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文档简介

基因工程及其应用第2节能发荧光的热带斑马鱼普通热带斑马鱼是不发荧光的

你知道为什么能把人的基因“嫁接”到细菌上吗?你能推测出,这种基因的“嫁接”是怎么实现的吗?你能举出一些类似的、与你的生活关系很密切的例子吗?问题探讨“嫁接”了人胰岛素基因的工程菌原理操作环境操作对象操作水平基本过程结果基因重组生物体外基因/DNA分子水平剪切→拼接→导入→表达人类需要的基因产物二、基因操作的工具

被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?思考:2、基因的“针线”——DNA连接酶连接酶的作用:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。连接的部位:

生成磷酸二酯键DNA连接酶的作用过程:连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。基因的针线:DNA连接酶

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G用同种限制酶切割3、基因的运输工具——运载体

常用的运载体:质粒、噬菌体和动植物病毒等标记基因,便于进行检测。

质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子.

作为运载体必须具备哪些条件?1)能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。2)具多个限制酶切点,以便与外源基因连接。3)具有某些标记基因,便于进行筛选。如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。1、细胞染色体(或拟核DNA分子)外能自主复制的小型环状DNA分子;2、质粒的存在对宿主细胞无影响;3、质粒的复制只能在宿主细胞内完成。质粒可作为有何特点?三、基因工程的操作步骤从细胞中分离出DNA从大肠杆菌中提取质粒限制酶提取目的基因限制酶目的基因与运载体结合DNA连接酶目的基因导入受体细胞目的基因的表达与检测基因工程操作的基本步骤四个基本步骤:1)提取目的基因2)目的基因与运载体结合3)将目的基因导入受体细胞4)目的基因的检测和表达水母(1)获得高产、稳产和具有优良品质的农作物

将富含赖氨酸的蛋白质编码基因转入玉米,获得转基因玉米。

将控制番茄果实成熟的基因导入番茄,获得转基因耐贮存番茄,是世界上进入市场的第一种转基因植物。

转入金鱼草基因的紫番茄富含花青素,可明显减缓结肠癌细胞生长,同时具抵抗心血管疾病的功效。四、基因工程的应用1、基因工程与作物育种(2)培育出具有各种抗逆性的作物新品种苏云金杆菌抗虫基因普通棉花抗虫棉提取导入培育抗虫棉的培育过程四、基因工程的应用1、基因工程与作物育种转黄瓜抗青枯病基因的甜椒转鱼抗寒基因的番茄转黄瓜抗青枯病基因的马铃薯不会引起过敏的转基因大豆乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷)生长快、耐不良环境、肉质好的转基因鱼(中国)2、基因工程与畜牧养殖导入贮藏蛋白基因的超级羊和超级小鼠导入人基因具特殊用途的猪和小鼠超级动物特殊动物我国生产的部分基因

工程疫苗和药物⑴基因工程药品的生产许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限,其价格往往十分昂贵。

微生物生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物,不但能解决产量问题,还能大大降低生产成本。3、基因工程在医学上的应用胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌,每2000L培养液就能产生100g胰岛素!使其价格降低了30%-50%!通过基因工程的方式创造了能合成人干扰素的大肠杆菌,每1Kg的培养液可提取20—40mg干扰素。干扰素治疗病毒感染简直是“万能灵药”!过去从人血中提取,300L血才提取1mg!其“珍贵”程度自不用多说。基因工程人干扰素α-2b(安达芬),是我国第一个全国产业化基因工程。安达芬具有抗病毒,抑制肿瘤细胞增生,调节人体免疫功能的作用,广泛用于病毒性疾病治疗和多种肿瘤的治疗,是当前国际公认的病毒性疾病治疗的首选药物和肿瘤生物治疗的主要药物。其它基因工程药物人造血液、白细胞介素、乙肝疫苗等通过基因工程实现工业化生产,均为解除人类的病苦,提高人类的健康水平发挥了重大的作用。人造血液及其生产⑵基因诊断与基因治疗

诊断:用放射性同位素等标记的“DNA探针”检测肝炎病毒等病毒感染及遗传缺陷,不但准确而且迅速。我国研究人员正在制备用于基因治疗的基因工程细胞

治疗:把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中,达到治疗疾病的目的。基因诊断——DNA探针基因诊断——生物芯片基因治疗——用正常的基因取代或修补病人细胞中有缺陷的基因,从而达到治疗疾病的目的

1990年9月14日,安德森对一例患ADA缺乏症的4岁女孩进行基因治疗。这个4岁女孩由于遗传基因有缺陷,自身不能生产ADA,先天性免疫功能不全,只能生活在无菌的隔离帐里。他们将这个女孩的白血球进行基因改造,使有缺陷的基因被健康的基因替代,然后把含正常白血球的溶液输入她左臂的一条静脉血管中。在以后的10个月内她又接受了7次这样的治疗,同时也接受酶治疗。后来,她的免疫功能日趋健全,能够走出隔离帐,过上了正常人的生活,并进入普通小学上学。取患者骨髓分离干细胞病毒正常基因导入正常基因的干细胞注入患者体内⑴环境监测:

基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病毒、细菌等污染。1t水中只有10个病毒也能被DNA探针检测出来4、基因工程与环境保护

利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。⑵环境污染治理:

基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。

通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类,用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。有的还能吞食转化汞、镉等重金属,分解DDT等毒害物质。

阅读课本P105讨论:转基因食品安全吗?五、转基因生物和转基因食品的安全性转基因植物的安全性争论美国人食用转基因食品已多年,超级市场上有4000多种商品是含有转基因植物成分的,还没有事例证明人吃了以后会得病,甚至会引起死亡。

加拿大、澳大利亚也是转基因食品的生产大国,均有几千万人在吃,到现在为止也没有—个案例说明它有问题。反对派的观点一英国科学家声称,转基因马铃薯会减弱老鼠免疫系统功能;美国康乃尔大学也发现,转基因玉米会危害蝴蝶幼虫及其相关生态环境。环保团体认为这种违反自然的转基因作物及产品,未经长期安全测试,长期食用可能对人类及生态环境造成负面影响。尤其是注重环境和生态保护的欧盟国家,对转基因作物更加排斥,因而抵制美国GMO产品的进口。“转基因食品,要不要贴标签?”若转基因产品与目前市售的产品具有实质等同性,则不需再加特殊的标签;若转基因产品中含有对一部分人群有过敏性反应的蛋白,则需加标签,以使购买者作出选择。我国几种常见育种方法的比较育种方法杂交育种单倍体育种多倍体育种诱变育种基因工程育种基本原理方法优点缺点实例作业:杂交→自交→选优基因重组不同个体的优良性状可集中到同一个个体上育种时间长,需及时发现优良性状杂交水稻中国荷斯坦牛花药离体培养、秋水仙素诱导加倍染色体变异明显缩短育种年限,后代一般都为纯种普通小麦花药离体培养秋水仙素处理萌发的种子、幼苗染色体变异植物茎杆粗壮,果实、种子大,营养高发育延迟,结实率低无籽西瓜物理或化学方法处理动植物、微生物基因突变提高变异频率,大幅度改良某些性状,加速育种进程有利变异少,需要处理大量实验材料,具有不确定性青霉菌高产菌株的培育黑农五号大豆基因重组将一种生物特定基因转移到另一

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