌、浮游孙明、吕艳玲菌、尘埃粒子数的监测验证明施的必要条件系统保证要求：培育基模拟灌装验证明施之前，必需完成以下验证明验：公用工程：⑴空气净化系统验证⑵纯化水系统验证⑶注射用水及纯蒸汽系统验证〔4〕压缩空气系统验证文件名称文件名称冻干粉针剂车间培育基模拟灌装验证方案文件编号JB-ZYZ-004-A灭菌系统：⑴干热灭菌验证⑵湿热灭菌验证⑶臭氧灭菌验证无菌环境保持系统验证：灌装区域、环境内无微生物污染。设备验证及设备清洁验证：相关设备验证及设备清洁验证全部完成且符合要求。使用的主要设备序号设备名称型号数量生产厂家1浓配罐V＝0.1m31长春可之尔生物技术2稀配罐V＝0.3m31长春可之尔生物技术3缓冲罐V＝01m31长春可之尔生物技术4湿法超声波胶塞清洗机KJCS-41温州亚光制药机械5多功能铝盖清洗机DQXL-21温州亚光制药机械6立式超声波洗瓶机QCL801长沙楚天科技7杀菌枯燥机SZA620/431长沙楚天科技8灌装加塞机DGS12A1长沙楚天科技9轧盖机ZG300C1长沙楚天科技10冻干机Lyo-81上海车家龙科技11机动门脉动真空灭菌器XG1.DWX-0.36B1山东华医疗器械股份公司使用的物料预备〔依据模拟灌装的批量核定下述材料数量〕生产批量确实定：使用的物料信息品品名批号数量生产商抗生素瓶〔ml〕丁基胶塞铝塑复合盖胰酪胨大豆肉汤培育基验证所需文件冻干粉针剂车间培育基模拟灌装验证方案文件名称文件编号JB-ZYZ-004-A冻干粉针剂车间培育基模拟灌装验证方案文件名称文件编号JB-ZYZ-004-A第第1011页监控治理规程》模拟灌装过程操作规程及操作人员掌握全部参与模拟试验的操作人员均应经过GMP并经考核合格。参与模拟试验的操作人员数及人员构成应严格掌握，非规定的验证小组成员严禁在模拟试验过程中进入模拟试验现场，模拟试验现场人员数不得超过5人，人员的进入及退出应严格执行标准操作程序，削减不必要的人员进入及进退出次数。模拟灌装试验中使用的抗生素瓶和胶塞的清洗、灭菌；设备的清洗、消毒；与产品接触的灌装设备部件的清洗、灭菌；灌装过程必需遵循与实际生产操作一样的标准操作规程。在培育基灌装设计中，工艺条件的选择应选取合理的“最差条件”，用最差条件来对工艺流程、设备和整个系统进展挑战。最差条件如下：在预备阶段将物料、灌装部件和待灌装的容器依据工艺要求在无菌条件下保存到被允许的最长时间，培育基在灌装前保存在储罐中的时间挑战至最长工艺允许时间，灌装时在关键区域保存最多的人员，用促生长的培育基来代替实际生产时要灌装的物料，灌装机灌装速度保持略低于生产时灌装速度〔依据全批量的操作时间而定〕，但必需保证灌装后将容器来回翻转，培育基可以完全接触到容器和密封件内外表，漏液：倒瓶的处理：故障修理：生产活动频率最高：验证内容及记录相关物料的预处理胰酪胨大豆胨肉汤培育基的预备每批灌装应≥5000瓶，按每瓶灌装胰酪胨大豆胨肉汤培育基2.5ml计，除去损耗，约需胰酪胨大豆胨肉汤培育基粉末0.6K〔配置成20L。三批共需培育基粉末1.8Kg。抗生素瓶的清洗灭菌超声波清洗后，310℃，≥10分钟干热灭菌。灭菌后做无菌检查，应符合规定。20ml内毒素检查用水荡洗后做内毒素检查，应≤0.25EU/ml。胶塞的清洗灭菌胶塞清洗灭菌后做无菌检查，应符合规定。执行《细菌内毒素检查标准操作规程40只，参加100ml内毒素检查用水震荡后，做细菌内毒素检查，应≤0.25EU/ml。相关试验培育基灵敏性试验菌种：培育基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5代〔从菌种保存中心获得的冷冻枯燥菌种为第0代〕,并承受适宜的菌种保藏技术,以保证试验菌株的生物学特性，选择以下三种菌种〔菌种来源：黑龙江省食品药品检验检测所〕金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]铜绿假单胞菌[CMCC(B)10104]枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]白色念珠菌[CMCC(F)98001]黑曲霉菌[CMCC(F)98003]试验用设备及材料：冰箱、恒温培育箱、高压真空灭菌锅、恒温枯燥箱、刻度吸管、90mm培育皿、大试管、小试管、试管架、天平、接种环、酒精灯、干净工作台、培育基、灭菌生理盐水。菌液制备：接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的颖培育物至养分肉汤中，30—35℃18-2423—28℃24-48时，上述培育物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100cfu〔菌落形成单位〕的菌悬液；接种黑曲霉菌的颖培育物至改进马丁培育基上，23—285-73-5ml0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，吸出孢子悬液〔用管塞有适量疏松的无菌棉花或纱布能过滤菌丝的无菌毛细吸管〕0.91ml100cfu培育基接种：取每管装量15ml胰酪胨大豆肉汤培育基，分别接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌各2支，每支接种菌量1m〔菌量小于100cfu，另一支不接种，作为空白比照，30—35℃515ml5黑曲霉菌各21m〔菌量小于100cf23—28℃5结果推断：空白比照管应无菌生长，假设加菌的培育基管均生长良好，则该培育基的灵敏度检查符合规定。完整性测试：将挑战菌株接种在不少于1000ml的大豆胰蛋白胨液体培育基中培育以制备试验菌悬液。使用前菌悬液中挑战菌浓度不低于每毫升106CFU。将100个挑战瓶倒置于试验菌悬液中，并应确保瓶身、瓶颈和瓶盖外外表浸没于菌悬液中。浸没时间不应少于4小时。浸侵完毕后将挑战瓶取出并将外外表擦拭干净。然后将每瓶容器来回翻转，确保容器的内外表和胶塞内外表跟培育基完全接触。然后在阳性比照一样条件下培育至少7天后目视检查。假设阳性比照生长良好而挑战瓶内无生长，说明无菌容器系统的完整性测试通过。培育基无菌性试验1005030～35℃145023～28℃1414培育基阳性比照在模拟灌装过程的前、中、后段，随机抽取100支，1/2接种小于100CFU的枯草杆菌芽胞，1/2100CFU30～3523～28℃7，750%的接种抗生素瓶内的培育基中有明显的接种微生物生长，并以此作为阳性比照。生产环境、人员及设备检查无菌灌装试验的操作环境对无菌区墙壁、门、设备以及操作人员可能接触的各种外表进展无菌检验。其取样方法、取样点、取样频率见取样打算。在进展取样时其取样面积应保持在25cm2。检验结果应符合下表规定。无菌灌装操作人员卫生检查：尘粒最大允许数/m3微生物最大允许数外表微生物洁服干净度接触525cm2级别≥0.5μm≥5μm浮游菌/m3尘粒最大允许数/m3微生物最大允许数外表微生物洁服干净度接触525cm2级别≥0.5μm≥5μm浮游菌/m3沉降菌/皿〔55mm〕cfu/手cfu/碟 套百级≤3,5000≤5≤1(4h)≤1≤1﹤万级≤350000≤2023≤100≤3≤5≤55CFU设备清洁检查空气微生物数量沉降平皿法空气微生物数量沉降平皿法每小时取样一次装机四周设置四个以上的取样平皿监测 连续暴露取样。另有一个平皿应放置于微生物监测室状况最差的部位。浮游菌采样30取样操作时应由专人进展尘埃粒子监测粒子计数器30监测应由专人按标准操作程序进展5.3.4监测工程取样方法取样频率取样要求取样时，被取样的操作人员应离开灌模拟试验开头前，试验进装机，在灌装室的一角将双臂平伸，操作人员无菌性检查棉签擦拭法行一半时间，试验完毕后，分别对操作人员进展静止不动，取样人员按棉签擦拭取样法在最短时间内取样。每次对同一操取样监测作人员进展取样监测时，其取样点应不一样。模拟试验开头前，试验进依据取样点要求取样，取样面积固无菌灌装区无菌性检查棉签擦拭法行一半时间，试验完毕后，分别依据取样点要求定，每次取样面积为25cm2。每次应选择不同位置取样，其重点为操作者对无菌区进展取样监测可能接触的各种外表。依据取样点分布图布置培育皿，各取样点每小时更换取样皿进展检测。灌取样留意事项：①、操作人员无菌性检查取样点：操作人员的无菌服、手套、胸前、前臂等部位。②、无菌灌装区无菌性检查取样点：其取样重点为无菌灌装区内墙壁、门、设备外表以及操作人员可能接触的各种外表。每次取样应包括：一侧内墙壁，无菌灌装区内门把手，胶塞清洗机开门螺旋，灌装机上塞料斗，西林瓶灭菌烘干隧道出口处理瓶转盘，灌装机掌握面板，物料周转桶、周转托盘等处。③、空气微生物数量监测沉降平皿法取样点：取样点见附件《冻干粉针剂培育基无菌灌装模拟④、空气微生物数量监测浮游菌测试取样点：按无菌灌装区面积等分进展取样，每个测试点距10.5口处分别增加一个测试点。⑤、尘埃粒子监测取样点：按无菌灌装区面积等分进展取样，每个测试点距离1米，测试点距内墙面0.5米，另外在灌装面、胶塞清洗机胶塞出口处、西林瓶灭菌烘干隧道出口处分别增加一个测试点。培育基模拟无菌灌装试验操作5000瓶的批量进展培育基模拟无菌灌装。确定每个灌装室内的房屋面积及可能允许的最多人数：5ml： m2大约容纳5人。2ml6，30min尘埃粒子数。启动粉针联动生产线，模拟实际生产的条件下，将胰酪胨大豆胨肉汤培育基灌装到7ml抗生素瓶中，装量2.5ml/支，盖塞，然后放到传送带上，自动传送至轧盖间。在轧盖机上轧盖，已轧盖的样品，放入不锈钢托盘内，每一个托盘均应粘贴托盘标记，明确标示以下内容：托盘编号、生产起始时间与完毕时间备注等。备注应特别标记生产过程中修机前后托盘以便于调查其污染原因。并记录。然后，将托盘按编号挨次依次放到冻干机中，冷冻温度不得低于3℃。冻干时间设定为24小时，抽真空〔真空度： 、全压塞后按生产工艺要求进展铝盖密封作业。至此供试品已全部制备完成。微生物培育每瓶在培育前和培育中间阶段都要来回翻转，这样确保容器的内外表和胶塞内外表跟培育基完全接触，模拟灌装生产的全部样品在适宜的温度下培育14天，先在较低温度〔23～28℃〕下培育7天，然后在较高温度〔30～35℃〕下培育7天。在第三天和第七天之间至少观看培育基灌装品的微生物生长状况一次，并且在检测期间的最终一天至少再观看一次，并对污染瓶中的微生物进展总结其特点。14测。透亮、澄清、无混浊的培育基判为无微生物生长；培育基混浊或有悬浮的菌丝或菌落，则需做进一步的微生物生长检查，以确定培育基是否真正染菌。一旦确认染菌，应明确记录瓶号、瓶数，同时应检查铝盖、胶塞的密封状况；假设有破损应记录并检查其破损缘由。对微生物污染的样品应进展鉴别试验，鉴别的内容至少应包括菌落、细胞形态学及革兰氏染色特性等。试验结果评价评价无菌模拟灌装试验结果的主要指标之一是微生物污染水平，假设试验结果证明其污染水平超过规定的合格限度〔2996~474204743~6294性数量为1瓶应重复进展培育基无菌模拟灌装试验。缘由调查至少应包括如下项：a、生产环境微生物监测数据；b、生产环境悬浮粒子监测数据；c、人员污染的监测数据；d、HEPAe、操作间的空气流向、压差；f、操作人员的操作方法、培训状况；g、模拟灌装试验过程中的特别状况；h、无菌室生产工具及其他用品的储存状况；i、鉴别污染微生物的种、属，以查找污染源的线索；j、无菌室的清洁、清洁堆规程的培训及执行状况；k、无菌生产用设备的掌握系统和监测系统的校正