2024年大学试题(医学)-分子诊断学笔试考试历年高频考点试题摘选含答案

2024年大学试题(医学)-分子诊断学笔试考试历年高频考点试题摘选含答案第1卷一.参考题库(共75题)1.囊性纤维化（CF）是由囊性纤维化穿膜传导调节因子（CFTR）基因突变所致，CFTR最常见的突变为（）A、错义突变B、移码突变C、密码子突变（ΔF508）D、无义突变E、剪切位点突变2.镰状血红蛋白（HbS）氨基酸的变化为（）A、谷氨酸→精氨酸B、谷氨酸→赖氨酸C、谷氨酸→缬氨酸D、谷氨酸→组氨酸E、谷氨酸→苯丙氨酸3.链末端终止法测序反应体系的组成中包括有（）A、待测模板链B、引物C、DNA聚合酶D、放射性核素标记的dNTPE、测序产物的凝胶电泳及识读4.试证明Ct值与模板DNA的起始拷贝数成反比。5.模式生物基因组计划不包括（）A、秀丽线虫B、酿酒酵母C、黑腹果蝇D、小鼠E、大鼠6.限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是（）。A、修复自身的遗传缺陷B、促进自身的基因重组C、强化自身的核酸代谢D、提高自身的防御能力7.影响PCR反应的因素有哪些？8.逆转录病毒基因组的结构特点不包括（）A、5＇端帽子结构B、3＇端poly（A）尾C、两端各有一个长末端重复序列（LTR）D、编码逆转录酶E、神经酰胺酶9.下列哪项与短串联重复序列（STR）位点的不稳定性相关（）A、脆性X综合症、重症肌无力和Huntington 舞蹈症B、脆性X综合症、重症肌无力和Kearns-sayre综合症C、Kearns-sayre综合症、慢性进行性眼外肌瘫痪和Huntington 舞蹈症D、Kearns-sayre综合症、慢性进行性眼外肌瘫痪和Kearns-sayre综合症10.基因工程诞生的理论基础是什么？11.RNA酶蛋白抑制剂12.有关化学法的叙述，不正确的是（）A、所用化学试剂有一定危害性B、所需的DNA模板纯度要求较高C、测序前对待测DNA末端进行放射性标记D、便于自动化E、测序反应分为4组或5组相互独立的化学反应13.下列五个DNA片段中含有回文结构的是（）。A、GAAACTGCTTTGACB、GAAACTGGAAACTGC、GAAACTGGTCAAAGD、GAAACTGCAGTTTC14.PCR测定中的污染主要是指（）A、标本间的交叉法治B、环境中的细菌污染C、灰尘污染D、PCR扩增产物的污染E、试剂中的污染物15.简述分子影像在分子诊断中的应用。16.下列哪种克隆载体对外源DNA的装载量最大（）。A、粘粒B、酵母人工染色体C、质粒D、λ噬菌体17.简述蛋白芯片的原理及应用。18.A.基因重叠现象B.类核结构C.断裂基因D.质粒E.可移动基因成分原核生物具有（）19.荧光素FITC是（）。A、异硫氰酸荧光素B、四乙基罗达明C、德克萨斯红D、吲哚二羧菁20.脉冲场凝胶电泳与传统凝胶电泳的不同点有（）A、采用的凝胶基质不同B、采用的电场类型不同C、采用的电泳仪装置不同D、分辨的DNA片段大小不同E、样品的制备不同21.下列不属于获取目的基因的方法是（）A、“鸟枪法”B、转录法C、反转录法D、根据已知氨基酸序列合成法22.在定量PCR中，对原始模板准确定量的影响因素中，最大的是（）A、原始模板的量B、扩增效率C、循环次数D、扩增产物的量E、循环阈值23.HBV基因组序列的利用率（编码基因效率）达（）A、90%～100%B、100%～150%C、150%～200%D、200%～250%E、50%～300%24.真核细胞基因表达的特点为（）。A、单顺反子B、多顺反子C、转录和转译连续进行D、.转录和转译在同一时空进行25.（）可用于中期及间期细胞，检测染色体的非整倍性。A、着丝粒探针B、染色体涂抹探针C、基因座特异探针D、端粒重复序列探针26.（）只能用于中期细胞，确定小标识染色体或畸变。A、着丝粒探针B、染色体涂抹探针C、基因座特异探针D、端粒重复序列探针27.真核表达调控的顺式作用元件有哪些？其作用特点是什么？28.基因总数最多的生物（）A、人B、藻类C、水稻D、显花植物和两栖类动物E、某些哺乳动物29.外标定量方法最大的缺点是（）A、不能测定原始模板的绝对量B、测定的重复性和精密性有问题C、标准品制备困难D、不能排除样本间的测定差异E、测定必须在扩增的指数期进行30.病毒基因组存在（）A、基因重叠现象B、类核结构C、断裂基因D、质粒E、可移动基因成分31.HIV基因组编码的附加基因和调节基因（）A、vifB、vprC、nefD、tatE、rev32.通过凝胶电泳法可对RNA分子完整性进行鉴定，提示无RNA的降解时应（）A、28S RNA的荧光强度约为18S的2倍B、18S RNA的荧光强度约为28S的2倍C、5S RNA的荧光强度约为18S的2倍D、5S RNA的荧光强度约为28S的2倍E、28S RNA的荧光强度约为5S的2倍33.质粒提取后，在琼脂糖电泳出现一条带时说明质粒提取纯度高，当为三条带时为纯度不高。34.有哪几种反义核苷酸基因失活疗法？简述其原理。35.蛋白质之间相互作用的形式主要包括（）。A、分子和亚基的聚合B、分子识别C、分子自我装配D、多酶复合体E、分子杂交36.基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体结合②将目的基因导入受体细胞③检测目的基因的表达④提取目的基因。正确的顺序是（）A、③②④①B、②④①③C、④①②③D、③④①②37.简述原核生物的类核组成。38.简述TGGE/DGGE的基本原理。39.TaqMan探针采用的是（）A、荧光标记的探针B、生物素标记的探针C、同位素标记的探针D、SYBR Green标记引物E、圆形探针40.以下哪项有利于DNA的保存（）A、溶于TE中DNA在室温可储存数年B、加入少量DNaseC、溶于pH3.0溶液D、加入少量DNase和RNaseE、在DNA样品中加入少量氯仿，可有效避免细菌污染41.核酸操作的基本技术有哪些？42.以下基因扩增检验技术中，哪一种属于等温扩增（）A、PCRB、RT-PCRC、LCRD、Hybrid captureE、NASBA43.PCR扩增阻碍突变系统检测突变的原理是基于（）A、由于突变，限制性内切酶识别位点变化，不能被切开B、由于突变，电泳迁移率发生变化C、连接酶不能连接与靶序列错配的两个DNA片段D、Taq酶不能延伸3’末端与靶序列错配的引物E、以上都不是44.生物工程的下游技术是（）。A、基因工程及分离工程B、蛋白质工程及发酵工程C、基因工程及蛋白质工程D、分离工程 及蛋白质工程45.举例说明基因芯片在临床诊断中的应用。46.电泳时EB加在琼脂糖凝胶中一般会降低DNA在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率。47.耐热连接酶的使用，可增加寡核苷酸连接实验的（）A、灵敏度B、重现性C、特异性D、假阳性E、假阴性48.基因序列中保守性最高的序列（）A、内含子B、外显子C、整个基因D、5′非编码区E、3′非编码区49.在核酸的分离和纯化过程中，如何保持核酸的完整性？50.在重组DNA技术中，不常用到的酶是（）。A、限制性核酸内切酶B、DNA 聚合酶C、DNA 连接酶D、DNA 解链酶51.Northern印迹技术是（）A、检测RNA的核酸杂交技术B、是以发明者的名字命名的C、属于固相杂交的范畴D、与Southern印迹杂交的方法类似，只是变性剂不同52.甲型血友病基因倒位的分子检测法（）A、限制性内切酶MstⅡ切割法B、长距离PCR法（LD-PCR）C、多重PCRD、扩增产物变性聚丙烯酰胺凝胶电泳放射自显影E、Southern印迹杂交法53.α珠蛋白基因由α类基因或假基因组成，以下那一个不是假基因（）A、ψζB、ψα1C、ψα2D、ζE、以上均不是54.从高温嗜热细菌中发现高温DNApolymerase后，使得PCR技术得以广泛应用，在高温下有活性的DNApolymerase有（）、（）、（）、（）。其中具有3’-5’外切活性的高温DNApolymerase有（）和（）。55.感受态细胞（Competentcells）是一种处于（）状态的细胞。一般通过（）来诱导大肠杆菌感受态的形成。56.CsCl2-EB法中在过量EB存在的下，超速离心后密度最大沉于管底的是（）A、蛋白质B、带切口的环状或线性DNAC、RNAD、复合糖类E、闭环质粒DNA57.简述黏性末端DNA重组体的构建过程。58.简述血红蛋白病及其分类。59.下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大？（）A、质粒B、黏粒C、酵母人工染色体（YAC）D、λ噬菌体60.试述举2种质粒DNA提取的方法及应用。61.外源基因在原核细胞中表达，常用的启动子有（）、（）、（）、（）、（）和（）。62.CEPH是（）A、美国疾病控制中心B、加拿大临床化学协会C、人类多态性研究中心D、美国病理学家协会E、美国临床化学协会63.何谓线粒体病？简述线粒体病的遗传学分类。64.适合从琼脂糖凝胶中回收5kb的DNA片段的方法是（）A、DEAE纤维素膜插片电泳法B、非透析袋电泳洗脱法C、透析袋电泳洗脱法D、压碎与浸泡法E、冷冻挤压法65.PCR扩增阻碍突变系统检测可用于哪些类型的分子检测（）A、单位点突变B、多位点突变C、未知突变D、基因分型E、以上都可以66.提取DNA时，若用酚除蛋白质，需要用Tris-HCl对酚进行平衡，pH达7.8。67.在纯化核酸时往往含有少量共沉淀的盐，常用下列哪种浓度的乙醇洗涤去除（）A、100%B、95%C、70~75%D、50~60%E、30~40%68.下面哪些方法属于基因芯片原位合成技术（）A、原位光刻合成B、合成点样C、压电打印D、分子印章69.pBR322质粒作为基因克隆载体不具有下列何种调控元件（）。A、Ampr和TetrB、ori复制子C、LacZ标记D、多克隆位点70.RNA病毒基因组的帽子结构与第二个核苷酸相连的化学键（）A、5＇，5＇-三磷酸二酯键B、3＇，3＇-三磷酸二酯键C、5＇，5＇-磷酸二酯键D、3＇，5＇-磷酸二酯键E、以上都不是71.固相杂交不包括（）。A、Northern印迹杂交B、原位杂交C、吸附杂交D、Southern印迹杂交72.试述质粒的类型有哪些？73.具mRNA模板活性的病毒基因组是（）A、正链DNA病毒B、负链DNA病毒C、负链RNA病毒D、逆转录科的正链RNA病毒E、正链RNA病毒（逆转录科的正链RNA病毒除外）74.变性高效液相色谱法可分离（）A、单链DNA分子B、双链DNA分子C、环状DNA分子D、超螺旋DNA分子E、部分双链DNA分子75.T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是（）。A、2’-OH和5’-PB、2’-OH和3’-PC、3’-OH和5’-PD、5’-OH和3’-P第2卷一.参考题库(共75题)1.（）可用于中期及间期细胞，检测微缺失和微重复。A、着丝粒探针B、染色体涂抹探针C、基因座特异探针D、端粒重复序列探针2.质粒的结构特点有（）A、以环状双链DNA分子存在B、质粒DNA有超螺旋结构C、以环状单链DNA分子存在D、质粒DNA有半开环结构E、以环状双链RNA分子存在F、质粒DNA有线性结构G、以线性双链DNA分子存在3.肌营养不良症分子诊断的常用方法（）A、限制性内切酶MstⅡ切割法B、长距离PCR法（LD-PCR）C、多重PCRD、扩增产物变性聚丙烯酰胺凝胶电泳放射自显影E、Southern印迹杂交法4.DNA序列测定的应用有（）A、分析基因组核苷酸排列序列B、分析基因序列C、基因定点诱变的基础D、基因工程载体构建中DNA序列定位和排序的基础E、临床疾病的分子诊断5.人类免疫缺陷病毒的基因组（）A、双链DNAB、单链DNAC、双链RNAD、正链RNAE、负链RNA6.下列哪种不是基因扩增检验技术（）A、PCRB、LCRC、NASBAD、bDNAE、SDA7.转座因子是（）A、基因重叠现象B、类核结构C、断裂基因D、质粒E、可移动基因成分8.后基因组计划的主要目标（）A、基因功能比较B、基因功能鉴定C、基因组测序D、基因数据分析E、基因结构9.细菌的移动基因存在着三种类型的转位因子包括（）、（）、（）。10.试述载体构建一般方法。11.Western印迹12.病毒的基本结构成份主要有哪些？13.基因组最大的生物（）A、人B、某些藻类C、某些细菌D、某些显花植物和两栖类动物E、某些哺乳动物14.关于碱解法分离质粒DNA，下面哪一种说法不正确？（）A、溶液I的作用是悬浮菌体B、溶液Ⅱ的作用是使DNA变性C、溶液Ⅲ的作用是使DNA复性D、质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性15.举例说明FISH技术在分子诊断上的应用。16.亨廷顿病IT15基因CAG常用的分子诊断方法（）A、限制性内切酶MstⅡ切割法B、长距离PCR法（LD-PCR）C、多重PCRD、扩增产物变性聚丙烯酰胺凝胶电泳放射自显影E、Southern印迹杂交法17.通过转座可引起哪些遗传效应？18.最早推出的荧光定量探针是（）A、TaqMan探针B、相邻探针C、分子信标D、阴阳探针E、端粒探针19.温度梯度凝胶电泳与变性梯度凝胶电泳检测基因变异是基于（）A、变异单链DNA分子的电泳迁移率不同B、变异DNA双链分子的电泳迁移率不同C、变异双链DNA分子部分变性的条件不同，电泳迁移率改变的位置不同D、变异双链DNA分子完全变性的条件不同，电泳迁移率改变的位置不同E、变异双链DNA分子完全变性的条件不同，电泳迁移率不同20.能对未知序列进行扩增的PCR是（）A、多重PCRB、巢式PCRC、原位PCRD、反向PCRE、不对称PCR21.试述点突变（基因背景清楚和未知）的主要检测方法。22.限制性内切核酸酶的星活性是指（）。A、在非常规条件下，识别和切割序列也不发生变化的活性B、活性大大提高C、切割速度大大加快D、识别序列与原来的完全不同23.DNA聚合酶要求下述哪些物质才能进行DNA复制（）A、dDNAB、Mg2+C、引物D、模板E、小牛血清白蛋白24.基因序列经碱基替代，缺失或插入后，可使遗传信息产生三种不同的后果，分别为（）、（）、（）。25.脆性X智力低下1号基因FMR-1）基因5端重复序列异常扩增，其全突变重复范围（n）是（）A、6～45B、45～55C、55～200D、0～6E、>20026.液相分子杂交包括（）A、吸附杂交B、发光液相杂交C、液相夹心杂交D、复性速率液相分子杂交27.适合从琼脂糖凝胶中回收500bp~5kb的DNA片段的方法是（）A、DEAE纤维素膜插片电泳法B、非透析袋电泳洗脱法C、透析袋电泳洗脱法D、压碎与浸泡法E、冷冻挤压法28.以下哪项描述是错误的（）A、细菌是单细胞生物B、细菌是原核生物C、细菌生长快个体小D、细菌以有丝分裂的方式增殖E、细菌无细胞核结构29.线粒体DNA与核DNA有哪些不同之处？30.在LacZ标记基因插入外源基因，经IPTG诱导，在X-gal培养基中显（）色，为（）性克隆，未插入基因的克隆显（）色，为（）性克隆。31.质谱分析技术主要是用来检测蛋白质的（）。A、分子量B、分子组成C、分子构像D、分子大小32.病毒基因组末端重复序列结构有（）A、粘性末端B、末端插入序列C、末端反向重复序列D、末端正向重复序列E、长末端重复序列33.下列有关重组DNA技术的叙述，正确的是（）A、重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B、所有的限制酶都只能识别一种特定的核苷酸序列C、选细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D、只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达34.由一个细胞或者组织的基因组所表达的全部相应的蛋白质，称为（）。35.RNA主要存在于（）A、细胞质B、线粒体C、细胞核D、溶酶体E、内质网36.有关煮沸裂解法提取质粒DNA的正确叙述是（）A、该法是一种条件比较温和的物理方法B、煮沸能完全灭活核酸内酶AC、不适用于大多数Ecoli菌株D、适用于HB101菌株E、适用于37.简述M-FISH的原理及其优缺点。38.（）影响核酸分子杂交的因素。A、DNA的浓度B、DNA的大小和复杂性C、温度D、离子强度39.简述质粒的概念和特性，常用的质粒载体有哪几种？40.简述原核生物转座子的类型及特点。41.功能基因组学的主要特征。（）A、高精度B、高通量C、大规模D、计算机分析E、高分辩率42.细菌基因转移的方式有（）A、接合B、转化C、转染D、转导E、转座43.原核细胞和真核细胞转录的mRNA均具有与rRNA结合的SD序列，以利于进行有效的转录。44.有关DNA链末端终止法的不正确说法是（）A、需要ddNMPB、需要ddNTPC、dNTP：ddNTP的比例要合适D、需要放射性同位素E、需要dNTP45.在核酸的提取过程中，将整个操作过程的pH尽可能控制在（）A、2～3B、4～10C、10～11D、11～12E、12～1446.亨廷顿致病基因-IT15基因外显子1的起始密码子ATG下游17个密码子处有一段多态性的三核甘酸重复序列，其为（）A、CCGB、CAAC、CGAD、CAGE、CGG47.有关DNA序列自动化测定的不正确叙述是（）A、用荧光代替了同位素标记B、激光扫描分析代替人工读序C、基本原理与手工测序相同D、不需要引物E、需要与手工序列分析相同的模板48.紫外分光光度法测定核酸溶液选用的光波波长为（）A、200nmB、230nmC、260nmD、280nmE、320nm49.蛋白质组学的研究内容有哪些？50.识别基因序列不同，但酶切后产生的粘性末端相同的一类酶为（）。A、同工酶B、同尾酶C、同裂酶D、同位酶51.用于核酸分子杂交的探针不能是放射性标记的（）。A、DNAB、RNAC、抗体D、寡核苷酸52.试述生物芯片的种类及主要功能。53.甲型流感病毒亚型的分型依据（）A、核衣壳蛋白（nucleocapsid protein，NP）B、基质蛋白（matrix protein，M）C、血凝素（hemagglutinin，HA）的抗原性D、神经酰胺酶（neuraminidase，NA）的抗原性E、宿主种属54.原核生物基因组的特征包括（）A、具有类核结构B、只有一个DNA复制起点C、有大量的基因重叠现象D、存在可移动基因成分E、基因组中有重复序列存在F、结构基因多数是多拷贝的G、广泛存在操纵子结构55.下列有关连接反应的叙述，错误的是（）。A、连接反应的最佳温度为37℃B、连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%C、连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mMD、接酶通常应过量2-5倍56.T4DNA连接酶或TthDNA连接酶更容易识别哪类错配（）A、连接缺口上游探针的5’末端B、连接缺口上游探针的3’末端C、连接缺口下游探针的5’末端D、连接缺口下游探针的3’末端E、以上都不是57.大肠杆菌作为基因工程受体菌的优缺点是什么？58.简述原位杂交在临床中的应用。59.原核生物具有（）A、基因重叠现象B、类核结构C、断裂基因D、质粒E、可移动基因成分60.HBV基因组是（）A、完全双链DNA分子B、不完全双链DNA分子C、完全双链RNA分子D、不完全双链RNA分子E、单链DNA分子61.下列叙述哪项是错误的（）A、原核生物基因组具有操纵子结构B、原核生物结构基因是断裂基因C、原核生物基因组中含有插入序列D、原核生物基因组中含有重复顺序E、原核生物结构基因的转录产物为多顺反子型mRNA62.遗传疾病分子诊断的策略（）A、直接诊断策略B、SSCPC、基因多态性连锁分析D、RFLPE、基因突变的定量（dosage）诊断63.黏性末端连接法，不仅操作方便，而且（）。A、产生新切点B、易于回收外源片段C、载体不易环化D、影响外源基因的表达64.操纵子结构不存在（）A、细菌基因组中B、病毒基因组中C、真核生物基因组中D、大肠杆菌基因组中E、原核生物基因组中65.原核生物基因组与真核生物基因组的区别有（）A、编码序列所占的比例B、操纵子结构C、重复序列D、内含子E、细胞核结构F、复制起点的个数66.线粒体DNA（mtDNA）与核DNA主要不同之处有（）A、非孟德尔的母系遗传B、低突变率C、异质性和复制分离D、阈值效应67.原位杂交的基本原理。68.叙述原核生物基因组的结构特征。69.紫外分光光度法可对核酸纯度进行鉴定，下列说法是正确的（）A、纯DNA的A270/A280比值为2.0B、纯DNA的A260/A280比值为1.8C、纯DNA的A260/A280比值为2.0D、纯DNA的A270/A280比值为1.8E、纯DNA的A230/A270比值为1.870.质粒的生物学性质有（）A、质粒携带的遗传性状也能被转移B、质粒的复制可独立于宿主细胞C、质粒对宿主细胞的生存是必需的D、质粒带有选择性标志E、质粒有不相容性F、质粒可以与染色体发生整合71.关于cDNA的不正确的提法是（）。A、同mRNA互补的单链RNAB、同mRNA互补的含有内含子的DNAC、以mRNA为模板合成的双链RNAD、以上都不正确72.Southern印迹73.简述真核生物染色体基因组的一般特点？74.真核生物基因组含有的重复序列有哪些？75.简述bDNA信号放大系统的原理。第1卷参考答案一.参考题库1.参考答案：C2.参考答案：B3.参考答案：A,B,C,D,E4.参考答案： 一般来说，第n次PCR循环的荧光信号强度（Rn）等于背景信号强度（RB）加上每个分子的荧光强度（即单位荧光强度RS与分子数目的乘积），用数学式表示如下：Rn=RB+XO（1+Ex）nRs式中：Rn代表荧光信号强度；RB代表背景信号强度；Xo代表起始模板拷贝数；Ex代表扩增效率；Rs代表单位荧光强度；N代表循环次数。 对每一个特定的PCR反应来说，Ex、RT、RB、和Rs都是常数，所发Ct值与lgXo成反比，也就是说，Ct值与起始模板DNA的拷贝数（Xo）的对数成反比，起始DNA浓度每增一倍，Ct值减小一个循环。因此，Ct值的引入确保了实时荧光PCR定量的精确和严格。5.参考答案：E6.参考答案：D7.参考答案：PCR反应体系包含DNA模板、寡核苷酸引物、DNA聚合酶、dNTP及含有必需离子的反应缓冲液，这些因素都对PCR反应产生影响。8.参考答案：E9.参考答案：A10.参考答案： 是现代分子生物学领域理论上的三大发现和技术上的三大发明。理论上的三大发现： 1.证实了DNA是遗传物质。 2.揭示了DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制机理。 3.遗传密码的破译和遗传信息传递方式的确定。 技术上的三大发明：①限制核酸内切酶的发现与DNA切割②DNA连接酶的发现与DNA片段的连接③基因工程载体的研究与应用。11.参考答案：RNA酶蛋白抑制剂（RNasin）是从人胎盘分离的一种蛋白质可与多种RNA酶紧密结合形成非共价结合的等摩尔复合物，使RNA酶失活。12.参考答案：D13.参考答案：D14.参考答案：D15.参考答案： 分子影像可特异灵敏地探查疾病过程中相关分子的异常，能够提高临床诊治疾病的水平，在临床上有良好的应用前景。但其在分子诊断中的应用刚刚起步，主要集中于肿瘤、心脏和神经系统三大领域。 目前临床诊断中应用最多的是对肿瘤的临床检查，占临床检查总数的85%左右。有资料证实，PET可以使早期肿瘤的诊断率提高30％～40％。除了早期诊断，分子影像技术还可对肿瘤进行分期、分型，提示肿瘤的恶性程度和预后。分子影像在心血管系统疾病诊断则主要是关于心肌存活性对于心脏功能判断、临床治疗方案选择及心功能预后分析。对神经系统疾病的诊断多采用放射性核素成像系统对神经系统进行受体显像，可同时观察受体的分布和密度，为临床提供定量的检测数据。16.参考答案：B17.参考答案： 蛋白质芯片的基本原理是采用原位合成、机械点样或共价结合的等方法将多肽、蛋白、酶、抗原、抗体固定于固相介质上形成的生物分子点阵，在待分析样品中的生物分子与蛋白质芯片的探针分子发生杂交或相互作用或其他分离方式分离后，利用激光共聚焦显微扫描仪对杂交信号进行高通量检测和分析。蛋白质芯片是将整个蛋白质水平的相关生化分析过程集成于芯片表面，从而实现对多肽、蛋白质及其他生物成份进行高通量检测。 蛋白质芯片技术是一种快捷、高效、高通量、并行、微型化和自动化的蛋白质分析技术，适用于分析包括组织、细胞系、体液在内的多种生物样品能分析包含针对信号传导、癌症、细胞周期调控、细胞结构、凋亡和神经生物学等广泛的生物功能的相关蛋白，灵敏度高达pg/ml。18.参考答案：B真核生物基因是（）参考答案：C病毒基因组存在（）参考答案：A转座因子是（）参考答案：E染色体以外的遗传物质是（）参考答案：D19.参考答案：A20.参考答案：B,C,D,E21.参考答案：B22.参考答案：B23.参考答案：C24.参考答案：A25.参考答案：A26.参考答案：B27.参考答案： 顺式作用元件为一些能与DBP结合的特定序列的DNA片段，决定转录起始位点和RNA聚合酶的转录效应，按功能可分为启动子、增强子、沉默子、衰减子和终止子等DNA序列片段。 启动子：真核基因启动子是基因表达时与基因转录起始有关的5’端DNA序列，包括在-30bp区富含有AT的典型TATA盒（框）（TATA box）和在-70～-80bp区域（在TATA box上游）启动元件。前者是引导RNA聚合酶Ⅱ在正确起始位点转录mRNA所必需的DNA序列，即保证转录的精确起始。后者UPE是调节转录起始频率和提高转录效率的调控序列，后者的序列常为GGTCAAT和GGGCCC序列，称为GC box，它们经协同作用，以调控基因的转录效率。 增强子：增强子是使启动子的基因转录效率显著提高（增强转录活性）的一类顺式作用元件，其本身不具有启动子活性，是由多个独立的，具有特征性的核苷酸序列所组成。其基本的核心组件常由812bp组成，以单拷贝或多拷贝串联的形式存在。增强子一般有以下特性：⑴增强子能提高同一条DNA链上基因转录的速率；⑵增强子对同源或异源基因都有效 ⑶增强子的位置可在基因5’上游、3’下游或内部；⑷无方向性，增强子从5’→3’或是从3’→5’均可对启动子发挥作用；⑸增强子可远离转录起始点；⑹增强子一般无基因特异性，对各种基因启动子均有作用，但具有组织或细胞特异性。 典型的增强子首先发现于SV40的病毒中，为SV40的早期基因增强子，约200bp，含2个72bp的重复序列，位于早期启动子上游，增强子可促使病毒基因转录效率提高100倍，因此具有这一增强子的载体已得到了广泛的应用。些年来，来自于Rous肉瘤病毒基因长末端重复序列和人类巨细胞病毒（CMV）增强子也已被广泛用于真核细胞的基因表达。增强子能增强启动子的转录能力，有效的增强子能促进转录达10倍或100倍以上，在某些情况下，表达产物可能具有细胞毒效应。因此，最好使用一种可被外界刺激信号诱导表达外源基因的诱导型启动子，诱导型启动子有热休克启动子、金属硫蛋白启动子、糖皮质激和固醇类激素诱导的启动子，热休克启动子的诱导可通过提高细胞的培养温度使启动子转录水平提高，重金属离子可有效地促进金属硫蛋白启动子的转录活性。 R.NA剪接信号：多数高等的真核基因都含有内含子序列，在细胞核内转录产生的前体mRNA要经过剪接过程去掉内含子顺序后才成为成熟的mRNA分子。虽然许多基因的cDNA转入哺乳类动物细胞后，其表达不受有或无内含子的影响，但有些基因在真核细胞中表达需要有内含子的存在。一般来说，在哺乳动物细胞的表达载体中最好有一段内含子序列的剪接信号，以提供外源基因cDNA表达的需要。常用的内含子剪接序列有SV40的小t抗原的内含子序列等。 负调控元件：沉默子和衰减子是抑制基因转录的DNA序列，称为负调控元件，它们与反式作用因子相互结合而起作用。这些负调控元件不受距离和方向的限制，并可对异源基因表达起作用。 终止子和polyA信号：核基因转录的确切终止信号和终止机制，目前尚不清楚，终止过程不是在RNA聚合酶指导下完成的，在不明机制下发生转录终止。现在已发现模板DNA分子的3’端有转录终止信号序列，称终止子。通常由转录产生的具有polyA尾的基因终止信号是在多聚腺苷酸化位点下游的一段长度为数百个碱基的DNA区域内的G/T簇，例如在SV40中的AGGTTTTTT的DNA序列为终止转录调控元件。一般转录终止子为发夹结构的反向重复序列。现在基因工程表达载体上所使用的转录终止子都是病毒基因或细胞基因的3’端的一段序列，其中也包括3’端不翻译区。如SV40小t抗原和β-球蛋白的转录终止片段常用于构建真核基因表达载体。 在双启动子的表达载体中，启动子的转录方向为同向时，上游启动的转录由于会穿过下游启动子，这样就使得下游的转录受到极大的影响，造成下游转录水平的下降，但是如果在两个启动子间插入一个转录终止子后，上游启动子对下游启动子的影响就被消除了，这样下游启动子的表达量会有明显提高。当两个启动转录方向相反时，基因表达可能会被转录形成的反义RNA所抑制，这时插入转录终止子将会消除这种抑制作用。28.参考答案：C29.参考答案：B30.参考答案：A31.参考答案：A,B,C,D,E32.参考答案：A33.参考答案：错误34.参考答案： （1）将特异的反义基因重组到表达载体上（病态载体或质粒），导入靶细胞中转录出反义RNA，形成双链RNA（RNA/RNA双链体），阻碍基因的翻译。 （2）人工合成寡聚脱氧核糖核酸（ODN）经过化学修饰导入细胞，与mRNA和DNA结合，形成RNA/DNA杂链或DNA核苷酸三聚体，影响基因的翻译或转录。 （3）特异性的核酶，根据癌基因设计出特异的“锤头”或“发夹”结构，它能够催化切割，降解异常表达基因的mRNA而影响基因的翻译。35.参考答案：A,B,C,D,E36.参考答案：C37.参考答案：原核生物与真核生物的主要区别在细胞核上。原核生物没有典型的细胞核结构，基因组DNA位于细胞中央的核区，没有核膜将其与细胞质隔开，但能在蛋白质的协助下，以一定的组织形式盘曲、折叠包装起来，形成类核（nucleoid）也称拟核。类核的中央部分由RNA和支架蛋白（scaffoldingprotein）组成，外围是双链闭环的超螺旋DNA。在超螺旋结构的基础上，DNA分子再扭结成许多活结样或花瓣样的放射状结构的DNA环。每个环形的活结状结构代表一个结构域，在各结构域中DNA呈负超螺旋状态。每个DNA环是一个相对独立的功能区，可以独立完成不同区域的基因表达与调控。在类核中80﹪为DNA，其余为RNA和蛋白质。如果用DNA酶处理后可使基因组DNA链断裂；如果用RNA酶或蛋白酶处理类核，则类核变得松散，不能维持DNA链的折叠结构，这表明RNA和蛋白质对维持类核分子的折叠以及形成环状结构是必不可少的。38.参考答案： 在TGGE中，随着温度的逐渐升高时，DNA分子会呈阶梯式逐步发生解链。部分解链的双链DNA分子表现出一种复杂的分枝构像，使得其电泳迁移率大大下降。DNA分子的解链决定于该分子的解链温度（Tm），而Tm有强烈的序列依赖性，如在单取代突变中，若是A：T（两个氢键）被G://C（三个氢键）取代，将增加该双链DNA分子的Tm值。而整个DNA分子序列对解链温度也有影响，若A：T被T：A替代，或G://C被C://G替代，分子的解链温度也会发生改变。因此不同的DNA分子由于其Tm不同，将于不同凝胶位置（温度不同）产生分枝（解离）使电泳迁移率降低，从而在凝胶上的不同位置形成条带。 DGGE的变性条件为热（一般为60℃的恒定温度）和固定比率的甲酰胺（0－40％）、尿素（0－7M）。这些梯度变性的功能就相当于TGGE中的温度梯度的功能，使不同DNA分子在不同的凝胶部位发生解链，引起迁移率下降，从而将不同的DNA分子分离。39.参考答案：A40.参考答案：E41.参考答案：①核酸提取与纯化②核酸的检测与保存③核酸的凝胶电泳④核酸分子杂交。42.参考答案：E43.参考答案：D44.参考答案：A45.参考答案： 基因芯片作为一项现代化的诊断新技术在感染性疾病、遗传性疾病的诊断和耐药性检测等方面已显示出良好的应用前景。下面举例说明基因芯片在疾病诊断的应用。 （1）感染性疾病的诊断：性传播疾病、肝炎等。 （2）遗传性疾病的诊断：地中海贫血、血友病、婚前检查等。 （3）耐药性检测：结核分支杆菌耐药性检测芯片等。46.参考答案：正确47.参考答案：A,C48.参考答案：B49.参考答案：为了保证核酸的完整性，首先在操作过程中，应尽量简化操作步骤，减少各种破坏核酸的有害因素，包括物理、化学与生物学的因素。提取应在0～4℃的条件下进行；另外避免强力的机械剪切力对核酸的破坏。细胞内或外来的核酸酶对核酸的生物降解，而破坏核酸的一级结构，使用EDTA、柠檬酸盐并在低温条件下操作，基本上就可以抑制DNA酶的活性；并尽可能地抑制RNA酶的活性。50.参考答案：D51.参考答案：A,C,D52.参考答案：B53.参考答案：D54.参考答案：TaqDNA聚合酶；TthDNA聚合酶；VentDNA聚合酶；PwoDNA聚合酶；DNA聚合酶；PwoDNA聚合酶；PfuDNA聚合酶55.参考答案：容易接受外源DNA片段；CaCl2法56.参考答案：C57.参考答案：目的基因和载体可由同一种限制酶切割后产生，或由不同的限制酶切割形成互补黏性末端，经退火，彼此间很容易按碱基配对原则形成氢键。然后由DNA连接酶催化连接接头处的缺口，形成重组质粒。载体DNA在限制酶切割后，用碱性磷酸酶处理，除去5’端磷酸基，以避免载体DNA自身环化。58.参考答案： 血红蛋白病（hemoglobinopathy）是由于血红蛋白在质和量上的异常而发生的一类遗传性贫血病。它可分为两大类：一类是异常血红蛋白病，其Hb发生了结构上的异常，导致贫血病。例如镰刀状细胞贫血；另一类是地中海贫血，其构成Hb的蛋白部份—珠蛋白的合成降低或消失，而其Hb一般不发生结构上的变化，故亦称珠蛋白合成障碍性贫血。59.参考答案：C60.参考答案： 质粒DNA提取的方法包括碱裂解法、煮沸裂解法和SDS裂解法。 碱裂解法：在NaOH存在的强碱性（pH12.0～14.0）的条件下，用强阳离子去垢剂SDS破坏细胞壁和裂解细胞，并使宿主细胞的蛋白质与染色体DNA发生变性，释放出质粒DNA。它是一种适用范围很广的方法，能从所有的大肠杆菌（E.coli）菌株中分离出质粒DNA，制备量可大可小。 煮沸裂解法：是将细菌悬浮于含Triton X-100和溶菌酶的缓冲液中，Triton X-100和溶菌酶能破坏细胞壁，再用沸水浴裂解细胞，使宿主细胞的蛋白质与染色体DNA发生变性。对CCC质粒DNA因结构紧密不会解链，当温度下降后，CCC质粒DNA可重新回复其超螺旋结构，通过离心去除变性的蛋白质和染色体DNA，然后回收上清液中的质粒DNA。本法只能用于小质粒DNA（小于15kb）的小量或大量制备，适用于大多数从大肠杆菌（E.coli）菌株中分离出质粒DNA。 S.DS裂解法：它是将细菌悬浮于等渗的蔗糖溶液中，用溶菌酶和EDTA处理以破坏细胞壁，再用SDS裂解去壁细菌，从而温和地释放出质粒DNA到等渗溶液中，然后用酚/氯仿抽提。适用于大质粒DNA的提取。61.参考答案：乳糖启动子；Trp启动子；Tac启动子；噬菌体的PL；PR启动子；脂蛋白启动子62.参考答案：C63.参考答案： 线粒体病（mitochondriopathy）是指由于线粒体呼吸链功能不良所导致的临床表现多样化的一组疾病。临床表现常见为眼睑下垂、外眼肌麻痹、视神经萎缩、神经性耳聋、痉挛或惊厥、痴呆、偏头痛、类卒中样发作等。 从核基因缺陷和线粒体基因缺陷的角度对线粒体病进行遗传学分类可分为三种类型：点突变，mtDNA的大规模缺失或插入和源于核DNA缺陷引起mtDNA缺失。64.参考答案：C65.参考答案：A,B,D66.参考答案：正确67.参考答案：C68.参考答案：A,C,D69.参考答案：C70.参考答案：A71.参考答案：C72.参考答案： 根据细菌染色体对质粒复制的控制程度是否严格可将质粒分为：严紧型质粒和松弛型质粒。 按转移方式分为：接合型质粒、可移动型质粒、自传递型质粒。 按质粒大小分为：小型质粒、大型质粒。 按质粒的宿主范围分为：窄宿主谱型质粒、广宿主谱型质粒。 按质粒的功能分为：F质粒、R质粒、Col质粒。73.参考答案：E74.参考答案：A,B,E75.参考答案：C第2卷参考答案一.参考题库1.参考答案：C2.参考答案：C,D,E,F3.参考答案：C4.参考答案：A,B,C,D,E5.参考答案：D6.参考答案：D7.参考答案：E8.参考答案：B9.参考答案：插入序列；转位子；噬菌体Mu和D10810.参考答案： A.目的基因分析（1）ORF 分析（2）酶切位点分析。 B.载体选择与分析（1）多克隆位点分析（2）抗性标记分析（3）启动子与其他筛选标记分析。 C.连接体系与连接时间确定。11.参考答案：Western印迹又称免疫印迹（immunoblotting），是一种通过标记的抗体检测经SDS分离的特定蛋白质的技术。12.参考答案：病毒没有完整的细胞结构，由四种基本结构成份组成：①由一种核酸（DNA或RNA）组成的病毒基因组。②由病毒基因组编码的衣壳蛋白组成的衣壳。③来源于宿主细胞质膜系统（细胞膜、内质网膜或高尔基体膜）的包膜。④病毒颗粒中的其它内容物，包括酶、核酸结合蛋白及金属离子等。13.参考答案：D14.参考答案：D15.参考答案：21三体，微缺失，肿瘤，病原微生物等的检测与诊断。16.参考答案：D17.参考答案： ⑴.引起突变 转位可能引起多种基因突变。当转位因子插入一个基因内部，会引起这个基因的插入失活；当插入多顺反子前端的基因中时，可引起下游的所有基因停止转录，因为转位因子中含ρ依赖的转录终止信号；当插入染色体或质粒中时，常引起缺失和倒位突变。 ⑵.引入新的基因 在插入位点上引入新的基因，如含有抗药基因R质粒的转位因子，转位到染色体中时，可在该部位出现抗药性基因。若将带有Amp+R质粒的细菌与不含R质粒的带有Kan+转座子的细菌进行接合，结果产生了Amp+ Kan+的细菌，并且能够在含有氨苄青霉素及卡那霉素的培养板上生长。经过转位作用，在这种细菌内产生Amp+及Kan+的质粒，经过再次接合作用，即可产生含Amp+ Kan+R质粒细菌。 ⑶.引起生物进化 基因重排经常发生，转座作用是基因重排的重要机理之一，如通过转座，可将两个本来相隔遥远的基因靠拢，从而进行协调的控制作用，这两段基因顺序经过转座作用连接在一起有可能在进化过程中产生新的蛋白质。18.参考答案：A19.参考答案：D20.参考答案：D21.参考答案： 对基因背景清楚或部分清楚的点突变，可以采取直接检测基因点突变的方法，如等位基因特异性寡核苷酸杂交（allele specific oligonucleotide，ASO）、PCR-ELISA、等位基因特异性扩增（allele specific amplification，ASA）、PCR-RFLP、基因芯片技术等进行诊断，例如β地中海贫血，可以使用ASO、PCR-RFLP联合基因芯片技术进行诊断。 对于一些基因背景未知的点突变，可以采用单链构象多态性（single-strand conformationalpolymorphism，SSCP）、变性梯度凝胶电泳（denaturing graient gel electrophoresis，DEEG）、异源双链分析（heteroduplex analysis，HA）、DNA序列测定、蛋白截短测试（protein truncation test，PTT）等方法，如Hopkins大学医学院的研究人员设计了47 对PCR引物，分段扩增血友病A因子Ⅷ 基因片段，进行DGGE分析，发现多态性片段后再进行DNA序列分析，几乎查清了所有临床轻中度病人的点突变。22.参考答案：D23.参考答案：A,B,C,D24.参考答案：同义突变；错义突变；无义突变25.参考答案：E26.参考答案：A,B,C,D27.参考答案：A28.参考答案：D29.参考答案： 非孟德尔的母系遗传：mtDNA 因位于细胞质中，表现为严格的母性遗传，不服从孟德尔遗传，绝大部分mtDNA 是通过卵细胞遗传。 高突变率：mt DNA突变率约为nDNA的10～100倍，此外mtDNA 与有毒物质的结合频率比核DNA 高数倍至数十倍。 异质性和复制分离：异质性即突变mtDNA与野生型mtDNA 以不同的比例共存于一个细胞内的现象。复制分离即在细胞分裂的复制过程中，突变的和野生型的mtDNA 随机进入子细胞的过程，复制分离的结果使突变mtDNA 杂合体向突变纯合或野生纯合方向转变，但因突变复制具有优势，故易产生突变积累，突变积累的程度不同，突变mtDNA 在群体中的多态性程度也不同。 阈值效应：每个细胞的mt DNA有多种拷贝，而一个细胞mt DNA编码基因的表现型依赖于一个细胞内突变型mt DNA和野生型mt DNA的相对比例，mtDNA 突变导致氧化磷酸化水平降低，当能量降低到维持组织正常功能所需能量的最低值时即达到了mtDNA表达的能量阈值，可引起某组织或器官的功能异常而出现临床症状，这就是阈值效应。 半自主复制与协同作用：mt DNA虽有自我复制、转录和编码功能，但该过程还需要数十种nDNA编码的酶参加，因此mt DNA基因的表达同时也受nDNA的制约，两者具有协同作用。30.参考答案：白；阳；蓝；阴31.参考答案：A32.参考答案：A,C,D,E33.参考答案：B34.参考答案：蛋白质组35.参考答案：A36.参考答案：E37.参考答案： 混合数种荧光原色，形成不同颜色荧光探针，在一次杂交中使每一条染色体都涂上不同的颜色，可同时观察全部染色体（见图9－36）。利用这种技术可以很容易看到多条染色体间的复杂易位情况和确定标识染色体的来源。对于不知来源的基因片段及复杂的基因重组，特别是肿瘤染色体很有帮助。缺点是分辨率不够，细微的缺失可能无法判断；另外接近中心体着丝粒附近的染色质，因不易结合，也不容易判断；同时M-FISH对同一条染色体中的易位或倒位也无法判断，并且它也不能精确地显示染色体断裂的区带。38.参考答案：A,B,C,D39.参考答案： 质粒为细菌染色体外一些双链、共价闭合环状DNA分子，是能够进行独立复制并保持稳定遗传的复制子。质粒具有复制和控制机构，能够在细胞质中独立自主的进行自身复制，并使子代细胞保持它们恒定的拷贝数。 质粒一般具有以下特性：①自主复制性，它能独立于宿主细胞的染色体DNA而自主复制；②质粒不相容性；③可扩增性；④可转移性。 理想质粒载体应具备：①具有松弛型复制子；②在复制子外存在几个单一的酶切位点；③具有插入失活的筛选标记；④分子量相对较小，有较高的拷贝数。 常见的质粒载体有：pBR322质粒、pUC质粒载体、pGEM系列载体等。40.参考答案： ⑴.插入序列（insertion sequence，IS）长度约700bp～2 000bp，由一个转位酶基因及两侧的反向重复序列（16bp～41bp）组成。反向重复序列的对称结构使IS可以双向插入（正向插入或反向插入）靶位点。并在插入后于两侧形成一定长度（3bp～11bp）的顺向重复序列称靶序列（target sequence）IS的转位频率为10-7／拷贝，即在一个世代的107细菌中有1次插入。 ⑵.转座子 （transposon，Tn）是一类复杂的转位因子。Tn比IS大，约4500～20000bp，除了携带有关转座的必需基因外，还含有能决定宿主菌遗传性状的基因，主要是抗生素和某些药物的抗性基因，转座子中的转位酶称为转座酶（transposase），其功能是介导转座子从一个位点转座到另一个位点，或从一个复制子转座到另一个复制子，其转座过程与IS相似。 ⑶.Mu噬菌体  是一类具有转座功能的温和性噬菌体。温和性噬菌体有多种，如大肠杆菌λ噬菌体、大肠杆菌Mu-1、P1和P2噬菌体等。这类噬菌体具有整合能力，可以整合到细菌染色体中去，也称可转座的噬菌体（transposable phage）。当它们感染细菌后，其溶源性整合和裂解周期的复制均以转座方式进行，但转座位点是随机的。41.参考答案：B,C,D42.参考答案：A,B,D,E43.参考答案：错误44.参考答案：A45.参考答案：B46.参考答案：D47.参考答案：D48.参考答案：C49.参考答案：蛋白质组学的研究包括两个方面：一是针对蛋白质表达模式的研究，一是在蛋白质功能模式方面的深入分析。50.参考答案：B51.参考答案：C52.参考